应用TaqMan定量方法研究巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA表达

目的巴马香猪是我国具有特色和优势的实验用小型猪资源品系,用于药物评价具有广阔前景。方法 以β-actin作校正,利用TaqMan定量技术对巴马香猪肝、肾、肾上腺、小肠、皮肤、脑、肺、睾丸、前列腺、子宫和卵巢等组织中CYP1A1、2A19和2E1 mRNA的表达水平进行检测,检测结果与报道的人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1进行比较。结果巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均以肝脏中最高,肝外组织明显较低,并且巴马香猪肝脏CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均低于报道的人肝对应酶。结论巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1与人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1的mRNA组织表达存在一定差异,提示在其作为相应CYP亚型代谢的药物评价时应考虑这种种属差异对实验结果推广到人的影响。     

实时荧光定量检测中国实验用小型猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平

CYP3A29是猪肝脏最重要的药物代谢关键酶。研究中国实验用小型猪肝脏CYP3A29 mRNA的表达特性对于评估其是否适宜于作为人CYP3A4介导的药理学研究动物模型具有一定意义。以b-actin作校正, 利用TaqMan定量技术对巴马香猪、贵州小型香猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平进行检测, 并以荣昌猪作为对照。结果表明, 巴马香猪、贵州小型香猪、荣昌猪肝脏CYP3A29 mRNA表达水平与报道的人肝脏CYP3A4相近; 三品系(种)猪间肝脏CYP3A29 mRNA表达水平较为接近, 但品系(种)内个体间变异较大。提示巴马香猪、贵州小型香猪作为药物评价的实验动物具有一定可行性。     

乌羊和小香羊的RAPD分析

用40条多态引物对乌羊、小香羊、南江黄羊、黑山羊、川东白山羊、波尔山羊和马头山羊7个品种（或群体）进行RAPD分析,其中28条引物扩增出多态性普带,并用于进一步对12只乌羊个体和12只小香羊个体基因组进行扩增。扩增产物以1．5％琼脂糖凝胶（含0．5μg/ml溴化乙锭）电泳分离。Nei氏计算品种间的遗传距离指数和品种内的遗传相似指数。NJ法构建系统聚类图。结果表明：乌羊和川东白山羊间的遗传距离最小,亲缘关系较近,而小香羊与品种间的遗传距离都较大,亲缘关系较远。乌羊群体及小香羊品种都具有一定的遗传稳定性。     

乌羊和小香羊的RAPD分析

用40条多态引物对乌羊、小香羊、南江黄羊、黑山羊、川东白山羊、波尔山羊和马头山羊7个品种(或群体)进行RAPD分析,其中28条引物扩增出多态性谱带,并用于进一步对12只乌羊个体和12只小香羊个体基因组进行扩增.扩增产物以1.5%琼脂糖凝胶(含0.5μg/ml溴化乙锭)电泳分离.Nei氏公式计算品种间的遗传距离指数和品种内的遗传相似指数,NJ法构建系统聚类图.结果表明:乌羊和川东白山羊间的遗传距离最小,亲缘关系较近,而小香羊与各品种间的遗传距离都较大,亲缘关系较远.乌羊群体及小香羊品种都具有一定的遗传稳定性。 Abstract:A total of 40 primers generated polymorphic loci were used in random amplified polymorphism DNA(RAPD)analysis in seven goat breeds(or populations)including Wu goat,Small-Xiang goat,Nanjiang Brown goat,Black goat,Chuandong white goat,Boer goat,Matou goat.28 of them were selected for further amplification in individuals of 12 Wu goats and 12 Small-Xiang goats because of their different amplified patterns among seven goat breeds.Amplification products were separated by 1.5% agarose gel(contain 0.5μg/ml ethidium bromide)electrophoresis.Genetic distance indexes among breeds and genetic similarity indexes within breed were calculated by Nei,and the phylogenetic tree was constructed by NJ method.The results indicate that the genetic distance index between Wu goat population and Chuandong white goat breed is smallest,therefore Wu goat population is closely related to Chuandong white goat breed.While the genetic distance indexes between Small-Xiang goat breed and any other goat breeds are all big,so Small-Xiang goat breed is far related to any other goat breeds.The results also indicate that the genetic stability either among the Wu goat population or the Small-Xiang goat breed reaches some extent.     

江西地区畲族人群pcsk9基因变异的SNaPshot分析

目的 研究江西地区畲族人群pcsk9基因SNP位点的变异,为开展冠心病风险研究提供可借鉴的资料.方法 通过SNaPshot法对84例畲族人外周血DNA pcsk9基因外显子7个SNP位点进行分型,ABI 3730XL扫描分型结果.结果 7个SNP位点中,仅rs505151A/G位点检测到基因变异,其G基因的频率为0.036.结论 江西地区畲族人群pcsk9基因7个SNP位点的基因型频率和等位基因频率与国内外其他民族间均存在一定差异,提示畲族人群可能具有独特的冠心病风险标记位点及变异特征.本研究为开展畲族人群pcsk9基因的冠心病风险关联性研究提供了参考依据.     

地塞米松对从江香猪细胞色素氧化酶P450 3A29 mRNA表达的影响

从江香猪是全国稀有的微型猪种,其细胞色素氧化酶P450基因纯合度较高,遗传稳定,具备开发药物代谢动物模型的良好基础。本研究旨在应用实时荧光定量方法研究从江香猪细胞色素氧化酶P450 3A29 mRNA的组织分布及地塞米松对其表达的影响,并比较与人细胞色素氧化酶P450 3A4的相似性。结果表明,从江香猪细胞色素氧化酶P450 3A29 m RNA的组织分布特征及地塞米松对其诱导作用总体上与人体相似,从江香猪可用于人细胞色素氧化酶P450 3A4的诱导研究。