Aspergillus sp. EA-LJS80的分离及其发酵液提取物七叶皂苷C的生物活性

本研究从陕西留坝紫柏山采集的七叶树Aesculus chinensis根和茎中分离出一株具有高产七叶皂苷C的内生真菌,将其编号为EA-LJS80。利用ITS序列分析鉴定其种属并对其形态进行观察;采用紫外-可见分光光度计进行全波长扫描,确定其最大紫外吸收峰;采用HPLC测定七叶皂苷C的产量;采用滤纸片扩散法研究其发酵液提取物的抑菌活性;采用CCK-8法测定提纯后七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖抑制率,探究其生物活性。结果显示,该菌株EA-LJS80为曲霉菌属Aspergillus真菌,最大紫外吸收波长为230nm,测得提纯后七叶皂苷C的产量为9.23mg/mL。生物活性实验表明:菌株EA-LJS80的发酵液提取物对大肠杆菌Escherichia coli等4种致病菌有明显的抑菌效果;经CCK-8法测定,提纯后的七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖有明显的抑制作用。综上所述,菌株EA-LJS80具有产七叶皂苷活性,尤其是七叶皂苷C的产量较高,且其产生的七叶皂苷具有较高的生物活性,这对于改进七叶皂苷生产模式,提高生产效率具有重要意义,同时对于七叶皂苷C的进一步研究有一定的促进作用。     

口服降糖药应用分析

目的:了解赤峰市阿鲁科尔沁旗医院近3年来口服降糖药的临床应用现状,分析其用药合理状况并为临床用药提供参考。方法:统计医院药品信息管理系统中2007～2009年所有口服降糖药的出库数据,计算销售金额、年用药频度(DDDs)、日均费用(DDC)及序号比值。结果:医院口服降糖药的DDDs逐年增长,购药金额略有增长,DDDs综合排名前5位的是二甲双胍、阿卡波糖、瑞格列奈、吡格列酮、格列喹酮;购药金额始终排名第1位的是阿卡波糖。结论:该院口服降糖药应用基本合理,新药用量呈上升趋势,老药仍占据相当地位。     

授粉对黄瓜果实发育和品质的影响

以“滓绿3号”黄瓜为试材．研究了授粉对黄瓜果实发育、营养成分变化及采后果形变化的影响。结果表明,授粉可减少化瓜、刺激果实发育、提高果实商品性,并提高产节,其坐瓜率、商品瓜率、单瓜重及产节分别较单性结实提高63．0％、68．7％、22．6％和127．6％。授粉瓜和单性结实瓜均表现为随着果实发育．可溶性蛋白质和维生素C含量呈减少的趋势,可溶性糖含量呈逐渐增长的趋势,游离氨荩酸含量呈波动变化,但授粉瓜的4种营养成分均高于单性结实瓜。在采后1～5d,授粉瓜头部易膨大形成大头瓜．而单性结实瓜果形变化不大。     

土壤假单胞菌亚磷酸盐脱氢酶的基因克隆和原核表达及其酶活分析

亚磷酸盐脱氢酶(PTDH)以NAD+为辅助因子催化亚磷酸盐氧化生成正磷酸盐和NADH,在辅酶再生和基于亚磷酸盐的磷利用等方面有着潜在重大的应用价值。以土壤宏基因组DNA为模板,采用两轮PCR扩增得到全长亚磷酸盐脱氢酶基因PsPtx。通过酶切将它克隆到质粒pET32a(+)中,构建了原核表达载体pET(PsPtx)。序列分析表明,PsPtx基因的完整编码区大小为1 011 bp,其推导蛋白由336个氨基酸组成,理论分子量大小为36.5 kD。保守结构域预测分析表明PsPtx编码蛋白属于亚磷酸盐脱氢酶,含有保守的NAD+结合基序和催化功能残基。系统进化树分析显示PsPtx基因来源于一无法确定种名的土壤假单胞菌。另外,PsPtx基因经IPTG诱导能在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,重组PsPtx蛋白用组氨酸标签亲合层析纯化,其以亚磷酸钠盐为底物的酶比活性为3.75 U/mg。该PsPtx功能基因的获得为其后续应用研究打下了必要的基础。     

