免疫细胞浸润在非小细胞肺癌诊断与预后中的应用

免疫细胞浸润对癌症的诊断与预后有着重要意义。文中收集TCGA数据库已收录的非小细胞肺癌肿瘤与正常组织基因表达数据,利用CIBERSORT工具得到22种免疫细胞占比来评估免疫细胞浸润情况。以22种免疫细胞占比为特征,用机器学习方法构建了非小细胞肺癌肿瘤与正常组织的分类模型,其中随机森林方法构建的模型分类效果AUC=0.987、敏感性0.98及特异性0.84。并且用随机森林方法构建的肺腺癌和肺鳞癌肿瘤组织分类模型效果AUC=0.827、敏感性0.75及特异性0.77。用LASSO回归筛选22种免疫细胞特征,保留8种强相关特征组成的免疫细胞评分结合临床特征构建了非小细胞肺癌预后模型。经评估及验证,预后模型C-index=0.71并且3年和5年的校准曲线拟合良好,可以对预后风险度进行准确预测。本研究基于免疫细胞浸润所构建的分类模型与预后模型,旨在对非小细胞肺癌的诊断与预后研究提供新的策略。     

Asia-Ⅰ口蹄疫病毒P1-2A基因真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验

目的 构建含有Asia-Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A 基因的真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A，并用pVAXⅠ-P1-2A免疫小鼠，评价其体液免疫和细胞免疫水平。方法 通过RT-PCR 方法扩增得到含有FMDV P1-2A编码区的目的基因，并将其克隆到pMD18-T载体上。将pMD18-T-P1-2A和 pVAXⅠ分别经EcoRⅤ和XbaⅠ双酶切后连接构建真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A。将酶切鉴定正确后的重组质粒转染HeLa细胞进行IFA检测。再进行小鼠血清特异性抗体试验、小鼠T淋巴细胞增殖试验和IFN-γ ELISPOT试验。结果 酶切结果与预期目的条带大小相符；荧光结果表明经pVAXⅠ-P1-2A转染的细胞有明显的黄绿色荧光，说明P1-2A基因在HeLa细胞中得到了表达；小鼠免疫结果表明，用免疫的小鼠都产生了较强的体液免疫和细胞免疫，并且T淋巴细胞增殖数和产生IFN-γ的细胞数和对照组相比显著提高(P<0.05)。间接ELISA试验表明，在免疫第14天抗体水平比对照组明显增高(P<0.05)。结论 成功构建了真核表达质粒pVAXⅠ-P1-2A,并通过小鼠免疫试验发现重组质粒试验组能够诱导产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答。     

大黄鱼肌肉生长抑制素基因微卫星序列多态性分析

肌肉生长抑制素(myostatin，MSTN)参与肌肉生长和脂肪发生的调节．本研究在克隆大黄鱼MSTN cDNA的基础上，对3′端非编码区微卫星序列的多态性及其与体长、体重和肌肉脂肪含量的关系进行了分析．结果表明，获得的cDNA长1 886 bp，在3′端非编码区存在微卫星序列（CA）_n．在受检的52个个体中，微卫星序列长度在64～126 bp之间.大部分个体的微卫星序列内存在碱基替换，最常见的碱基替换形式是C→T，属于非完美型微卫星序列．根据该位点微卫星序列长度，在实验群体中共检测到23个等位基因，其中频率为0.019 2的等位基因11个，0.038 5的5个, 0.076 9的3个，0.057 7的2个，0.115 4和0.134 6的各1个．该基因位点的群体杂合度为0.932 7，多态信息含量为0.928 8．微卫星序列长度与大黄鱼体长、体重和肌肉脂肪含量之间的相关系数分别为0.409、0.435和-0.026，P值分别为0.021、0.016和0.878．碱基替换对大黄鱼生长及肌肉脂肪含量均无显著影响．     

抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型（CAV-1）免疫的BALB／c小鼠脾细胞与SP2／0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫酶试验（1EA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞，命名为1B、2H3，经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a，2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8，IEA效价可达1：2560—1：5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。     

