基于COⅠ基因的二化螟种群遗传多样性检测方法

【目的】建立二化螟Chilo suppressalis(Walker)遗传多样性检测与分析方法,以研究转基因水稻是否会对二化螟(靶标昆虫)种群遗传多样性产生显著影响。【方法】从江西、湖南两地采集的二化螟样本中,各随机挑选12只,提取基因组DNA,克隆COⅠ基因的35~692 bp区段(658 bp)进行测序;同时,采用PCR-DGGE技术分析江西3个样本的COⅠ基因遗传多样性,以获取样本群体遗传多样性信息。【结果】对158个COⅠ基因克隆测序结果分析发现,在658 bp的区段中,共有173个位点存在多态,江西二化螟种群的单倍型多样度(h)为0.820,而湖南二化螟种群的单倍型多样度(h)仅为0.542,江西二化螟COⅠ基因多态要比湖南样本丰富。对COⅠ基因1 278~1 493 bp区段(266 bp)进行DGGE分析,共获得5条清晰条带,将分析的3只二化螟样本分成两类,该结果与基因测序结果一致。【结论】测序方法可以获得丰富、详细的二化螟目标基因多态信息,但工作量、实验周期及成本较高;DGGE方法虽然信息量较小,但有通量大、实验周期短、成本低等优点,因此该方法适用于二化螟等昆虫大样本种群遗传多样性研究。本研究建立的方法可以为判断转基因水稻是否会对靶标、非靶标昆虫的遗传多样性产生影响提供可靠的分子依据。     

组蛋白修饰在染色质复制过程中的作用

真核生物中的DNA复制,不但要保证DNA编码的基因组信息高保真复制,也要保证染色质结构所蕴含的表观遗传组稳定传递,这个过程对于维持基因组的完整性和稳定性至关重要。时至今日,人们对DNA复制的机制已经有了深入的认识,但是对染色质复制以及表观遗传信息传递的了解才刚刚开始。组蛋白是染色质结构中最主要的蛋白组成部分,其上面丰富的转录后修饰是表观遗传调控的核心方式之一。从最近几年组蛋白的修饰研究进展入手,主要综述在DNA复制过程中组蛋白修饰如何参与染色质复制的调控。     

内蒙古地区传统制作奶豆腐和乌日莫中乳酸菌多样性及分布特征

【背景】传统制作奶豆腐和酸性奶油(乌日莫)是内蒙古农牧地区最喜爱的食品,蕴含着十分丰富的乳酸菌资源,亟待开发利用。【目的】通过解析内蒙古农牧地区传统自制奶豆腐和乌日莫样品中乳酸菌多样性及分布特征,为优良菌株选育与利用提供资源和理论基础。【方法】采用稀释涂布法分离纯化乳酸菌,测定菌株16S rRNA基因序列鉴定种属关系,阐明乳酸菌系统发育、遗传分化及菌群结构。【结果】传统自制样品中共分离得到乳酸菌81株,主要归属于乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、食二酸乳杆菌(Lactobacillus diolivorans)、奥塔基乳杆菌(Lactobacillus otakiensis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefir)、乳酸乳球菌(Lactoc...     

新基因克隆技术进展

新基因克隆是当今生物学最热点的领域之一。本文从技术原理、适应性及使用例证等方面,综述和评价了已有的及发展中的新基因克隆技术,包括克隆已有多肽分子的基因、同源家族基因克隆、功能性筛选、差异及减数筛选等,并着重介绍了ＲＤＡ、ＥＤＳ、ＲＬＣＳ等差异筛选技术。     

五种西北旱区植物对干旱胁迫的生理响应

以黑果枸杞、金露梅、蒙古莸、柠条和花棒5种西北旱区植物为材料,采用盆栽试验研究了干旱胁迫对植物叶片光合、水分和生理生化的影响.结果表明: 随干旱胁迫时间的延长,5种植物叶片的保水力均升高,叶片相对含水量先升后降,叶绿素含量和叶绿素荧光参数均不同程度地降低,花棒和黑果枸杞的光合系统受到的影响最小,金露梅的光合系统受损最严重.干旱胁迫后金露梅叶片的电导率和丙二醛含量先降低后急剧上升,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性先升高后急剧降低.其余4种植物随土壤含水量的降低电导率先升后降,丙二醛含量先升后降或先降后升,SOD和POD活性总体呈上升趋势,其中蒙古莸SOD活性和花棒POD活性在所有植物中升幅最大,干旱28 d后分别升至为胁迫前的2.1、14.1倍.随胁迫时间的延长,5种植物各有机溶质的积累量存在较大差异,金露梅积累最多的可溶性糖和游离脯氨酸,28 d后分别增至为原来的2.1、23.4倍,花棒积累最多的可溶性蛋白,28 d后增至为原来的2.0倍.隶属函数法表明,植物耐旱能力为花棒>黑果枸杞>柠条>蒙古莸>金露梅.5种旱区植物可通过提高抗氧化酶活性和积累有机溶质对干旱胁迫进行积极的反馈,以减轻细胞受到的伤害.金露梅对水分亏缺的敏感性最高,试验期间其干旱程度已经超出了自身调节能力的阈值.     

