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耐盐药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)愈伤组织筛选及生理生化特性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得耐1.5% NaCl的药蒲公英(Taraxacum officinale Weber)愈伤组织, 以药蒲公英叶片外植体为材料诱导愈伤组织。以NaCl为选择因子, 从愈伤组织直接筛选。在选择培养基上, 大部分愈伤组织褐化死亡, 个别褐化死亡的愈伤组织周围有少量新的细胞团长出, 将其转接到新鲜的选择培养基上, 每3周继代一次, 经3个月继代筛选获得了耐1.5% NaCl的药蒲公英细胞团。以普通愈伤组织为对照, 发现随着NaCl浓度升高, 耐盐愈伤组织的相对生长率下降但显著高于对照; 且随着盐胁迫处理时间延长持续升高, 而普通愈伤组织对照几乎停止生长, 说明耐盐愈伤组织具有相对稳定的耐盐性。在蛋白水平上, 耐盐愈伤组织与对照愈伤组织差异明显, SDS-PAGE分析显示: 耐盐愈伤组织比对照多出一条34 kD大小的蛋白带, 且30 kD、18 kD左右的蛋白带明显上调。相同处理条件下耐盐愈伤组织脯氨酸的增加幅度高于对照。盐胁迫条件下, 耐盐愈伤组织的超氧化物歧化酶(Super oxidase dimutase, SOD)、过氧化物酶(Peroxidase, POD)和过氧化氢酶(Catalase, CAT)活性明显高于对照,且随着处理时间的延长和盐浓度的增加呈现升高的趋势, 而对照则呈现先升高后下降的趋势。结果说明耐盐愈伤组织一方面通过小分子有机溶质如脯氨酸的方式调节其渗透平衡, 另一方面还可通过提高抗氧化能力降低盐分造成的次级伤害。积累蛋白也可能是耐盐愈伤组织调节渗透平衡的一种方式。通过生理生化分析确定我们获得的耐盐愈伤组织为耐盐变异体。 相似文献
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为提高药蒲公英的耐盐性, 用20~30 d大小的药蒲公英叶片诱导愈伤, 获得的愈伤以NaCl作为选择因子, 用直接筛选的方法, 每3周进行一次继代培养, 经3个月继代筛选获得了耐1.5% NaCl的药蒲公英愈伤组织, 将耐1.5% NaCl的药蒲公英愈伤组织接种在分化培养基上分化出芽, 之后将再生芽转接到生根培养基中进行生根培养, 经4个月得到了12株耐1.5% NaCl的药蒲公英再生植株。与野生型相比, 耐盐植株叶片宽大、叶柄粗短、叶表面覆盖白色细毛, 根粗壮较短, 花茎中部具2 cm左右的苞叶。RAPD(Random amplified polymorphic DNA , 随机扩增的多态性DNA)和SDS-PAGE检测表明, 耐盐植株与对照植株在DNA及蛋白水平上均存在明显差异。1.5% NaCl处理后, 与普通再生植株相比, 耐盐株系的抗氧化酶活性明显提高, 脯氨酸含量上升幅度更为显著, 而丙二醛(MDA)含量降低, 其主要药用成分黄酮的含量显著增加。这些结果说明耐盐植株的抗氧化防御能力明显增强。以上结果表明耐1.5% NaCl的药蒲公英再生植株为耐1.5% NaCl药蒲公英变异体, 这些耐盐变异体有望成为抗盐耐海水蔬菜家族的新成员。同时, 这些耐盐变异体植株比普通植株具有更高的医用商业价值。耐1.5% NaCl的药蒲公英再生变异体遗传稳定性的研究正在进行中。 相似文献
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在对经过选择的,具有特定抗性的细胞系的体外研究中,产生了意外且具有潜在价值的发现。美国 Georgia 大学海岸平地试验站的 D.Isenhour 发现在体外对高梁进行抗盐性的选择能够产生抗虫害的高粱品系。Isenhour 鉴定出在从抗盐愈伤组织再生的高粱植物品系中,有一株对秋粘虫有抵抗力,另有2株表现出对高梁瘿蚊的抗性(IPBN TCCP Newsl.No.8,P.3,1988)。该细胞系共经过11次继代,其中有4或5代是培养在 NaCl 浓度为9克 相似文献
