差减杂交方法的原理和应用

本文结合胡场盐诱导基因和盐抑基因的筛选，介绍了差减杂交技术的试验原理，设计思想和应用方法。     

野生芋属植物干叶片DNA的提取及PCR扩增

野生芋属植物体内多糖、色素、酚类等次生物质含量较高,严重影响从中提取的DNA的质量.针对这一问题,作者以6种芋属植物的干叶片为材料,摸索出一种适合芋属植物的DNA提取方法,并对提取的DNA进行了纯度鉴定和PCR检测,结果表明此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,样品DNA的质量和纯度较高,可用于下游分子生物学操作.     

白化猕猴(Macaca mulatta)的培育和一例白化后代的报道

1979年在云南省永胜县捕获一只雄性白猕猴。经过酪氨酸酶活性检查发现:该猴病因不是由于黑色素细胞内缺乏酪氨酸酶,而是由于酪氨酸酶不能起正常作用之故。又经检查虹膜为浅蓝灰色,瞳孔红亮,确系白化症。另又证实白化性状对其生长发育、血象指标。精液品质均无影响。染色体研究表明:二倍体染色体数目仍为2n=42:非整倍体细     

干预措施对噪声污染大鼠脑组织基因表达及去甲肾上腺素水平的影响

为了探索干预措施对噪声污染大鼠脑组织基因表达水平的影响,将50只SPF级Wistar大鼠随机分为空白对照组、噪声污染组(分为30、60、80 d B三个组)、干预组(利血平+80 d B),每组10只动物。每天刺激1次,每次刺激30 min,连续刺激15 d。第16天解剖出脑组织用酶联免疫吸附法(ELISA)检测基因表达水平。结果发现,噪声污染组大脑前额叶皮质(PFC)和海马(Hipp)组织中去甲肾上腺素(noradrenaline,NA)水平比对照组分别升高了22.87%、50.35%、94.65%和12.00%、31.76%、61.83%;干预组NA水平比对照组分别降低了33.66%和52.06%;去甲肾上腺素转运蛋白(noradrenaline transporter, NAt)水平比对照组分别升高了22.87%、50.35%、94.65%和12.00%、31.76%、61.83%,干预组NAt水平比对照组分别降低了33.66%和52.06%;脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)水平比对照组分别升高了24.87%、39.27%、67.41%和44.97%、80.81%、95.84%,干预组BDNF水平比对照组分别升高了16.36%和14.34%,升高程度明显低于噪声污染组;酪氨酸激酶受体B(Tyrosine kinase B, Trk B)水平比对照组分别升高了32.64%、59.95%、82.64%和31.02%、57.31%、80.23%,干预组Trk B水平比对照组分别升高了4.75%和10.52%,升高程度明显低于噪声污染组。结果显示,噪声污染使动物体内去甲肾上腺素等水平升高,去甲肾上腺素是噪声污染引起组织器官损伤的主要因素,脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶受体B防止神经元受损死亡,改善神经元的病理状态,利血平使去甲肾上腺素耗竭,保护组织器官免受噪声污染的损伤。     

LenkeⅡ型青少年特发性脊柱侧凸患者内固定冠状面失衡的相关因素分析

目的:探讨Lenke II型青少年特发性脊柱侧凸患者内固定冠状面失衡相关因素分析。方法:选取我院骨科已确诊为Lenke II青少年特发性脊柱侧凸患者60例,根据术前脊柱柔韧度、risser分级水平、支具支持治疗、椎体融合数、内固定系统选择等多方面影响因素对内固定后冠状面失平衡情况发生率进行分析评估,其数据结果应用统计学软件SPSS 17.0处理。结果:对术后患者评估比较,多种因素均可影响内固定后冠状面失平衡情况发生,表现为:脊柱柔韧度低、risser分级高、长时间支具佩戴、延长融合椎体范围、先进钉棒系统方案选择均可明显提高术后疗效,降低内固定后冠状面失平衡情况发生率(P0.05),其结果均有统计学意义。结论:临床上通过对患者脊柱柔韧度、risser分级情况评估来判断脊柱成熟度,并在术后积极支具辅助治疗,选用钉棒固定系统并延长融合椎体节段,可明显降低内固定后冠状面失平衡情况发生,提高远期随访疗效。     

2型猪链球菌MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除突变体的构建及毒力分析

目的:构建2型猪链球菌强毒株05ZYH33中MocR家族转录调控因子SSU0562基因敲除的突变株,探索SSU0562基因缺失对细菌基本生物学特性和毒力的影响。方法:构建左右两侧为SSU0562基因上下游的同源序列,中间部分为壮观霉素抗性基因(Spcr)的基因敲除质粒,通过同源重组的方法筛选SSU0562基因敲除突变株Δ0562。对突变株与野生株的基本生物学特性进行系统的比较分析,并且将小鼠作为动物感染的模型来研究突变株的毒力。结果:组合PCR的分析及基因测序结果均表明Spcr完全取代了S.suis2中SSU0562基因位点,表明基因敲除突变体Δ0562构建成功,反转录PCR(RT-PCR)证实了突变株Δ0562中SSU0562基因在转录水平的缺失;在溶血活性、生长速率及对小鼠的致病力方面,突变株Δ0562与野生株05ZYH33相比均无显著差别,然而革兰染色实验显示突变株Δ0562的成链能力明显减弱。结论:猪链球菌强毒株05ZYH33的毒力并未因SSU0562基因的缺失而发生显著性改变,表明SSU0562基因并非猪链球菌的毒力决定因子,但很有可能参与猪链球菌成链能力的调控。     

跨越尺度、跨越边界:面向复杂挑战的全球方法———2015年第九届国际景观生态学大会述评

<正>国际景观生态学大会每四年举办一次,旨在搭建景观生态学多尺度主题讨论和交流的国际平台,开展当前人类社会面临的环境挑战和可能的解决途径的深入研讨。第九届国际景观生态学大会于2015年7月5—10日在美国波特兰举行,由国际景观生态学会及其美国分会主办,波特兰州立大学等承办。跨越尺度、跨越多学科边界的全球性相关研究是本次会议的重点[1],旨在揭示全球快速变化背景下自然、社会复杂过程中的挑战和机遇,寻求潜在有效的管理途径。来自50多个国家和地区的900多名科学家、政府管理部门、非政府     

药用植物蛇足石杉的化学成分与药理活性研究进展

综述了蛇足石杉植物在化学成分、药理作用、临床应用等方面的研究进展。并对该植物的发展前景进行了展望。     

Janus激酶1/胞外信号调节激酶通路参与C反应蛋白诱导的心肌细胞MMP-10活性上调

为探讨心肌细胞中Janus 激酶1（JAK1）在C反应蛋白（CRP）诱导的基质金属蛋白酶（MMP）-10活性上调过程中的作用,本研究以炎症细胞因子CRP诱导MMP-10上调的原代乳鼠心肌细胞为研究对象,使用JAK1的特异磷酸化抗体,用Western 印迹技术检查JAK1的磷酸化水平的激活情况.应用Western 印迹技术和酶谱法分别检测胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化水平和MMP-10的活性变化.实验分为4组：对照组,CRP组,CRP+抑制剂组和抑制剂组. 结果显示, 磷酸化的JAK1在CRP刺激后1/12 h即可出现,在1 h达到高峰,而总的JAK1不改变;JAK1抑制剂piceatannol可以使磷酸化的ERK水平减弱,也可以使MMP-10的活性明显降低（P <0.01）. 研究结果提示,JAK1是通过激活ERK,从而上调MMP-10的活性,为心力衰竭提供了一个可能的治疗靶点.