采用综合加权聚类方法的农产品安全监测点规划

利用综合加权聚类法进行了农产品安全监测点的规划,从大量的监测对象中挖掘出一定数目的重点监测样点,使较少的监测样点能覆盖尽量多的产品类别、产量及区域.结果表明：应用综合加权聚类方法能有效地进行农产品安全监测点设置,从10172个农产品安全企业样本中聚类选取2.46%的企业进行检测,检测到的产量覆盖率达到44.29%,检测到的产品类别覆盖率达到32.71%,检测到的地区覆盖率达到75%.与常规监测管理方法相比,用综合加权聚类方法检测到的产量、地区和产品类别覆盖率分别提高了10.85%、5.56%和2.80%.     

光周期对西葫芦185品系顶芽和叶片衰老的调控

在短日照下,西葫芦(Cucurbita pepo Linn.)185品系的植株发生衰老.结构学、基因表达与系列生化分析证实:短日照启动了顶端分生组织由营养生长锥向花芽的转化,进而其组成细胞发生编程性死亡(PCD),导致顶端生长势的丧失;与长日照处理相比,短日照处理在发育晚期也引起大量叶肉细胞发生PCD,进而叶片出现衰老.核酸酶活性的高度表达是PCD过程中一个非常重要的分子事件.实验证实,西葫芦185品系植株衰老进程的发生与顶端分生组织和叶肉细胞中发生PCD密切相关.     

基于最优尺度的鄂西南山区景观生态风险时空变化特征

探究景观生态风险对优化生态脆弱山区景观格局和加强生态管理具有重要意义。利用鄂西南山区多期土地利用数据,构建基于景观格局指数的生态风险评估模型,采用地统计、空间自相关和地学信息图谱等方法,探究最优尺度下山区景观生态风险的时空分异规律与变化趋势。结果表明：鄂西南山区景观生态风险分析最适宜尺度为50 m栅格和4 km网格;1990—2018年,鄂西南山区景观类型结构稳定性较强,以林地、耕地和草地为主,其中建设用地面积增量最大且持续扩张,并且以耕地的转出和生态用地之间的相互转换为主;景观生态风险整体呈下降趋势,等级以低、较低风险水平为主,局部高风险和低风险区存在交错分布现象,景观生态风险等级面积变动也多为相邻等级间的转移;山区景观生态风险空间分布表现为显著正相关,主要以高值、低值集聚模式为主,风险空间集聚效应明显,局部空间自相关模式变化不大,空间分布稳定性较强;提出鄂西南山区景观生态风险防范与生态环境保护建议,为山区生态安全保障决策制定提供数据基础和理论支持。     

Studies on gene structure,enzymatic activity and regulatory mechanism of acetohydroxy acid isomeroreductase from G2 pea

TheAAIR genomic DNA of G2 pea (Pisum sativum L.) was amplified by PCR method. Sequence analysis showed that it was composed of 8 introns and 9 exons with three of the introns containing specific A/T-rich endogenous promoter regions. Molecular hybridization experiments revealed that the expression of AAIR remained at a high level before and after flowering if grown in short day growth chambers. However, when grown under long day conditions, the level of AAIR expression declined very rapidly after flowering. This variation of AAIR expression is consistent with the change of enzymatic activity of acetohydroxy acid isomeroreductase. Functional complementation experiments carried out using an acetohydroxy acid isomeroreductase deficientE. coli strain showed that these cells could not grow on M9 medium without addition of branched-chain amino acids unless they were transformed with theAAIR expression vector. Further study revealed that overexpression of the peaAAIR cDNA in acetohydroxy acid isomeroreductase deficientE. coli strain enhanced significantly its branched-chain amino acid biosynthetic capacity. Results from gel shift experiments showed that fractions of pea nuclear protein extracts could bind specifically to some A/T rich regions present in introns of theAAIR gene. The A/T-rich-region-binding proteins remained at a steady level in the non-senescing apical buds of short-day grown G2 pea. In the rapid-senescing apical buds of long-day grown G2 pea, the levels of these proteins declined rapidly after flower initiation. Therefore, the nuclear protein binding capacities to endogenous promoter regions may constitute an important mechanism to regulateAAIR gene expression.     

北京株水痘疫苗生产工艺的建立

目的:建立北京株水痘疫苗生产工艺,采用此生产工艺生产水痘减毒活疫苗。方法:采用细胞工厂培养2BS细胞,感染北京株水痘-带状疱疹病毒工作种子批,同时感染Oka株水痘-带状疱疹病毒工作种子批作对照,经洗涤、离心、收获、原液合并、冻干制备水痘减毒活疫苗,并进行各项检定。结果:对照两种不同毒株生产的水痘减毒活疫苗无明显差异,且各项检测指标均符合要求。结论:根据结果显示,可使用此毒株生产工艺大规模生产北京株水痘疫苗,与Oka株生产水痘疫苗无差异。如果用此毒株生产水痘疫苗供应市场,将会打破Oka株水痘疫苗国内市场的垄断。