内蒙古巴林左旗天然草地野生中草药资源有效保护及合理利用

天然草地野生中草药材,是草地资源的重要组成部分,是中草药的主要来源之一,是医疗保健、发展医药卫生事业不可缺少的宝贵资源.通过对内蒙古巴林左旗天然草地野生中草药资源分布、蕴藏量及生产利用等状况综合分析,提出了天然草地野生中草药材有效保护与合理利用的具体措施,对做好当地野生中药材管理与生产,做到资源的可持续利用具有一定的指导意义.     

Chk1反义寡核苷酸联合顺铂抑制卵巢癌侵袭转移的分子机制

目的:探究Chk1反义寡核苷酸(CHK1-ASODN)单独或联合顺铂(DDP)对卵巢癌细胞系SKOV-3侵袭转移能力的影响,并阐明其可能的分子机制。方法:体外培养人卵巢癌细胞系SKOV-3,CHK1-ASODN单独或联合DDP处理48 h后,划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;显微镜下观察细胞上皮或间质表型特征;Western blot及实时定量PCR技术分别检测上皮间质转化(EMT)特异性标志物(E-cadherin、N-cadherin)以及EMT关键调控分子ZEB1的蛋白及m RNA的表达水平。结果:与对照组相比较,CHK1-ASODN单独或联合DDP均能显著抑制SKOV-3细胞的迁移及侵袭(P0.05);细胞表现为间质化表型;E-cadherin的表达显著升高(P0.05),而N-cadherin的表达则显著降低(P0.05);ZEB1的表达显著降低(P0.05)。结论:CHK1-ASODN单独或联合DDP下调ZEB1的表达进而逆转EMT可能是其抑制卵巢癌侵袭转移的重要机制之一。     

截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究

利用PCR技术克隆截短型HPV58 L1基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒pFastBac-Htb,通过转座反应,将目的基因片段重组入杆状病毒基因组,分离重组的Bacmid DNA, 并转染Sf-9昆虫细胞,收集被转染的Sf-9细胞,提取细胞蛋白,SDS-PAGE检测可见在大约58Kda处出现一新生蛋白条带,Western blot 证实为HPV58L1蛋白。用ProBondTM纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集,透射电镜观察证实纯化蛋白可自组装成VLP。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型HPV58L1蛋白,纯化后的截短型HPV58L1蛋白在体外可自组装VLP,并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性。     

MEK5基因siRNA重组腺病毒表达载体的构建及其对MEK5的表达抑制

目的 构建人MEK5基因的小干扰RNA（siRNA）重组腺病毒表达载体,观察其在胃腺癌SGC7901细胞中对MEK5的表达抑制.方法 设计并合成针对人MEK5基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,将得到的重组穿梭质粒用PmeⅠ线性化后在大肠埃希菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组.将PacⅠ酶切鉴定正确的重组腺病毒质粒经乙醇沉淀后转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒.病毒体外转导人胃腺癌SGC7901细胞,Western印迹法检测其对MEK5表达的抑制.结果 经酶切和测序鉴定均证实pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误.Western印迹检测结果显示pAd-MEK5-siRNA2可抑制MEK5基因的表达,其有效抑制率达75.5 %.结论本研究成功地构建了针对人MEK5基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步深入研究MEK5基因在人胃腺癌细胞中的作用和功能奠定了基础.     

用改进的Blenden银染色法检查钩端螺旋体

近年来,在钩端螺旋体流行病学调查中,均采用改良镀银染色法,但此法在染色过程中须控制温度(最适为60℃),无特殊恒温设备,不易掌握。为寻求一种简便方法,我站于1982年,在钩体病监测中,按常法取鼠双肾培养后,再取鼠肾作压印片,沿用刘聿太改进的鞭毛染色法中的Blenden银染色法,检查钩端螺旋体(简称钩体),现将结果报告如下。     

HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定

利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV-16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,获得HPV-16L1转基因烟草植株。经PCR及Southern杂交分析 ,HPV 16L1基因整合到烟草基因组中 ;Westernblot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV 16L1单克隆抗体特异性反应 ,且定位于 5 5kD处 ,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的0.076 %。小鼠红细胞凝集试验 (HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验 (HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集。结果表明已成功地构建了HPV-16L1的植物双元表达载体 ,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV-16L1蛋白 ,所表达的L1蛋白具有良好的抗原性并具有介导小鼠红细胞凝集的生物活性.     

内蒙古巴林左旗天然草地野生中草药资源有效保护及合理利用

天然草地野生中草药材,是草地资源的重要组成部分,是中草药的主要来源之一,是医疗保健、发展医药卫生事业不可缺少的宝贵资源。通过对内蒙古巴林左旗天然草地野生中草药资源分布、蕴藏量及生产利用等状况综合分析,提出了天然草地野生中草药材有效保护与合理利用的具体措施,对做好当地野生中药材管理与生产,做到资源的可持续利用具有一定的指导意义。     

樱桃种间杂交种的幼胚培养

1植物名称樱桃种间杂交后代。杂交组合有甜樱桃(Prunus avium)×酸樱桃(P.cerasus),甜樱桃(P.avium)×欧洲李(P.domestica)、甜樱桃(P.avium)×中国樱桃(P.pseudocerasus)、酸樱桃(P.cerasus)×欧洲李(P.domestica)、酸樱桃(P.cerasus)×中国樱桃(P.pseudocerasus)。2材料类别幼胚。3培养条件基本培养基为F14。(1)幼胚培养培养基:F14+6-BA0.5mg·L-1(单位下同)+IBA1.0+GA1.0;(2)胚芽继代增殖培养基:F14+6-BA0.5+IBA0.2+GA0.2;(3)生根培养基:F14+IBA0.5+NAA0.05。培养基中蔗糖为2%,琼脂为0.7%,pH5.4。培养温度(25±2)℃,光照1…     

一种用時鐘自製的描记式时间记錄器

在進行某些生理学或心理学实验的时候,时间的记录是必要的装置之一。这裏把我们自已利用普通时鐘试製成功的一种记时计介绍一下。一般的说,普通时间记录计的构造都是相当複杂,机件都是专(?)的,因此在倣製和自裂中是比较困难的。我们知道为了進行一般的条件反射实验及普通的生理或心理实验,时间