用彗星实验技术分析MTX对小鼠细胞DNA的损伤作用

MTX是一种抗叶酸药物 ,作用于增殖细胞 ,为了解其作用机制和探测其遗传毒性靶器官 ,以小鼠为研究对象 ,用彗星实验技术检测了MTX腹腔注射染毒后对脾、骨髓、胸腺、和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及其与MTX剂量间的相关。 1.2 5～ 5mg/kgMTX可诱发小鼠体内 4种细胞的DNA单链断裂 ,核DNA损伤程度与用药剂量呈正相关。不同种类细胞对MTX的易感性不同 ,脾、骨髓、胸腺、外周血淋巴细胞可能是MTX的遗传毒性靶细胞。外周血淋巴细胞在SCGE分析中的拖尾现象可作为用药后组织器官对药物敏感性反映的生物标志     

GTW对小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响

研究了雷公藤多甙(GTW)的抗生育剂量、中间剂量和治疗剂量对昆明种小鼠骨髓细胞微核和精子畸形的影响,并对用药后其体重变化和睾丸/体重的比例进行比较。骨髓微核试验和睾丸/体重比变化分析均显示中间剂量组和治疗剂量组有不同程度的遗传毒性,且存在剂量-效应关系,但小于阳性对照;精子畸形率呈下降趋势,生育力的可复性可能也是下降的;体重变化可见中间剂量组存在较高的代偿能力。     

丙烯酰胺对雄性小鼠生殖细胞遗传损伤的研究

以雄性小鼠的生殖细胞为研究对象,经腹腔注射丙烯酰胺建立动物模型,采用生殖细胞早期精细胞微核和初级精母细胞染色体制作技术联合评价丙烯酰胺对雄性小鼠的生殖毒性及遗传毒性,观察染毒后精子发育的不同阶段对丙烯酰胺的损伤反应,为丙烯酰胺的生殖损伤提供一定依据。     

GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究

目的:构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株,检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达,为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法:构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A,人胚肾293T细胞包被病毒并感染Lncap C4-2细胞株,Puromycin筛选获得稳定过表达GPRC6A的细胞株。RT-PCR和Western blot验证细胞GPRC6A的过表达情况。划痕和transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测EMT相关基因表达。结果:成功构建GPRC6A表达的慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测LncapC4-2 GPRC6A过表达细胞株中GPRC6A的mRNA和蛋白质表达增高,与对照相比较,在过表达GPRC6A的LncapC4-2细胞中,细胞迁移和侵袭能力增强,并且EMT相关基因E-cadherin表达降低而SNAIL表达增高。结论:成功构建过表达的GPRC6A的前列腺癌细胞株,肿瘤细胞中的GPRC6A可能通过增强细胞迁移和侵袭能力并促进细胞EMT而参与前列腺癌发生发展过程。