红罗非鱼Na~+-K~+-ATPase α基因的克隆及其在不同盐度条件下mRNA表达差异

为获知红罗非鱼(Oreochromis sp.)Na+-K+-ATPaseα基因的全长分子结构及其在不同盐度条件下的表达情况,采用同源克隆及cDNA末端快速扩增(RACE-PCR)方法,首次在红罗非鱼鳃组织中克隆到了全长为3 379 bp的Na+-K+-ATPaseα基因全长cDNA序列,该序列包含3 072 bp的开放阅读框(ORF),143 bp的5'末端非编码区(UTR)和164 bp的3'末端非编码区(UTR),编码1023个氨基酸,预测分子量为112.5 kD,理论等电点为5.26。BLAST分析显示红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα基因编码的氨基酸序列与其它已知物种相应基因编码的氨基酸序列的同源性达到97%-99%;系统进化分析显示,红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα亚基与萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)和莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)亲缘关系较近。应用Real-time PCR技术,以β-actin基因为内参,对不同盐度(0、15、25、32 g/L)条件下鳃组织中Na+-K+-ATPaseα基因的表达情况进行了比较分析,结果表明,当盐度为25 g/L时,Na+-K+-ATPaseα基因的表达量达到峰值,而盐度升至32 g/L时,其表达量呈下降趋势;各盐度处理组中,养殖12 h后Na+-K+-ATPaseα基因的mRNA表达量显著上升(P0.05)并达到最高;随着养殖时间的延长,24 h后该基因mRNA表达量开始降低,但仍然显著高于对照组的表达量值(P0.05)。     

盐度和温度对中华虎头蟹(Orithyia sinica) 存活和摄饵的影响

进行盐度和温度对中华虎头蟹存活和摄饵影响的试验,结果发现,盐度骤变时,盐度15—408d后蟹存活率100％。盐度10—45蟹能摄饵,日平均摄饵量达1．31g以上;盐度20—40是蟹适宜摄饵盐度,日平均摄饵量达3．65g以上;盐度30—35蟹摄饵最佳,日平均摄饵量达5．24g以上。盐度渐变时,盐度15—55蟹8d后存活100％;盐度5—50蟹能摄饵;盐度25—35为蟹摄饵适宜盐度,日平均摄饵量达4．13g以上;盐度30为最佳盐度,日平均摄饵量达4．53g。温度骤变时,10—30℃7d后蟹100％存活。10—35℃蟹能摄饵,日平均摄饵量达1．10g以上;20—30℃蟹摄饵最佳,日平均摄饵量逐渐增加,达8．76g以上。温度渐变时,0—30℃蟹7d后100％存活,35℃蟹存活率达80％。10—35℃蟹能摄饵;20—30℃蟹摄饵较佳,日平均摄饵量达12．61g以上;250C蟹摄饵最佳,13平均摄饵量达14．35g。     

卵形鲳鲹血细胞发生的观察

对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)肝脏、脾脏、头肾和体肾4种组织器官内各种血细胞的发生和外周血液的血细胞分类组成进行了观察。结果表明:卵形鲳鲹的红细胞主要在脾脏、体肾和头肾中发生;淋巴细胞主要在体肾、头肾和脾脏中发生;粒细胞主要在头肾和体肾中发生;单核细胞在肝脏、头肾和脾脏中均有发生;而血栓细胞的发生在这4种组织中均未观察到。卵形鲳鲹在外周血液中的白细胞包括淋巴细胞、血栓细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞。在这几种白细胞中,单核细胞数量最少,很难观察到,数量少于1%;嗜中性粒细胞稍多,有(9.25±5.64)%;血栓细胞占(38.23±21.86)%;淋巴细胞最多,达(52.52±21.65)%。