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1.
乙型肝炎病毒核心蛋白HBc,可在体外自组装形成二十面体对称结构的病毒样微粒VLPs。VLPs可将外源序列重复且高密度地展示在表面,VLPs进入机体后能够快速诱导机体产生针对外源性抗原的特异性体液免疫及细胞免疫应答,具有极强的免疫原性与生物活性。因此,HBc-VLPs可以作为一种安全、有效的疫苗载体。文中设计了一种能够实现与抗原定点偶联的HBc-VLPs,并开发了一套高效制备HBc-VLPs的方法。通过定点突变技术,使翻译后的多肽序列第80位氨基酸由Ala变为Cys,在HBc-VLPs的主要免疫显性区域引入一个定点交联位点,构建了原核表达载体pET28a(+)-hbc,表达、纯化获得了高纯度的HBc(A80C) 单体蛋白;在PB缓冲体系中,HBc(A80C) 蛋白自组装形成HBc-VLPs纳米粒子。粒度仪的测定结果表明,HBc-VLPs纳米微粒的平均粒径为29.8 nm,透射电子显微镜观察到HBc-VLPs形成粒径约为30 nm的球形微粒,其形态与天然的HBV微粒相似。以流感病毒M2e抗原肽为模式抗原,通过Sulfo-SMCC氨基-巯基双功能交联剂,将M2e定点连接于HBc-VLPs通过突变引入的Cys残基处,制备了M2e-HBc-VLPs模式疫苗,通过细胞荧光示踪,验证了HBc-VLPs结构的完整性与M2e的正确交联。动物免疫实验表明该疫苗能够有效刺激小鼠产生抗原特异性的IgG抗体,验证了疫苗载体HBc-VLPs的有效性。研究结果为HBc-VLPs作为疫苗载体的研究奠定了基础,能够促进HBc-VLPs载体疫苗的研发以及HBc-VLPs在其他领域的应用。  相似文献   
2.
为研究纳米硒对岢岚绒山羊妊娠母羊及胎儿抗氧化能力、硒蛋白表达和生长发育的影响。选择体重相近的岢岚妊娠绒山羊80只,随机分为2组,分别喂以基础日粮和添加0.5mg/kg DM纳米硒的饲粮,实验期110d。结果表明:日粮中纳米硒的添加极显著(P<0.01)地提高了母羊及胎儿血清中GSH-Px、SOD的活性;极显著(P<0.01)提高了母羊及胎儿肝、胎盘组织中GSH-Px、SOD的活性;极显著(P<0.01)降低了母羊及胎儿血清与胎盘组织中MDA的浓度。在日粮中添加纳米硒后,母羊及胎儿肝、肾组织中cGPx1 mRNA的表达显著提高(P<0.05);胎盘组织中的cGPx、SeP、Trx1 mRNA的表达极显著提高(P<0.01)。妊娠母羊的基础日粮中加入纳米硒,极显著(P<0.01)提高了妊娠母羊及胎儿血清、肝、胎盘组织中IGF-1的含量和IGF-1mRNA表达量,显著增加了胎盘、胎儿及胎儿肝、肾组织的重量(P<0.05)。日粮中添加0.5mg/kg DM纳米硒,增强了妊娠母羊及胎儿的抗氧化能力,提高了IGF-1、cGPx1、SeP和Trx1 mRNA的表达量,进一步促进了胎儿的生长发育。  相似文献   
3.
本试验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为材料,研究玫瑰花提取物(RE)对砷胁迫下酵母细胞生长和凋亡的影响。试验以抗坏血酸(Vc)溶液为标准抗氧化对照物,1.0 mmol/L亚砷酸钠(As)为酵母胁迫浓度,分别设置了酵母对照组、酵母+RE(1.5 g/L)培养组、酵母+Vc(0.1 g/L)培养组、酵母+As(1.0 mmol/L)培养组、酵母+As+RE培养组和酵母+As+Vc培养组。酵母细胞培养24 h后,利用噻唑兰(MTT)细胞增殖法、平板点样法、荧光素二乙酸/碘化丙锭(FDA/PI)染色法、4', 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡流式检测法测定了酵母细胞的生长增殖与凋亡。试验结果显示,RE有效地缓解了砷对酵母细胞的损伤,极显著提高了砷胁迫下酵母细胞的生长率和存活率(P0.01),极显著抑制了砷胁迫下酵母细胞的凋亡(P0.01)。结果证实,RE对砷胁迫酵母细胞的凋亡有显著抑制作用,在50%的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率下,其对砷胁迫下酵母细胞的凋亡抑制率显著高于Vc(P0.05)。因此,RE作为天然植物提取物,因其绿色、无毒的作用机制,将在对抗重金属污染、提高机体抗氧化力、缓解氧化损伤等方面有着更广阔的应用前景。  相似文献   
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