镉暴露诱导黄颡鱼鳃的组织学损伤、氧化应激和免疫反应

为研究水体镉(Cd)暴露对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)鳃的组织学结构、抗氧化状态及免疫相关基因表达的影响, 将黄颡鱼分别暴露于0(对照组)、50和200 μg/L Cd水体中8周后, 取鳃进行分析。结果显示: 鳃中Cd含量随着水体Cd浓度的升高而上升; 组织学分析发现, Cd暴露组鳃出现了动脉瘤、细胞增生、鳃小片弯曲以及细胞脱落等病理变化。同时, Cd暴露导致鳃中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和抗羟自由基(AHR)的活性及过氧化氢(H₂O₂)的含量升高, 而过氧化氢酶(CAT)的活性及还原型谷胱甘肽(GSH)的含量下降, 但超氧化物歧化酶(SOD)的活性无显著变化。此外, Cd暴露上调了肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、主要组织相容性复合体(mhc)、白细胞介素-10(il-10)、转化生长因子-β(tgf-β)和补体因子C3(c3)的表达, 而下调了白细胞介素-1β(il-1β)、白细胞介素-8(il-8)及溶菌酶(lys)的转录水平。研究表明, Cd暴露导致黄颡鱼鳃中Cd富集, 进而诱导鳃的组织学损伤、氧化应激和免疫反应。     

己烯雌酚抑制斑马鱼精子发生及其可能的分子机制

为研究内分泌干扰物己烯雌酚(DES)对鱼类精巢发育和配子发生的影响,研究用DES(0.1、1和10μg/L,暴露20d)对内分泌干扰研究的经典模式动物——斑马鱼(Danio rerio)雄性成鱼进行了处理。组织学研究结果表明,DES严重影响斑马鱼精子发生。同时,研究克隆了斑马鱼与生殖细胞发育和减数分裂相关的vasa、dmc1的部分c DNA,对其组织和细胞表达模式进行了研究。结果表明,vasa仅表达于精巢的精原细胞、初级精母细胞和卵巢不同时期的生殖细胞;而dmc1则表达于精巢精母细胞和卵巢卵母细胞发育早期。半定量PCR结果表明,DES处理后vasa的表达没有明显变化;而dmc1的表达则被明显抑制,且呈时间依赖性和剂量依赖性效应;而转录因子dmrt1和雄激素合成关键酶基因P450 11β的表达也被显著抑制。因此本研究推测,DES可能通过抑制dmrt1和P450 11β的表达诱导了斑马鱼生殖细胞凋亡;并通过抑制dmc1的表达阻碍了减数分裂。     

胭脂鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）cDNA的分子克隆、序列分析及组织表达

参考多种生物的胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因序列,设计并合成引物。用胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)肝总RNA逆转录得到cDNA并扩增获得特异性片段,回收纯化后亚克隆到pMD-18T载体上。测序后经序列比对分析表明,所得到的序列是胭脂鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA片段,共489bp,包括该基因完整的开放阅读框(ORF)486bp,编码162个氨基酸。氨基酸序列与其他鲤形目鱼类具有较高的同源性,对胭脂鱼IGF-Ⅰ在一些组织中的表达研究发现,IGF-Ⅰ在肝中表达最多,其次是胰、性腺,在脑、垂体、鳃、心、脾中也有不同程度的表达,而在肠、肾、肌肉中的表达不十分明显。     

鸡含锰超氧化物歧化酶cDNA克隆及序列分析

 为弄清鸡含锰超氧化物歧化酶 (manganese containingsuperoxidedismutase ,MnSOD)的cDNA序列 ,以开展动物锰营养学的深入研究 ,根据已知鸡MnSOD的N端氨基酸序列设计简并引物 ,应用 3′RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术 ,扩增克隆了鸡心肌MnSOD 990bp的 3′cDNA片段 .再根据 3′RACE片段测序结果设计引物进行 5′RACE ,结果获取了一个与 3′RACE片段相互重叠的鸡心肌MnSOD 52 1bp的 5′RACE片段 ,并对其进行了克隆测序 .最后根据 3′RACE片段和 5′RACE片段序列信息进行拼接 ,从而获取鸡MnSODcDNA的全序列信息 .研究结果表明 :鸡MnSODcDNA全长为 110 8个核苷酸 ,其中 5′非翻译区 2 5个核苷酸 ,编码区 675个核苷酸 ,3′非翻译区 4 0 8个核苷酸 ,编码一个长 2 2 4个氨基酸残基的蛋白质前体 .其中信号肽长 2 6个氨基酸残基 ,成熟肽长 198个氨基酸残基 ,分子量为 2 2kD .与人、大鼠、线虫、果蝇等真核生物MnSOD氨基酸序列的同源性分别为82 4 %、84 .7%、62 .4 %、59.3% .     