江西修水县发出通告保护蛇类资源

为保护蛇类资源,江西修水县工商局和农牧渔业局最近联合发出公告,严禁捕捉、收购、买卖菜花蛇、黑乌蛇、灰鼠蛇等,违者将处以     

应用聚类分析研究十字珊瑚亚科的分类并探讨其起源与演化

提要具分裂繁殖的十字珊瑚类在我国扬子区兰多维列统（Llandovery）分布广泛，属种繁多，有重要的地层意义．但长期以来关于该类群的分类位置及各属的定义和范围各家意见不一。文章应用Q型聚类分析研究十字珊瑚类的分类．提出十字珊瑚亚科可分为7属．即：Stauria Milne-Edwards et Haime, Cystostauria He et Li, Ceriaster Lindstrom. Eostauria He et Li. Paraceriaster Y. X. He. Parastauria He et Li. Massparaseriaster nora. provis. 对7个属分别给予简要定义。文中对十字珊瑚亚科的起源、演化及扩散进行探讨．并分析各属可能的演化亲缘关系。资料表明．最原始最早期的Eostauria属很可能起源于澳大利亚的新南威尔士晚奥陶世的Palaeophyllum的某一种群．后在早兰多维列世晚期扩散到扬子区．在中兰多维列世的爱隆期（Aeronian）迅速繁衍，产生许多新属种，因而扬子区在兰多维列世是十字珊瑚类的演化中心。除少数类群，如：Eostauria，Ceriaster．Stauria在晚兰多维列世或文洛克世（Wenlock）早期分别迁移到中亚地区和欧洲，多数类群在扬子区晚兰多维列世的早、中期因不适应环境巨变而快速衰亡。     

自制组织芯片穿刺工具及芯片手工制作技巧

组织芯片（tissue chip TC）技术是将数十个乃至上千个的组织样本，整齐有序地排列在同一张载玻片上，而形成的微缩组织切片；又称组织微阵列（tissue microarray TMA）技术。组织芯片的制作方式主要有石蜡切片法和冷冻切片法，目前以石蜡切片法为常用。现在还有商品化的组织芯片制作仪，如美国（Tissue Arrayer，Beecher Instrument，USA）生产的，但这套产品价格昂贵。所以，手工制作技术更经济、实用，其方法的改进层出不穷。我们采用一次性穿刺针手工制做穿刺工具，用普通石蜡包埋样本，制做组织芯片，收到了满意的效果，现将制做主要程序和技巧介绍如下。     

重庆市生态风险预警等级划分及演化趋势模拟

生态风险预警等级评估和演化趋势模拟，可为生态风险管理提供可靠的辅助决策。以重庆市为研究对象，基于驱动力-压力-状态-影响-响应模型，构建重庆市生态风险预警指标体系，采用正态云模型和集对分析法，定量分析重庆市生态风险时空分异特征和演化趋势。研究结果表明：（1）2013-2019年，重庆市生态风险值呈"上升-下降"的波动趋势，综合生态风险隶属于重警等级，生态风险综合值从0.295下降到0.278，生态环境逐年好转；（2）重庆市生态风险有下降、不变、先上升后降低、先降低后上升以及一直升高5种演化趋势，分别占比39%、16%、5%、21%、24%；（3）重庆市生态风险转移分为两个方向，2013-2016年生态风险空间分异性增大，中警、轻警和无警风险等级不断向东北、东南和西部四周分散转移；2016-2019年生态风险分布格局变化较小，重警风险区在东部聚集；（4）演化趋势模拟结果表明，未来重庆市生态风险降低的区县有13个，占比34%，生态环境有向好发展的趋势；生态风险上升的区县有25个，占比66%，生态环境会有所恶化，但是恶化程度较低。将生态风险等级划分与预警演化趋势相结合，能为城市生态风险管理提供科学依据。     

一种能简化精制过程降低成本的蛋白质生产新方法

美国亚利桑那州特斯康的Research Corp.Technologies(RCT)是一家从事非营利性技术转让的机构。它开发了一项从哺乳动物细胞生产蛋白质的新rDNA技术,名为“逆”分泌技术。据称,用此技术比用其它技术成本低,又省事。 RCT的这项技术利用了劳氏肉瘤病毒的逆转录病毒基因gag,它有联结哺乳动物异种蛋白并将这些蛋白包裹在泡囊内的能力。gag基因与蛋白质联结后,即引导蛋白质至寄主细胞的表面,并开始在该处“出芽(bud)”。在出芽过程中,蛋白质被包在泡囊内并被释放至生长培养基中。将蛋白质离心,蛋白质即被纯化。由于这方法只利用这种逆转录病