新基因Nischarin生物信息学分析及初步验证

目的:对新基因Nischarin进行生物信息学分析,探索其新功能特征,并通过实验进行初步验证。方法:用生物信息学方法对Nischarin进行初步分析,阐明了它的基因结构、染色体定位、编码蛋白质的理化性质、相互作用基因、相互作用蛋白、亚细胞定位、蛋白质功能域等信息。最后采用细胞免疫荧光对其DNA结合位点进行初步验证。结果:对新基因Nischarin的上述性质进行了有效的预测,分析表明该基因结构复杂,相互作用基因或蛋白多,亚细胞分布预测复杂。验证了Nishcarin存在的DNA结合位点。结论:通过生物信息学分析,表明新基因Nischarin是一个复杂的基因,可能存在的多种蛋白表达形式、这些不同的蛋白可能存在不同的亚细胞分布,且该蛋白可能与多种蛋白存在相互作用,上述基因和蛋白特性可能是Ⅰ型咪唑啉受体(Imidazoline-1 receptor,I1R)复杂药理学作用的分子基础。     

南充高坪机场短耳 鸮 越冬期的食性分析和习性观察

2006年3～5月,收集南充高坪机场草地和周围松林越冬期短耳鸮(Asio flammeus)的食团,进行食性分析。在805个完整食团和一些零碎的食团中,小型兽类是短耳食物组成的主要成分,占98.4%,其中四川短尾(Anourosorex squamipes)所占比例最高,为97.2%。通过调查短耳鸮的食团在南充高坪机场草地里的分布情况,分析短耳v在机场草地的栖息地选择,发现短耳鸮并没有选择草高和密集的区域作为栖息场所,而高20cm左右的白茅(Imperata cylindrical)丛是短耳最喜欢栖息的场所。     

谷子SiMAPK3基因的克隆和表达特性分析

丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白质激酶,在植物生长发育、响应逆境胁迫及激素信号转导等方面具有重要作用。以谷子品种豫谷1号为试材,克隆与拟南芥AtMAPK3同源性最高的谷子SiMAPK3基因,并系统利用生物信息学方法分析SiMAPK3蛋白理化性质、结构与功能;利用RT-qPCR技术检测SiMAPK3基因在谷子拔节前期不同组织和不同非生物逆境胁迫下的表达水平。结果表明,谷子SiMAPK3基因开放阅读框为1 128 bp,编码一个含有376个氨基酸的蛋白,预测蛋白分子量为43 427.85 Da,等电点为5.46。谷子SiMAPK3为不含信号肽的亲水性膜外蛋白,其二级结构包含44.27%的α螺旋、14.67%的β折叠、5.07%的延伸链及36.00%的无规则卷曲,其第44-328位氨基酸之间含有Pkinase保守结构域,属于MAPK蛋白激酶家族。谷子SiMAPK3三级结构与拟南芥MAPK具有很高的相似度,存在着11个丝氨酸、8个苏氨酸、4个酪氨酸及大量潜在磷酸化位点。RT-qPCR分析表明,SiMAPK3在拔节前期谷子根、茎和叶中均有表达,其在叶片中的表达量最高,约为...     

骨髓基质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

目的探讨大鼠骨髓基质干细胞向心肌样细胞分化后超微结构和细胞因子表达的变化,为下一步细胞移植治疗扩张型心肌病提供理论依据。方法在体外扩增、定向诱导骨髓基质干细胞向心肌样细胞分化的基础上,电镜下观察骨髓基质干细胞诱导前后超微结构的改变,RT-PCR检测心肌特异性因子ANP、BNP、α-MHC、β-MHC的表达,并与原代培养的心肌细胞比较,观察二者之间的生物学异同。结果免疫组化法证实诱导后的骨髓基质干细胞向心肌样细胞分化,电镜下胞浆内可见糖原颗粒,肌原纤维排列与原代培养的心肌细胞相似;RT-PCR证实诱导后的骨髓基质干细胞表达心肌特异性因子ANP、BNP、α-MHC、β-MHC。结论骨髓基质干细胞经5-氮胞苷定向诱导后在超微结构和细胞因子的表达上类似于心肌细胞,已向心肌样细胞分化。     

缬沙坦胶囊联合醋酸泼尼松片治疗原发性肾病综合征患儿的疗效及对肾功能及炎性因子的影响

目的:探讨原发性肾病综合征(NS)患儿在醋酸泼尼松片治疗的基础上联合缬沙坦胶囊治疗的临床疗效及对肾功能和炎性因子的影响。方法:选取2017年2月~2019年4月期间我院收治的NS患儿107例,根据随机数字表法分为对照组(n=53,醋酸泼尼松片治疗)和研究组(n=54,对照组的基础上联合缬沙坦胶囊治疗),比较两组患儿的临床疗效、肾功能指标及炎性因子指标变化情况,记录两组治疗期间不良反应情况。结果:研究组治疗12周后的临床总有效率为90.74%(49/54),高于对照组的69.81%(37/53)(P<0.05)。两组患儿治疗12周后白蛋白(Alb)较治疗前升高,24 h尿蛋白定量、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)均较治疗前降低(P<0.05);研究组治疗12周后Alb高于对照组,24 h尿蛋白定量、Cr、BUN、IL-6、IL-8、TNF-α则低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较无差异(P>0.05)。结论:缬沙坦胶囊联合醋酸泼尼松片治疗在提高NS患儿疗效的同时还可有效改善患儿肾功能及炎性因子水平,用药安全性较好。     

