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猪圆环病毒2型ORF2基因在昆虫细胞中的表达及其特性 总被引:7,自引:0,他引:7
利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将圆环病毒2型的ORF2全基因克隆到杆状病毒转移载体pFastBacTM1中,获得重组转移载体pFast-OFR2,再将其转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用,经蓝白菌落筛选得到含ORF2基因的重组穿梭载体Bac-ORF2,以脂质体介导的方法将重组穿梭载体转染sf9细胞,获得重组病毒,命名为Ac-ORF2。间接免疫荧光分析表明,PCV2阳性血清能使Ac-ORF2感染的sf9昆虫细胞呈强的荧光着色; SDS-PAGE与Western-blotting分析可见大小约为28kD的特异性带,表明Ac.ORF2在sf9细胞中成功表达了PCV2-ORF2蛋白。将该表达蛋白纯化并经磷钨酸负染后,通过电镜观察可见形态与PCV2病毒粒子相似的病毒样颗粒(VLPs),其中某些颗粒由于中心浓染而似空衣壳,其直径也为17nm左右。 相似文献
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全身照射疗法(TBI)是一种姑息治疗,该方法已经成功地应用在慢性淋巴细胞白血病或滤泡性淋巴瘤等无干细胞支持的放射敏感的疾病中。目前,在血液系统恶性疾病中造血干细胞移植是较为有效的治疗手段之一,其中全身放射治疗与大剂量化疗是造血干细胞移植疗法的经典预处理方案。TBI方法主要应用在造血移植环境中,具有较强的周期非特异性抗肿瘤效应和免疫抑制效能。TBI给予干细胞移植病人超过正常骨髓的辐射耐受量,通过重建病人的造血和免疫来达到治疗目的。 相似文献
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为研究母亲环氧化物水解酶1基因(EPHXl)多态性与新生儿出生体重间关系.收集了某纺织厂342名女工的资料,用PCR-限制性片段长度多态性法分析母亲EPHXl基因型,采用多元线性逐步回归模型分析母亲EPHXl多态性与新生儿出生体重关系.结果发现调整主要混杂因素后EPHXl的His139Arg/AG139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE=-149g±56,P=0.0083).经被动吸烟分层分析,结果显示仅在有被动吸烟史人群中EPHXl的Hus139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关,(β±SE=-234g±88,P=0.0088);而根据工作紧张程度分层分析后发现,仅在有工作紧张史人群中发现EPHXI的His139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE=-157g±59,P=0.0079).我们的结果显示母亲EPHXl多态性与新生儿出生体重有显著性相关,并存在基因-环境的交互作用. 相似文献
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目的:肾脏的急性缺血缺氧性损伤是泌尿外科常见病,以肾小管间质纤维化为主要病理特点,成体干细胞在急性肾脏损伤动物模型中可以促进肾脏结构修复、改善肾脏功能,肝细胞生长因子作为抗纤维化的主要生长因子,在成体干细胞干预的急性肾脏损伤动物模型实验中起重要作用,然而以往的研究对象主要以动物模型为主,成体干细胞对肝细胞生长因子的具体调节机制尚不清。本实验通过体外分离、培养人的脐带间充质干细胞,来干预离体低氧预处理后的大鼠近端肾小管上皮细胞,探讨在体外培养条件下人脐带间充质干细胞对低氧预处理大鼠近端肾小管上皮细胞肝细胞生长因子表达的影响,为今后研究间充质干细胞治疗肾功能损害提供可靠的理论依据。方法:采用贴壁培养的方法无菌条件下分离、培养、传代人脐带间充质干细胞。细胞融合达90%时更换无血清培养基(serum.fleemedium,SFM)培养24h,收集细胞上清液即为人脐带间充质干细胞条件培养基(conditionmedium,CM);大鼠近端肾小管上皮细胞(tubularepithelialcells,TECs)于低氧环境处理1h后,随机分为对照组与CM干预组,分别培养24h和48h后检测TECs中大鼠肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)的mRNA水平、收集上清液测定大鼠HGF蛋白的含量,同时收集CM干预组中Oh,12h、24h、48h的上清液,测定其中人来源HGF蛋白的含量,并对TECs在CM干预24h和48h后行免疫组化定性人的HGF蛋白的表达。结果:在低氧预处理的培养环境下,CM干预组中,TECs中大鼠来源的HGFmRNA表达水平在24h和48h时明显高于对照组(P〈0.05);上清液中大鼠HGF蛋白的含量在24h和48h,CM干预组显著高于对照组(P〈0.05);上清液中人的HGF蛋白的含量随时间进行性增高,免疫组化染色显示在24h和48h大鼠TECs中能检测人的HGF蛋白的表达。结论:在低氧预处理的体外培养环境下,脐带间充质干细胞的条件培养基可以显著的上调大鼠自身的HGF水平,并可诱导大鼠TECs合成和分泌人的HGF蛋白,并为探究脐带间充质干细胞治疗肾功能损害提供可靠的理论依据。 相似文献
