雪豹的微卫星DNA遗传多样性

利用微卫星DNA标记,对来自青海囊谦县、治多县以及甘肃阿克塞县3个地区的36份雪豹(Panthera uncia)粪便DNA样品进行了遗传多样性研究。结果显示,在8个微卫星位点上共检测到57个等位基因,有效等位基因数为2.190~5.488,平均每个位点的等位基因数为7.130,基因频率分布不均匀;期望杂合度为0.543~0.847,平均0.759;多态信息含量为0.458~0.829,平均0.722;表明这8个微卫星位点均为高度多态性位点,有较丰富的遗传多样性。3个样地雪豹居群之间的遗传距离与地理距离相关,地理距离最近的青海省囊谦县和治多县的雪豹居群遗传距离最小。根据雪豹平均遗传分化度Fst(0.053)、平均基因流(4.488)以及STRUCTURE聚类分析结果(当K=1时,ln P(D)值最大),推测3个居群间虽然有一定的遗传距离,但均来自同一个种群,暂无分化现象。     

经会阴实时三维盆底超声评估不同分娩方式对产后女性前腔室结构和盆膈裂孔的影响

摘要 目的：探讨经会阴实时三维盆底超声评估不同分娩方式对产后女性前腔室结构和盆膈裂孔的影响。方法：回顾性分析2015年1月至2019年10月在我院接受检查的100例产妇的诊治资料。根据分娩方式的不同,将患者分为经阴道分娩组（n=55）和剖宫产分娩组（n=45）。比较两组产妇在静息状态和Valsalva状态下的前腔室和盆膈裂孔超声参数。结果：在静息状态下,两组的膀胱颈位置、逼尿肌厚度、膀胱后角和尿道倾斜角相比无差异（P>0.05）。经阴道分娩组在Valsalva状态下的膀胱颈移动度和尿道旋转角均大于剖宫产分娩组,尿道内口漏斗形成率和膀胱膨出率均高于剖宫产分娩组（P<0.05）。在Valsalva状态下,经阴道分娩组的盆膈裂孔前后径、左右径、面积和周长均大于剖宫产分娩组（P<0.05）;在静息状态下,两组的上述指标相比,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：应用经会阴实时三维盆底超声技术观察产妇前腔室结构和盆膈裂孔的参数变化,可评估产妇盆底功能受损的程度,经阴道分娩对其影响较大。     

骨质疏松大鼠脂肪基质细胞成骨能力的研究

目的:探讨骨质疏松大鼠的脂肪基质细胞有无成骨能力。方法:采用去势法构建SD大鼠骨质疏松模型,设置2组样本,分别为19月龄骨质疏松SD雌性大鼠,正常19月龄SD雌性大鼠。每组大鼠分别取腹股沟脂肪垫中脂肪,用胶原酶消化法培养获得脂肪间充质干细胞,绘制并分析细胞生长曲线;再用经典的骨向诱导液诱导2组ASCs,比较2组细胞骨向分化能力有无差别。结果:骨质疏松大鼠与正常老龄大鼠的ASCs骨向分化能力无明显差别。结论:可用去势法构建SD大鼠骨质疏松模型,并可取其细胞行进一步研究。老龄骨质疏松大鼠的ASCs也可以考虑作为种子细胞促进其自体骨愈合,从而为利用自体ASCs促进骨质疏松骨愈合打下一定的理论基础。     

EV71小鼠适应株制备及体内外感染特点

目的用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具。方法用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得到小鼠传代株。以一定浓度亲代株和传代株病毒分别接种RD、Vero、SY5Y、Caco-2四种细胞,定量方法检测各时间点不同毒株在四种细胞上的复制数量,CCK8方法测定各时间点细胞的存活率;同时,两毒株分别腹腔注射感染1日龄小鼠,定期安乐死动物,采集肺、小肠、骨骼肌、大脑四种器官组织,进行动物体内病毒半定量和定量分析,同时进行各器官组织病理学观察、免疫组织化学鉴定。结果与亲代毒株相比较,小鼠传代株(EV71-MMP4)表现出更强的肌肉来源细胞嗜性与毒性;同时,两毒株腹腔注射感染1日龄小鼠后,EV71-MMP4感染的小鼠体重增长较正常小鼠体重增长缓慢;半定量和定量RT-PCR显示,在小鼠肌肉中的病毒载量于感染后1d和5d达到高峰。EV71-MMP4感染组感染率较高、病毒组织分布较广、感染持续性较好、病毒载量较高,高剂量病毒感染后小鼠小肠、心肌和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化。免疫组织化学显示感染后小鼠骨骼肌有EV71病毒特异分布。结论阜阳EV71小鼠适应株表现出较亲代毒株更好的小鼠易感性、细胞毒性,所建立的动物模型可用于EV71病毒致病机制、感染特点的研究和病毒疫苗及药物的评价。     

悉生蚕的研究与应用

悉生蚕是指蚕体内外栖息的其他生物体是已知的蚕,不仅培育方法较哺乳动物简单,且彻底克服蚕的季节性和地域性饲育限制,为蚕在实验动物科学中的广泛应用打下基础。随着现代生物技术的发展,悉生蚕作为生物反应发生器或转基因工程动物的应用已逐步进入实用化研究阶段。     

Gluma 脱敏剂对牙本质过敏症疗效的Meta 分析

目的:运用Meta分析的方法,科学评价Gluma脱敏剂对牙本质过敏症的临床疗效,指导临床治疗。方法:检索中国生物医学文献数据库和Ovid medline数据库中关于Gluma脱敏剂和75%氟化钠甘油对牙本质过敏症治疗研究的文献,通过纳入和排除标准筛选文献,评价文献质量,提取数据,并进行Meta分析。结果:7个试验研究共1898颗牙齿纳入分析,合并RR值为1.51,95%可信区间为[1.44～1.59],合并效应检验值Z=15.68,P<0.00001。结论:表明Gluma脱敏剂治疗牙本质过敏症效果优于75%氟化钠甘油。     

