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在DNA体外重组技术的研究和应用中,转
化是个很重要的步骤。自Cohen等人[2]在1972
年首次用CaCl:处理的方法成功地进行了R因
子对E. colt C600的转化之后,这个方法一直
广泛地应用于大肠杆菌各受体菌系的转化。鼠
伤寒沙门氏杆菌S. typhimurium[3]和金黄色葡
萄球菌S. aureus[4],的转化也都沿用此法。直
至1978年,Michael等[5]在用pBR 322质粒
DNA对E. colt X1776的转化中却采用了与
此不同的方法。 相似文献
3.
纯净的、具有生物学活性的共价闭合环状DNA是DNA体外重组技术的一个重要基础。 本文报道的是我们实验室经常使用的抽提质粒pBR 322 DNA的方法。在Zasloff等酸酚法的基础上省略了蛋白酶K和RNA酶,代之 相似文献
4.
本文阐述了以缺口翻译制备的pIge DNA为探针(4.4×10~6cpm/μg DNA),用吸印法从小鼠胎儿基因文库中筛选分离出免疫球蛋白重链C_ε基因克隆。同时,从扩大培养的噬菌体中提取出DNA,并用EcoRI酶消化,0.7%琼脂糖凝胶平板电泳分离,分离的DNA片段转移至硝酸纤维素滤膜上,以pIgs DNA探针杂交,进而确证有两条阳性带,为免疫球蛋白重链C_s基因。电泳法测定其大小分别约为3.5 kb和3.0 kb。也显示出在小鼠胎儿中的未分化型免疫球蛋白重链C_g基因内有一个限制性内切酶Eco RI位点。 相似文献
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