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目的:初步探讨降糖药物二甲双胍对膀胱肿瘤细胞253J的作用及其相关作用机制。方法:采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒分析二甲双胍对膀胱肿瘤细胞增殖的影响。应用流式细胞仪检测二甲双胍对细胞周期及凋亡的影响。并通过免疫印迹方法检测相关蛋白确定可能参与其中的信号分子。结果:在各时间点(24小时,48小时,72小时)二甲双胍处理组与对照组相比膀胱肿瘤细胞的增殖受到明显抑制(P0.01或P0.05);与对照组比较,二甲双胍处理组G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降(P0.01或P0.05);免疫蛋白印迹发现,二甲双胍处理组中的磷酸化AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)表达升高,同时细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达下降(P0.01或P0.05)。结论:体外实验中二甲双胍能够明显抑制膀胱肿瘤细胞的增殖,通过下调cyclin D1的表达诱导细胞周期停滞于G0/G1期。这些结果表明二甲双胍可能成为治疗膀胱癌的潜在药物。 相似文献
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基于RS和GIS的毛乌素沙地植被盖度定量估测 总被引:14,自引:4,他引:10
选取毛乌素沙地东北部的伊金霍洛旗为研究区域,以少量野外定位调查数据与其对应的遥感信息和GIS信息为基础,利用岭估计分析方法,对植被盖度估测模型及其影响因子进行系统研究.结果表明,植被盖度除受NDVI影响外,还与其他遥感信息紧密相关,岭估计方法明显地改善了最小二乘估计的缺陷,克服了变量间由于存在复共线性关系对求解待定参数所造成的不利影响,提高了估测精度.建立了以像元为单位的植被盖度估测模型,其模型检验精度达98.7%.此外,还建立了区域性植被盖度地理信息系统,实现了研究区域内任意一点(像元)或任意土地单元植被盖度的查询、更新及自动制图. 相似文献
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环氧化物水解酶1基因(EPHX1)多态性与新生儿出生体重间关系分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究母亲环氧化物水解酶1基因(EPHX1)多态性与新生儿出生体重间关系。收集了某纺织厂342名女工的资料,用PCR-限制性片段长度多态性法分析母亲EPHX1基因型,采用多元线性逐步回归模型分析母亲EPHX1多态性与新生儿出生体重关系。结果发现调整主要混杂因素后EPHX1的His139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE=-149g ± 56,P=— 0.0083)。经被动吸烟分层分析,结果显示:仅在有被动吸烟史人群中EPHX1的His139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关,(β±SE=- 234g ± 88,P= 0.0088);而根据工作紧张程度分层分析后发现,仅在有工作紧张史人群中发现EPHX1的His139Arg/Arg139Arg基因型与新生儿出生体重有显著性相关(β±SE=- 157g ±t 59, P= 0.0079)。我们的结果显示母亲 EPHX1多态性与新生儿出生体重有显著性相关,并存在基因-环境的交互作用。 相似文献
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小兴安岭森林采伐对河川径流的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用大流域径流测定与小流域对比实验相结合的方法,利用35年的径流和森林资源变化资料,对小兴安岭林区森林采伐后河川径流发生的一系列变化进行了全面系统的研究.结果表明,森林采伐后营造落叶松人工林,造林初期10年内,河川径流量表现为增加趋势;随着落叶松人工林的不断生长和郁闭成林,采伐流域的径流量逐渐减少,并趋于采伐前水平或低于采伐前水平(与对照流域相比).河川年径流量与年降水量、森林采伐面积及更新造林面积密切相关.森林采伐面积与年径流量呈正相关,森林采伐能增加河川年径流量;更新造林面积与年径流量呈负相关,更新造林能减少年径流量.而森林采伐对洪峰流量和融雪径流量均有显著增加作用. 相似文献
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目的:研究腹膜间皮细胞(Peritoneal mesothelial cell,PMC)与可吸收生物材料聚羟基乙酸(Polyglycolicacids,PGA)的相容性,为组织工程化尿道的构建奠定基础。方法:采用酶消化法,从SD大鼠腹腔中分离出PMC,常规传代,取第2代细胞与PGA混合培养,形成细胞-生物材料复合物。每两天换液1次,观察细胞形态和黏附生长状况。体外培养1周后,行扫描电镜观察和RT-PCR检测。结果:复合物体外培养1周后,PMC能成功黏附在PGA支架上,并分泌大量细胞外基质。RT-PCR提示CK-AE1/AE3和Vimentin均呈阳性表达,PMC表型未发生改变。结论:PMC与PGA有良好的细胞相容性,PGA可作为组织工程化腹膜样组织的支架材料。 相似文献
10.
土壤呼吸是陆地生态系统碳循环的关键环节之一。随着极端气候事件的频发,森林虫害的发生频率和强度也趋于增加,森林虫害爆发已经是影响森林生态系统碳循环过程的一种重要的自然干扰。气候过渡带典型森林生态系统虫灾的爆发是否会影响土壤的碳排放过程目前仍不清楚。本研究利用鸡公山地区麻栎-枫香混交林大规模爆发食叶性害虫的机会,比较虫灾爆发当年(2014)与正常年份(2015)的土壤碳排放通量,以阐明森林虫灾爆发对土壤碳排放通量的影响。结果表明:虫灾爆发当年7、8、9、10月份土壤平均温度比正常年份相应各月份分别高0.26、0.51、0.83、0.07℃,土壤呼吸分别显著提高了129.9%、77.1%、61.6%和58.9%。虫灾爆发年份生长季的平均土壤呼吸为3.55μmol m~(-2)s~(-1),比正常年份(2.77μmol m~(-2)s~(-1))高36.2%;生长季期间的平均土壤异养呼吸比正常年份增加了29.7%。该研究表明森林食叶虫害的爆发至少在短期内可导致森林土壤碳排放量呈显著的增加趋势,近而对森林生态系统土壤碳库积累产生重要影响。因此,充分认识病虫害对森林生态系统的干扰和影响,将有助于陆地生态系统碳循环的准确估算和模拟。 相似文献