环介导等温扩增快速检测B群链球菌的临床应用

目的建立采用环介导等温扩增（LAMP）技术从临床标本中快速检测B群链球菌的方法。方法根据美国国家生物信息中心上提交的B群链球菌的cfb基因序列（登陆号X72754）设计特异LAMP引物,以热裂解法提取标本中细菌的DNA,然后以LAMP技术扩增cfb基因来鉴定其是否为B群链球菌。在采用LAMP技术检测B群链球菌的同时,以选择性培养法和PCR技术平行检测相同标本,并将3种方法的检测结果比较。结果在176例阴道拭子和176例直肠拭子中,选择性培养法检测到的B群链球菌例数为49和61、LAMP法检测到的B群链球菌例数为49和59,PCR法检测到的B群链球菌例数为48和58。以选择性培养法为金标准,LAMP法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为96．7％和100％,PCR法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为95．1％和100％。LAMP法检测B群链球菌的时间为2h左右,模拟菌株的检测结果显示该方法的最低检测限为10^2CFU／mL。结论该方法灵敏度高,特异性强,操作方便简单,适合从临床标本中快速检测B群链球菌。     

B群链球菌耐药性及红霉素耐药机制的研究

目的探讨荆州地区GBS对常用抗生素的耐药谱和对红霉素的耐药机制。方法采用选择性培养法从阴道和肛门拭子中分离B群链球菌(GroupB Streptococci,GBS),用标准的K-B法对常用的7种抗生素进行药敏试验,然后针对红霉素耐药菌株检测耐药基因ermA、ermB和mefA。结果 176株GBS对头孢噻肟和万古霉素均敏感,对青霉素和氨苄青霉素虽然没有耐药但其中介率达到12.0%。对红霉素的耐药率和中介率分别为35.8%和6.8%;对克林霉素的耐药率和中介率分别为9.5%和12.5%。63株对红霉素耐药的GBS中有22株同时对克林霉素耐药(cMLS型),有41株对红霉素耐药而对克林霉素敏感(M型)。在22株cMLS型耐药的菌株中有18株检测到ermB基因,2株检测到检测到ermA基因。在M型耐药的菌株中有32株检测到mefA基因,6株检测到ermB基因,1株检测到检测到ermA基因。结论青霉素是治疗本地区GBS感染的有效药物,但本地区GBS对红霉素的耐药比较严重。mefA介导的外排机制可能是是本地区分离的GBS对红霉素耐药的主要机制。     

洛南盆地1995-1999年野外地点发现的石制品

本文研究了1995-1999年期间在洛南盆地南洛河及其支流两侧阶地发现的50处旷野类型旧石器地点的1751件石制品.这些野外地点分布在第2级阶地者41处,第3级阶地4处,第4级阶地3处,另外还有2处分布于较高的第5级古老的阶地上.石制品的统计分析显示洛南盆地野外地点是以大中型石片和第二次加工修理的大型石片及砾石工具为代表的、两面加工技术发达的旧石器时代早期文化.     

FISH和IHC检测HER2基因及蛋白在乳腺癌诊治中的应用

目的对比研究免疫组织化学(IHC)与荧光原位杂交(FISH)方法检测乳腺癌中C-erbB-2蛋白表达和HER2基因扩增,评估两种方法的实际应用价值。方法 IHC和FISH法分别检测58例乳腺癌组织中C-erbB-2蛋白表达和HER2基因扩增状况,并进行一致性分析。结果IHC检测蛋白阳性2+和3+共22例,占总病例的37.9%,58例乳腺癌中FISH检测出HER2基因扩增17例,占29.3%。IHC检测C-erbB-2蛋白3+的12例中11例HER2基因扩增阳性,1例无扩增;C-erbB-2蛋白2+者10例,其中5例可见HER2基因扩增;C-erbB-2蛋白1+者11例HER2基因扩增仅1例。C-erbB-2蛋白阴性病例共25例均未检测到基因扩增。结果显示IHC检测C-erbB-2蛋白与FISH检测HER2基因扩增状态有较高的一致性(k=0.681,P0.01),C-erbB-2蛋白阴性和3+标本与HER2基因扩增阳性率比较差异无统计学意义(P0.05);而C-erbB-2蛋白1+和2+病例与其HER2基因扩增差异具有统计学意义(P0.05)。结果 IHC检测C-erbB-2蛋白强阳性(3+)和阴性(0)与HER2基因扩增有较高的一致性,可作为临床是否应用Herceptin治疗的依据,而C-erbB-2蛋白2+和1+病例必须进一步行HER2基因扩增检测。