史氏鲟免疫球蛋白重链可变区序列及多样性

为了研究史氏鲟免疫球蛋白重链可变区基因的组织结构和多样性,采用RTPCR技术从史氏鲟(Acipenserschrenckii)脾脏总RNA中获得了免疫球蛋白重链可变区cDNA克隆,随机挑取31个阳性克隆进行测序。结果表明:所有序列相同率高于75%,前导肽相同率高于90%,应属于同1个VH家族。其变异主要存在于互补性决定区,特别是CDR3区。在D片段序列中发现大量保守的基因序列(motif)。并发现多个VH基因片段可以共用一个J片段的现象。在基因组DNA重排过程中,VH片段可以与任意的D和J片段结合。此外,史氏鲟免疫球蛋白重链可变区的VH,D和J片段的随机重排外,外切核酸酶作用,以及在重排位点大量N,P片段的插入现象,都大大增加了鲟鱼免疫球蛋白的多样性。     

大西洋鲑杀鲑气单胞菌无色亚种的分离鉴定和致病性研究

<正>杀鲑气单胞菌为气单胞菌属(Aeromonas)革兰阴性短杆菌,可导致鲑鳟鱼类发生疖疮病或溃疡病。患病鱼的典型症状表现为体侧或尾部形成特征性脓肿,严重时脓肿部位溃烂形成溃疡,剖检可见肝脏、脂肪组织出现点状出血[1]。已有研究表明,杀鲑气单胞菌包括多个亚种如无色亚种(Achromogenes)、杀鲑亚种(Salmonicida)、杀日本鲑亚种(Masoucida)、史氏亚种(Smith)和溶果胶亚种(Pectinolytica)等[2],自Emmerich和Weibel[3]于1984年首次从患病溪鳟(Salvelinus fontinalis)中分离到该病原菌以     

中草药防治淡水鱼小瓜虫病的研究进展

多子小瓜虫是引起淡水鱼类小瓜虫病的病原,其预防和控制是目前国内外较难解决的问题之一。我们系统综述了抗小瓜虫中草药的特性、作用机制、国内外应用处方及效果,并对未来中草药抗小瓜虫病研究方向提出展望。     

伊维菌素对雄性鲫的生殖毒性评价

伊维菌素作为一种广谱、高效的新型抗寄生虫类药物,在我国农、牧、渔业均有广泛应用.为了评价伊维菌素对雄性鲫的生殖毒性效应,本文研究了口灌不同剂量伊维菌素对雄性鲫生殖腺指数、血清及精巢中性激素(睾酮和雌二醇)、血清及脑组织中的γ 氨基丁酸含量、精子超微结构及性腺组织的影响.分别以0、1、3、5倍治疗剂量,即0、0.3、0.9和1.5 mg·kg^-1剂量对鲫进行口灌给药,分别标记为A、B、C、D组,每天1次,连续3 d,停药8 d后对供试鲫各组织进行检测观察.结果表明： 随着给药剂量的增加,供试鲫生殖腺指数逐渐降低,且C和D组显著低于A组;血清及精巢中的睾酮及雌二醇、血清和脑中γ-氨基丁酸含量均表现为先升高再降低趋势,均在B组达到峰值;精子寿命逐渐降低,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级精子运动时间逐渐减少,C、D组表现尤为明显;精子超微结构和精巢组织未见明显异常.表明正常治疗剂量伊维菌素对生产期雄性鲫未产生明显生殖毒性效应,但高剂量给药可对鲫造成严重的潜在生殖毒性.     

嗜水气单胞菌对四环素类药物诱导耐药表型及机理研究

【目的】初步探讨利用四环素类药物体外诱导嗜水气单胞菌耐药后,嗜水气单胞菌对四环素类药物敏感性的变化及其耐药机制。【方法】筛选临床分离嗜水气单胞菌的四环素类敏感株,从含有1/4×MIC的强力霉素的TSA固体培养基开始,等比2倍提高诱导药物质量浓度对受试菌进行连续传代培养,以获得高耐诱导株;测定诱导菌对强力霉素和16种非诱导药物的最小抑菌浓度(MIC)及添加外排泵抑制剂N-甲基吡咯烷酮(NMP)后的MIC,分析其敏感性变化与外排作用的关系;提取诱导菌的DNA,PCR扩增其5个tet基因并测序。【结果】诱导后菌株对强力霉素的MIC显著升高,对非诱导四环素类药物也有不同程度提高,对氟喹诺酮类药物的MIC比诱导前增加几十至上千倍;对氨基糖苷类药物和利福平的MIC则有不同程度的降低;添加NMP后,所有诱导菌株对强力霉素的MIC值均有不同程度的下降;四环素类耐药基因的检测结果表明,在诱导后7号菌株中同时检测到tet A和tet E;在诱导前后的2号菌株中检测到tet C;在诱导前后的1、3、4、5、6、7号菌株中均检测到tet E。【结论】本研究表明tet E基因可能是介导气单胞菌分离株对四环素类药物耐药的优势基因,为阐明嗜水气单胞菌对四环素类药物耐药机制及耐药性与耐药基因之间的关系提供理论依据。     

5种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区序列研究

为了探讨几种鲟鱼免疫球蛋白(IgM)所包含的信息与其亲缘和进化之间的关系, 分别对俄罗斯鲟(Acipenser. gueldenstaedtii)、小体鲟(A. ruthenus)、施氏鲟(A. schrenckii)、中华鲟(A. sinensis)和欧鳇(Huso huso)的IgM重链(IgH)恒定区进行了研究。采用RT-PCR的方法对IgH核酸序列进行了克隆, 通过软件获得了相应的IgH氨基酸序列。在分别对这5种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区4个区(CH1～CH4)进行研究后发现, 其CH4区氨基酸序列相似性最高。通过对CH4区序列氨基酸变异期望值(Kaa), 物种分化时间(T)及物种间系统进化树(Phylogenetic Tree)等参数的分析, 将克隆的5种鲟鱼IgH恒定区序列与已发表的西伯利亚鲟同源序列比对(源于NCBI序列)后发现: 西伯利亚鲟与俄罗斯鲟、施氏鲟与欧鳇、小体鲟各构成一个分支, 并与中华鲟相对。实验结果从体液免疫系统的演化这个角度, 反映了被研究的鲟鱼物种间的分类地位、地理分布及进化关系之间的联系。     

烟酸诺氟沙星在松浦镜鲤体内的药动学特征

结合单纯聚集法和二步法,应用高效液相色谱(HPLC)技术研究了分别以10、30、60 mg/kg剂量对松浦镜鲤(Cyprinus carpio specularis)口灌烟酸诺氟沙星后,药物在实验鱼血浆中的药动学特征。3种给药剂量下,诺氟沙星在松浦镜鲤血浆中的血药浓度和时间关系均可用一级吸收二室开放模型进行描述,吸收半衰期(t1/2ka)分别为0.165、0.061、0.043 h,消除半衰期(t1/2β)分别为18.282、29.969、42.051 h,达峰时间(Tmax)分别为0.333、0.327、0.302 h,达峰浓度(Cmax)分别为4.780、6.247、12.689 mg/L,药时曲线下面积(AUC)分别为32.698、53.015、174.998 mg·h/L,表观分布容积(Vd)分别为1.044、4.347、4.561 L/kg。说明随着给药剂量的增加,诺氟沙星的吸收和消除速率均加快,给药剂量对药动学特征有显著影响。