胰腺癌免疫治疗新进展

胰腺癌高发病率和低治疗率使其死亡率逐年上升,因此急需新的治疗方法改善胰腺癌患者预后。近年,免疫疗法在肿瘤治疗上取得的突破性进展,CAR-T疗法、免疫点抑制剂,如细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4和程序性死亡1/程序性死亡受体1已经在治疗恶性肿瘤上取得了巨大成功,树突状细胞(dendritic cells, DCs)疫苗、溶瘤病毒等免疫疗法也在治疗肿瘤方面表现出一定疗效。基于胰腺癌的部分免疫发病及逃逸机制,免疫疗法已部分运用于胰腺癌研究和临床试验,且取得了一定的疗效。本文将对胰腺癌免疫疗法最新进展作一综述。     

四川蜂桶寨自然保护区斑羚春季生境选择

2007年3～5月对四川宝兴县蜂桶寨自然保护区斑羚春季的栖息地进行调查.结果 表明,斑羚春季喜欢在离食物与水源地较近,隐蔽条件较好,远离干扰的中低山(海拔1600～2900 m)的南坡的向阳面、中坡位、坡度约30°～50°的针阔混交林和落叶阔叶混交林活动.     

缺氧环境下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白和mRNA的表达

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）在缺氧环境下凋亡相关蛋白和mRNA的表达。方法将接种的P3细胞置于94％N2、1％O2和5％CO2缺氧箱中37℃孵育,分别于0．5h、1h、2h、4h、6h、8h和12h取出分别应用Annexin V／PI双染法进行流式细胞仪（FCM）分析MSCs凋亡率（Apoptotic Rate,AR）,并同步用免疫细胞化学、western blotting和Rt-PCR等方法检测Bax／Bcl-2,Fas／FasL和Caspase-3蛋白和mRNA的表达。结果1．缺氧前,免疫细胞化学法未检测到Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白表达,缺氧0．5h后均可较强表达;2．各缺氧时间点Bcl-2、Bax、Fas、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表达较缺氧前均显著性增高（P均〈0．05）;随缺氧时间延伸,Bcl-2蛋白和mRNA表达不显著增加（P〉0．05）,而Bax、Fas、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表达均显著增加（P均〈0．05）,但缺氧6-12h时间点之间表达均没有统计学意义（P均〉0．05）;3．AR和Bcl-2／Bax蛋白（r1=0．417,P=0．043）及mRNA（r2=-0．435,P=0．040）呈显著负相关,而和Fas（r1=0．639,P=0．025;r2=0．711,P=0．018）、Fas-L（r1=0．581,P=0．022;r2=0．605,P=0．037）、Caspase-3（r1=0．704,P=O．014;r2=0．657,P=0．026）蛋白及mRNA均呈显著正相关。结论在缺氧促进MSCs凋亡的过程中,Bcl-2蛋白和mRNA可能起着保护作用,而Bax、Fas-L、Fas、Caspase-3蛋白和mRNA可能在MsCs凋亡的进程中起着促进作用。     

结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎脑脊液与血浆生化指标比值的比较研究

目的:比较结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎脑脊液与血浆生化指标比值。方法:选择2010年2月~2014年12月我院结核性脑膜炎患者82例,化脓性脑膜炎98例,检测脑脊液与血浆中的蛋白、糖及氯化物含量,并计算比值。结果:两组患者脑脊液蛋白、糖含量的差异无统计学意义(P0.05),化脓性脑膜炎组的氯化物含量高于结核性脑膜炎组(P0.05);两组血浆糖含量的差异无统计学意义(P0.05),化脓性脑膜炎组蛋白和氯化物含量明显高于结核性脑膜炎组(P0.05);化脓性脑膜炎组蛋白比值低于结核性脑膜炎组,氯化物比值则高于化脓性脑膜炎组,差异均有统计学意义(P0.05);两组间糖比值比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:脑脊液与血浆生化指标比值对鉴别诊断结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎有重要意义。     

骨髓基质干细胞移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能改善作用机制的研究

通过对心肌胶原纤维、微血管生成、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的研究,探讨骨髓基质干细胞(BMSSCs)心肌内移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能的保护机制．应用阿霉素注射法建立扩张型心肌病心衰大鼠模型,成功建模后移植4', 6-二乙酰基-2-苯基吲哚(DAPI)标记的BMSSCs．分别于术后1、2、3、4周进行血流动力学检测,利用免疫组化、RT-PCR技术分析心肌胶原纤维、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1、Flk-1表达的改变,以及微血管密度．结果显示,移植细胞于术后4周通过免疫荧光可检测到存活．于术后2周开始,移植组心功能较对照组改善,表现为移植组收缩压(LVSP)、左心室内压最大上升或下降速率(?dp/dt)较对照组显著升高,舒张压(LVDP)显著下降,P < 0.05．移植组心肌胶原纤维沉积减少,光密度值比较P < 0.05．移植组VEGF、Flt-1、Flk-1表达较同期对照组增加,并张且与其受体达峰时间不同步．4周时移植组微血管密度明显高于对照组．上述结果表明,BMSSCs移植后可通过上调受体内VEGF、Flt-1、Flk-1的表达,促进血管新生,减少胶原纤维沉积,从而改善受体心脏的功能．