受体品种、体重及移植季节对杜泊羊胚胎妊娠率和新生羔羊体重的影响

胚胎移植可以提高家畜良种扩大的速度,但移植成功率会受到很多因素的影响。用6.5～7.5日龄杜泊羊冷冻胚胎作为移植胚胎,研究了季节和受体状况对杜泊羊胚胎移植妊娠率以及出生羔羊生长发育的影响。在比较春秋两季236枚冷冻胚胎的移植效果发现秋季移植的妊娠率(68.6%)显著高于春季(58.5%);春季和秋季移植后出生羔羊的体重,初生时无显著差异;但在30日和60日(断乳)时,春季移植的羔羊显著高于秋季。比较不同品种的受体发现,昭通绵羊受体的胚胎移植妊娠率最高,湖羊次之,小尾寒羊最低,但受体羊3种品种间无显著差异;较大受体羊(≥40kg)生产的羔羊出生和30d的体重显著高于较小受体(<40kg);但60d羔羊体重差异不显著,说明受体体重会影响羔羊的出生体重,但是对哺乳期的生长发育影响不大。春季移植出生的羔羊,其早期生长发育情况明显优于秋季。     

授粉对黄瓜果实发育和品质的影响

以 津绿 3号 黄瓜为试材 ,研究了授粉对黄瓜果实发育、营养成分变化及采后果形变化的影响 .结果表明 ,授粉可减少化瓜、刺激果实发育、提高果实商品性 ,并提高产量 ,其坐瓜率、商品瓜率、单瓜重及产量分别较单性结实提高 6 3.0 %、6 8.7%、2 2 .6 %和 12 7.6 % .授粉瓜和单性结实瓜均表现为随着果实发育 ,可溶性蛋白质和维生素 C含量呈减少的趋势 ,可溶性糖含量呈逐渐增长的趋势 ,游离氨基酸含量呈波动变化 ,但授粉瓜的 4种营养成分均高于单性结实瓜 .在采后 1～ 5 d,授粉瓜头部易膨大形成大头瓜 ,而单性结实瓜果形变化不大     

蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的异源表达和功能分析北大核心CSCD

旨在体内证明蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白（OCP）具备不依赖类胡萝卜素的单线态氧（~1O_2）清除功能。通过PCR扩增蓝藻OCP基因,对其进行原核诱导表达,并通过细菌点板和生长曲线测定法检验它在大肠杆菌中的抗~1O_2活性。结果表明,直接从蓝藻水体提取的宏基因组中成功扩增得到OCP基因SyOCP,其编码区大小为954 bp。生物信息学分析表明,SyOCP来源于主要蓝藻种类——集胞藻（Synechocystis sp.PCC 6803）。经IPTG诱导,SyOCP基因在大肠杆菌中获得了高水平的可溶性表达。另外,异源表达SyOCP的重组大肠杆菌对常见的~1O_2光敏诱发剂染料——亚甲基蓝的耐受性得到了显著增强。蓝藻OCP（不结合类胡萝卜素）内在的抗~1O_2功能在大肠杆菌中得到了体内验证。     

植物活性氧的产生及其作用和危害

活性氧(ROS)是一类由O2转化而来的自由基或具有高反应活性的离子或分子。植物消耗的O2约有1%在叶绿体、线粒体、过氧化物酶体等多种亚细胞单位中被转化成了ROS。ROS有益或有害取决于它在植物体内的浓度。低浓度的ROS作为第二信使能在植物细胞信号转导途径中介导多种应答反应,高浓度的ROS则引起生物大分子的氧化损伤甚至细胞死亡。植物体内ROS产生和清除之间的平衡十分重要,并由一套有效的酶促和非酶促抗氧化系统来监控。该文主要系统介绍了植物ROS的种类、产生部位、在信号转导中的作用及其对植物细胞造成的主要伤害等方面的研究进展,为利用基因工程手段来提高植物对环境胁迫的抗性提供信息和思路。