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世界上第一个预防引起羊麻疹的绦虫寄生物的重组疫苗已由澳大利亚墨尔本大学的研究人员协同新西兰 Coopers 动物保健有限公司及新西兰农业渔业部的科学家们一起研制成功。在新西兰,已用该疫苗成功地对绵羊进行了试验。打算在2年之内使疫苗实现商品化的Coopers 有限公司,希望这种疫苗的使用将大大降低因绦虫感染而造成的肉类工业方面(尤其在新西兰)的巨大损失。来自位于 Werribbe 的墨尔本大学临床兽医站的研究小组通过遗传工程方法使这种寄生 相似文献
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鬣蜥已被科学家们定为“微型家畜”而成为新开发的食品目录中的一员。尽管鬣蜥在拉丁美洲早已被捕获用做食物,但是直到最近它才作为一种肉类来源而被有计划地进行饲养。“微型家畜”指的是尺寸小,家养的,如同鬣蜥一类的奇异动物。Encyclopedia Brittanica(大英百科金书)的作家 Noel Vietmeyer 写道,“微型家畜可能看上去奇异,色彩丰富并且在某种程度上说,有些令人恶心,但在将来它们会成为第三世界国家的重要资源。” 相似文献
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一种适用于质谱分析的简化胶内酶解方法 总被引:1,自引:0,他引:1
在常规方法的基础上,设计了一种适于质谱分析的简化胶内酶解方法。改进的步骤包括:(1)通过加大洗涤所用超纯水量、延长涡混时间来强化凝胶洗涤的环节;(2)加入酸化处理来提高胰蛋白酶的活性;(3)在预酶解时不加CaCl_2,减少了酶的自切作用;(4)省略了蛋白质样品脱盐、脱SDS的步骤;(5)直接吸取酶解液进行质谱分析。系统比较该简化酶解法和最新报道的一种酶解方法的质谱鉴定效果,简化法能有效减少酶解后肽段的损失,增加质谱数据库搜索的信息量,得到更可靠的蛋白质鉴定结果。 相似文献
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据报道,在离体情况下,某些非病原体的有机体对组培物的生长和发育有抑制作用,而病原生物体或许不一定总是有害的。《农业细胞报道》杂志已提出建议。把病原体这个名词用于描述导致活体植物发病的生物体,而用“体外病原”(Vitropath)来称呼那些对完整生活植株不一定产生危害,却对培养的植物细胞,组织或器官有害的生物体。(AgricellReport 9∶33,38,1987)。在《农业细胞报道》杂志最近收到的,但注明日期为1986的一篇论文中,印度研究人员R.R.Bhansali 和 K.Singh 描述了一种非体外病原的植物病原体(INDIAN PHYTOP- 相似文献
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低能N+辐照拟南芥诱导基因组DNA碱基变异分析 总被引:6,自引:0,他引:6
用低能N~+离子束注入拟南芥后获得的稳定突变体T80Ⅱ作为实验材料,对突变体植株进行了RAPD标记,并将T80Ⅱ和对照部分RAPD特异条带进行克隆测序和DNA序列分析。结果显示,在可分辨的总计397个RAPD条带中,T80Ⅱ株系中有52个条带表现出差异,包括条带的缺失和增加,条带变异率为13.1%;克隆的T80Ⅱ序列中,平均每16.8个碱基出现1个碱基变异位点,表现出较高频率的碱基突变。碱基突变类型包括碱基的颠换、转换、缺失、插入等。在检测到的275个碱基突变中,主要是单碱基置换(97.09%),碱基缺失或者插入的比例较小(2.91%)。在碱基置换中,转换的频率(66.55%)高于颠换的频率(30.55%)。此外,构成DNA的4种碱基均可以被离子束辐照诱发变异,而且每一种碱基都可以被其他3种碱基所替换,但是胸腺嘧啶(T)的辐射敏感性要高于其他3种碱基。通过分析突变碱基周边序列,对低能N~+离子注入拟南芥突变体引发的碱基突变热点进行了讨论。 相似文献