解淀粉芽孢杆菌抗菌活性物质的分离纯化及抑菌活性研究

植物真菌病害给农业生产带来了巨大损失，因此对生物农药的开发迫在眉睫。从堆肥中分离得到一株解淀粉芽孢杆菌，它具有强烈的抗真菌活性。其发酵液经硫酸胺沉淀得到粗提液，粗提液经Hiprep 26/10 Desalting，HiLoad 26/10 Q Sepharose和HPLC多步柱层析，分离纯化得到一种抗真菌活性物质。ESI-MS质谱法测得其分子量为1498 Da。经活性检测发现，该纯物质对尖孢镰刀菌、草莓蛇病菌等植物病原真菌具有很强的抑制作用，对毛霉、黑曲霉等食品腐败菌也有抑制作用。经过显微镜观测，该物质可造成草莓蛇病菌菌丝生长异常，表现在菌丝弯曲，顶端膨大，分生孢子数量减少。     

金黄色葡萄球菌agr系统受体蛋白AgrC的跨膜结构分析析

金黄色葡萄球菌agr 系统中,受体组氨酸蛋白激酶AgrC 能够被同源或非同源自诱导信号分子(autoinducing peptides,AIPs) 激活或抑制。通过TMHMM软件对四种agr 型AgrC蛋白的氨基酸序列进行分析及跨膜结构预测,发现agr玉型和agr郁型AgrC蛋白可能在胞外的第二个Loop 环与其AIP相互作用,agr域型可能与AIP域在胞外的第一个或第二个Loop 环相互作用。     

益生素制剂菌种的选择研究及其进展

益生素作为一种活菌制剂已经在功能性食品以及医药行业中得到应用,选择新的和能满足特殊消费群体的菌种将成为近几年研究的重点。讨论了目前益生素研究中存在的问题,从安全性、功能性以及技术可行性三个方面对如何选择优良的益生素菌种进行了详细的探讨,综合了益生素制剂菌株选择研究的方法及手段,并对目前已经应用和研究的菌种作了简单介绍。     

金黄色葡萄球菌附属基因调节系统研究进展

金黄色葡萄球菌的微生物病原特性非常复杂并且不断地产生抗生素抗性，目前迫切需要增加对金黄色葡萄球菌的了解。它所引起的疾病与大量毒力因子相关，这些毒力因子的表达是受多个基因调控，其中agr（accessory gene regulator，附属基因调节）是最主要的一个。由于agr系统与人类的多种疾病有关，研究的较为深入，现已成为一个理解群体感应激活和抑制机制的模型系统。agr系统以及其它菌的群体感应系统已经引起了越来越多研究者的注意，本文对agr系统的研究现状、研究过程中发现的问题及其潜在应用价值作了深入地探讨。     

洋葱伯克霍尔德菌CF-66环二肽的分离纯化及抑菌活性研究

植物真菌病害给农业生产带来了巨大损失,因此对高效、低毒、低残留的生物农药的开发迫在眉睫。洋葱伯克霍尔德菌CF-66（Burkholderia cepacia CF-66）对真菌类病原菌具有强烈的抑制作用。其发酵液经减压浓缩和乙酸乙酯萃取得到粗提液,粗提液经反复硅胶柱层析和反相高效液相色谱（RP-HPLC）多步柱层析,首次分离纯化得到一种环二肽——cyclo(Phe-Pro)(cFP)。利用气质联用（GC-MS）系统和HPLC进行定性和定量,结果表明分离纯化物质呈单峰,纯度较高且经标准曲线算出其浓度约为15 mg/ml。MIC值的测定结果表明该物质对立枯丝核菌、黄瓜菌核、玉米弯孢病菌等植物病原菌及冻土毛霉、黄曲霉、米根霉等食品腐败菌均具有较强的抑制作用。经显微镜观察发现,该物质可使丝状真菌菌丝生长异常,菌丝由光滑细长变得粗糙、弯曲、短粗且顶端膨大呈泡状。     

乳酸菌素-安全、天然的食品防腐剂

乳酸菌素是一类由乳酸菌在代谢过程中通过核糖体合成机制产生的抗菌多肽或蛋白,胞外分泌,能够通过在细胞膜上形成孔道或抑制细胞壁合成来达到溶菌目的。主要从乳酸菌素在食品中应用的安全性、影响乳酸菌素生物合成的条件、乳酸菌素活性的影响因素、以及目前乳酸菌素在食品领域的应用等方面进行了评述,揭示了乳酸菌素广阔的市场应用前景,从而使乳酸菌素这种天然防腐剂能获得更好地开发和利用。     

洋葱伯克霍尔德菌CF_66抗菌物质的分离纯化及性质的研究

洋葱伯克霍尔德菌CF_66能够抑制立枯丝核菌等若干植物病原菌和其它一些真菌的生长。CF_66菌发酵液的粗提液通过Sephadex_75pg、Sephacryl S_100柱层析分离纯化,获得抗菌物质CF66I。此抗菌物质耐热性强,耐碱,但在强酸性条件下不稳定。低浓度有机溶剂的存在有利于抑菌活性的提高。对其结构的研究表明CF66I是以(CH2CH2O)n为主要单元结构并带有酰氨键的化合物。     

洋葱伯克霍尔德菌CF_66抗菌物质的分离纯化及性质的研究

洋葱伯克霍尔德菌CF-66能够抑制立枯丝核菌等若干植物病原菌和其它一些真菌的生长。CF-66菌发酵液的粗提液通过Sephadex-75pg、Sephacryl S-100柱层析分离纯化,获得抗菌物质CF66I。此抗菌物质耐热性强,耐碱,但在强酸性条件下不稳定。低浓度有机溶剂的存在有利于抑菌活性的提高。对其结构的研究表明CF66I是以(CH2CH2O)n为主要单元结构并带有酰氨键的化合物。     

一种从活性污泥中提取微生物总DNA的方法

对活性污泥的微生物群落进行研究的首要前提是获得大量的高纯度微生物基因组DNA。本文建立了一种高效、简便的提取活性污泥总DNA方法。从提取的核酸总量、纯度、基因组完整性等多方面对所得到的DNA质量进行了评价，结果表明，本法从单位活性污泥中提取的DNA得率为105-823μg/g，结构完整，纯度很高，无需进一步的纯化，可直接进行微生物群落分析及构建文库等后续分子生物学操作。现在实验室使用的提取活性污泥中DNA的方法，纯度普遍都无法达到PCR反应和建立文库的要求，本文建立的活性污泥DNA提取方法则可以克服这一难题。     

金黄色葡萄球菌agrC的克隆及序列分析

金黄色葡萄球菌agr系统能够调控多种毒力因子的表达,在该系统中,受体组氨酸蛋白激酶AgrC感受外部信号并传递给细胞内,在整个agr系统中起着重要的作用,成为药物发现的新靶点,该蛋白由agrC基因编码。通过分析发现,agrC基因的保守性非常差,这可能是由于它作为受体需要与信号分子结合的特异性所决定的。通过对已经公开的agrC基因序列进行比对分析,设计了多条引物,以金黄色葡萄球菌ATCC 6538的基因组DNA为模板,进行了PCR扩增并转化大肠埃希菌克隆该基因,获得了金黄色葡萄球菌ATCC 6538附属基因调节系统agrC基因的全序列。同时,通过对现有的提取金黄色葡萄球菌基因组的方法做了改进,得到了一种大量提取了金黄色葡萄球菌DNA的方法,获得的DNA纯度较高。