桂枝茯苓胶囊对慢性盆腔炎大鼠粘连修复相关指标、免疫功能及肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-2的影响

摘要 目的：研究桂枝茯苓胶囊对慢性盆腔炎（CPID）大鼠粘连修复相关指标、免疫功能及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-2（IL-2）的影响。方法：选择SD清洁级雌性大鼠60只,根据随机数字表法将其分成6组,每组10只,分别为对照组、假手术组、模型组、高剂量组（给药剂量为2.0 g/kg）、中剂量组（给药剂量为1.0g/kg）、低剂量组（给药剂量为0.5 g/kg）。造模后,对照组和假手术组及模型组均予以蒸馏水灌胃,1次/d,剂量为1 mL/100 g,各剂量组均根据相应剂量的桂枝茯苓胶囊灌胃,1次/d。对比各组大鼠粘连修复相关指标[转化生长因子-β1（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEGF）]、免疫指标[红细胞C3b受体花环率、免疫复合物花环率、免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM]、TNF-α、IL-2水平及子宫内膜病变情况。结果：造模后,各剂量组、对照组和假手术组红细胞C3b受体花环率、IL-2、IgA、IgG和IgM水平均明显高于模型组,但各剂量组IgA、IgG和IgM水平仍低于对照组和假手术组（均P＜0.05）;各剂量组、对照组和假手术组免疫复合物花环率、TNF-α、病理综合评分、TGF-β1和VEGF水平均明显低于模型组,但各剂量组病理综合评分、TGF-β1和VEGF水平仍高于对照组和假手术组（均P＜0.05）。结论：桂枝茯苓胶囊治疗CPID可能与其抑制炎症水平、促进粘连修复、提升免疫功能有关。     

肠道病毒71型（EV71）对ICR小鼠的感染

目的研究肠道病毒71型经不同途径感染不同日龄ICR小鼠后的感染状况,了解肠道病毒71型的感染特点,为了解EV71小鼠感染机制和模型制备提供实验信息和技术支撑。方法分别通过口腔途径、颅腔途径、肌肉途径及腹腔途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠,定期安乐动物,采集各器官组织进行病原学诊断,确定EV71病毒感染情况;同时建立一步RT-PCR、病毒分离、IFA及IEA等方法。结果经腹腔途径感染成年鼠出现竖毛、弓背、消瘦症状,其他各途径感染小鼠感染后未见竖毛、弓背、觅食减少、体重减轻、精神呆滞及神经系统症状。颅腔注射3~4周龄ICR小鼠能在脑组织检测到病毒RNA,腹腔注射和肌肉注射1日龄乳鼠能在肌肉组织和肠道检测到病毒RNA,其中,肌肉组织病毒分离可检测到活病毒。本研究同时建立了分子生物学、血清学方法,为今后研究其它适合EV71的动物模型奠定了基础。结论临床分离的EV71毒株通过口腔接种、颅腔、肌肉、腹腔注射途径感染1日龄、7日龄及3~4周龄SPF级ICR小鼠的疾病程度和病毒检出不同,ICR乳鼠及成年鼠可作为该病毒感染机制、病毒体内分布等基础研究,但用作EV71动物模型应用,感染程度尚不十分理想。     

SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR测定肠道病毒71型（EV71）RNA拷贝数方法的建立

目的建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定实验动物等来源的EV71病毒RNA。方法运用EV71VP1保守区引物,优化real time RT-PCR条件,运用NASBA方法扩增EV71病毒RNA,计算拷贝数,经10倍系列稀释做出标准曲线,作为EV71病毒RNA定量检测的外标准品。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100copies/μL,PCR扩增效率达到99.5%。结论 SYBRGreenⅠ荧光染料实时定量PCR法测定EV71病毒RNA拷贝数的方法敏感性高、稳定性好,可用于EV71病毒RNA载量的定量测定。     

特发性面神经麻痹患者的运动单位数目评估与临床

目的:通过对特发性面神经麻痹患者的运动单位数目估计,并与常规面神经传导速度相结合,评估病情的严重程度,以期指导临床治疗和评价预后。方法:纳入我院诊断的特发性面神经麻痹患者32例,分别于发病第3天、第7天、第14天、1个月、3个月给予电生理检查,包括面神经传导速度、眼轮匝肌和口轮匝肌的运动单位数目估计,并与健侧做对比。根据House-Brackmann面神经功能分级再将入组患者分为轻(Ⅱ级)、中(Ⅲ级)、重度(Ⅳ～Ⅵ级)三组。同时纳入10名健康成年人作对照组,检测方法相同。结果:发病第3天、第7天32例患者全部出现患侧运动波幅下降,与健侧对比差异有统计学意义(P0.05)。于发病第14天开始,患者运动波幅开始逐渐恢复,至3个月时,绝大部分患者运动波幅与健侧对比差异无统计学意义(P0.05)。而运动单位数目的减少在整个病程中与健侧相比较差异均具有统计学意义(P0.05),第14天、1个月、3个月运动波幅开始恢复时,运动单位数目并未随之恢复,且与运动波幅不呈线性关系,与临床症状也不成正比关系。面神经运动单位数目下降的程度与患者面神经运动波幅的恢复呈正相关。结论:运动单位数目估计检查应用于特发性面神经麻痹患者,可以反映病情的严重程度,并能在一定程度上评估预后。