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目的:优化SD大鼠胰岛细胞的分离、纯化和培养方法与条件,为研究miR-126在Ⅱ型糖尿病中的作用机制提供活性与功能良好的胰岛细胞及miR-126表达的检测方法。方法:水合氯醛腹腔注射麻醉SD大鼠,采用8 mL胶原酶Ⅴ(含DNaseⅠ100 U)逆行注射、原位消化后Hitopaque-1077梯度离心分离纯化SD大鼠胰岛细胞,从培养后的胰岛细胞中提取总RNA,分别用加尾法和茎环法进行miR-126的反转录,实时定量PCR(qPCR)检测miR-126的表达量。结果:用该方法可从每只SD大鼠中分离、纯化得到胰岛细胞372±45个,胰岛细胞纯度90%,胰岛细胞存活率95%;用加尾法和茎环法qPCR检测miR-126的Cp值分别为34.56±2.56和32.47±2.01。结论:胶原酶Ⅴ(含DNaseⅠ100 U)逆行注射、原位消化可有效避免因消化时胶状物质的产生而导致的胰岛细胞分离失败,Hitopque-1077梯度离心分离方法具有操作简单、便捷、成功率高等特点,可得到活性与功能较好的胰岛细胞;与加尾法相比,茎环法能够更灵敏地检测胰岛细胞miR-126的表达量。  相似文献   
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我们使用蝮蛇抗栓酶治疗高血脂症70例,治疗前后对血脂水平及血液流变学进行对比分析,现报告如下。1 临床资料1.1 一般资料 高血脂症70例,男40例,女30例。年龄40~70岁,平均年龄55岁。诊断按我院检验科所定标准。病为单纯性高血脂症,无糖尿病、肝肾疾病及内分泌疾病。经统计学处理为P<0.5。1.2 用药方法 住院治疗,提前1周停用降脂药物,特殊病人给予对症治疗。用生理盐水300ml加蝮蛇抗栓酶0.75IU,每天静脉滴注1次,14天为1疗程。用药前禁酒,给予正常饮食。用药前当天早晨抽血和用药后第2天早晨抽血对血脂及血液流变学进行分析。1.3 观…  相似文献   
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