胭脂鱼胰蛋白酶cDNA克隆以及不同蛋白含量日粮和饥饿对mRNA表达和酶活力的影响

为检测不同蛋白含量的日粮和饥饿对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)幼鱼胰蛋白酶活性和mRNA表达的影响,首先用RACE和PCR的方法从胭脂鱼幼鱼的肝胰脏组织中克隆得到胰蛋白酶cDNA全长,然后用半定量RT-PCR和酶活性检测方法分别检测了经不同蛋白含量日粮(酪蛋白含量分别为35％、45％和55％)投喂和饥饿处理后的胭脂鱼幼鱼的胰蛋白酶mRNA表达水平和胰蛋白酶活力的变化.结果显示,胭脂鱼胰蛋白酶cDNA全长为912 bp.投喂蛋白质含量适中(45％酪蛋白)日粮组的试验鱼胰蛋白酶活性和mRNA水平高于投喂高蛋白水平日粮组(55％酪蛋白)和低蛋白水平日粮组(35％酪蛋白);饥饿明显降低mRNA水平和胰蛋白酶活性;胰蛋白酶活性的变化滞后于mRNA水平的变化.胰蛋白酶活力的变化与mRNA水平的变化之间未呈现直接相关性.因此,胭脂鱼胰蛋白酶合成可能是一个由多种因素共同调控的复杂过程.     

鱼类斯氏小体研究概述

鱼类斯氏小体研究概述李英文，林信伟（中山大学生物系鱼类研究室广州５１０２７５）关键词斯氏小体，内分泌腺体，低钙素斯氏小体是（ＴｈｅＣｏｒｐｕｓｃｌｅｓｏｆＳｔａｍｌｌｕｓ）硬骨鱼类才具有的内分泌腺体，１８３９年由斯坦尼斯（Ｓｔａｎｎｉｕｓ）发现曾一度...     

用于鱼类脑垂体内分泌研究的离体灌流培育系统

本实验建立了研究鲤鱼脑垂体碎片促性腺激素（ＧｔＨ）和生长激素（ＧＨ）分泌反应的离体灌流系统。性腺退化鲤鱼的脑垂体碎片可产生稳定和可测的ＧｔＨ和ＧＨ基础分泌;引入２ｍｉｎ脉冲式鲑鱼促性腺激素释放激素类似物（ｓＧｎＲＨＡ）可产生敏感的、恢复迅速和可再现的ＧｔＨ和ＧＨ分泌峰。该系统为鱼类脑垂体激素（ＧｔＨ和ＧＨ）分泌动力学和分泌调节机理的离体研究提供了可靠的手段。     

黄鳝cGnRH-Ⅱ的cDNA克隆与序列分析

促性腺激素释放激素（Conadotropin-releasing hormone,GnRH）是一个保守的十肽神经家族激素,在脊椎动物的性腺发育和繁殖功能的维持方面起着重要的调控作用。本文通过运用RACE和RT-PCR方法,从黄鳝脑组织中克隆得到cGnRH-ⅡcDNA全序列,其核苷酸序列长度为617bp。该cDNA编码的cGnRH-Ⅱ的前体氨基酸序列结构组成与其他物种的cGnRH-Ⅱ前体结构一致,其推导的蛋白前体长度为83个氨基酸,包括一个信号肽、cGnRH-Ⅱ十肽和一个由蛋白水解位点（Gly—Lys—Arg）连接的GnRH联接肽,其中信号肽和联接肽的长度分别为21和49个氨基酸。cGnRH-Ⅱ的氨基酸序列和其他相关物种cGnRH-Ⅱ氨基酸序列比较结果显示,cGnRH-Ⅱ cDNA的蛋白编码区高度保守,而非编码区的保守性程度很低。     

基于eDNA技术的长江上游珍稀特有鱼类国家级自然保护区重庆段鱼类多样性研究

利用环境DNA宏条形码(environmental DNA metabarcoding;eDNA metabarcoding)检测长江上游珍稀特有鱼类国家级自然保护区重庆段鱼类多样性,探索适用于长江鱼类多样性监测和保护的新方法,为后期长江"十年禁渔"效果评估提供一定的基础资料.研究于2021年3月在保护区重庆段共设置6...     

黄颡鱼20β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ和Ⅱ基因特征分析和表达模式研究

为探讨20β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ和Ⅱ(20β-HSDⅠ/Ⅱ)在黄颡鱼中的基因特征和表达模式, 研究从黄颡鱼中克隆了这2个基因的全长cDNA。对鱼类2个20β-HSD的系统进化分析和共线性分析结果发现, 20β-hsd基因的复制可能不是TSGD的结果。序列对比结果表明, 鱼类2个20β-HSD可能具有相似的空间结构, 结合相似的辅酶和底物, 但催化产物可能有差异。黄颡鱼2个20β-hsd基因均表达于多个组织, 其中20β-hsdⅠ主要表达于精巢、卵巢、头肾和肾脏中, 而20β-hsdⅡ则高表达于精巢、卵巢、心脏、头肾、肾脏、肠、垂体和肝脏。季节表达模式的研究发现, 在繁殖季节(5月)的黄颡鱼精巢中, 20β-hsdⅠ的表达相对较低, 而20β-hsdⅡ高表达。对黄颡鱼雄性成鱼注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)(1000 IU/kg体重)后, 20β-hsd Ⅰ的表达先显著升高, 随后迅速显著下调; 而20β-hsdⅡ的表达则持续显著上升。上述结果表明, 黄颡鱼20β-hsdⅠ和20β-hsdⅡ在hCG处理下表达模式存在较大差异。