SEF14菌毛基因操纵子在肠炎沙门氏菌和D-群沙门氏菌的变异分析

【目的】本文旨在探索SEF14菌毛特异性表达于D-群沙门氏菌,特别是肠炎沙门氏菌以及都柏林沙门氏菌的原因。【方法】应用PCR扩增以及序列测定检测了18株鸡白痢沙门氏菌,11株肠炎沙门氏菌以及1株都柏林沙门氏菌标准株中sefA,sefD和sefR基因序列,并分析比对其序列变异。【结果】以11株肠炎沙门氏菌以及1株都柏林沙门氏菌染色体DNA为模板能成功扩增sefA,sefD以及sefR基因;从18株鸡白痢沙门氏菌中均能成功扩增sefA基因,但只有分离于1980年之前的7株分离菌能成功扩增sefD和sefR基因,而另11株1980年后分离菌PCR扩增sefD和sefR基因却无任何产物。比对PCR扩增产物测序结果发现,11株肠炎沙门氏菌以及1株都柏林沙门氏菌株中sefA,sefD以及sefR基因序列和已发表的序列(GenBank登录号为L11008,U07129和AF233854)100%同源;7株鸡白痢沙门氏菌sefD基因测序结果表明,在196位点处发生碱基缺失,造成移码突变,提前于氨基酸残基71位点处产生终止密码子。优化菌毛表达条件,体外抽提和纯化菌毛并进一步试验证明:肠炎沙门氏菌以及都柏林沙门氏菌体外能很好表达SEF14菌毛,但鸡白痢沙门氏菌在相同培养条件下却无任何表达迹象。【结论】SEF14菌毛操纵子亚单位基因sefA,sefD以及调节基因sefR在不同沙门氏菌中的变异情况可能是SEF14菌毛局限性表达的原因之一。     

福建省家鸭的遗传多样性及其与野鸭的亲缘关系

为了探讨福建省家鸭的遗传多样性和品种进化, 本研究测定了福建省4个地方家鸭品种的32个个体和野生斑嘴鸭(Anas zonorhyncha) 8个个体的线粒体DNA D-loop区667 bp序列, 分析了这4个家鸭品种的遗传多态性及品种进化。结果显示4个家鸭D-loop区序列的A、G、C、T碱基平均含量分别为25.5%, 15.2%, 33.5%, 25.8%。确定了8种单倍型, 其中Hap2(与GenBank中的A7一致)为家鸭的主体单倍型, 平均单倍型多样度为0.75202, 平均核苷酸多样度为0.21%。4个品种中金定鸭单倍型多样度、核苷酸多样度最高。4个品种之间的Kimura双参数遗传距离为0.00094–0.00395, 其中连城白鸭和金定鸭之间遗传距离最大。结合GenBank上已发表的绿头鸭(A. platyrhynchos)和斑嘴鸭序列, 共有30种单倍型, 共同构建系统发生树和网络关系图, 结果表明4个家鸭品种单一地起源于绿头鸭。     

中国南部地区蜘蛛兰上朱顶红褪绿环斑病毒RNAL序列分析

朱顶红褪绿环斑病毒(Hippeastrum chlorotic ringspot virus,HCRV)流行和扩张速度极快,严重危害多种蔬菜和花卉产业,造成严重的经济损失,己上升成为中国南部地区正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)优势种.对不同地区HCRV分离株进行克隆,研究其在不同地区快速扩张和进化的机制对农业发展具有重要意义.本研究对2013-2015年在云南、广东、广西、福建和海南等5个中国南部地区采集的疑似感染Orthoto-spovirus属病毒的蜘蛛兰样本,采用RT-PCR技术鉴定、分离,得到10份HCRV新分离株,对其L序列进行克隆、测序.结合现有分离株,利用DNAMAN 7.0和MEGA 7.0进行分子多样性、系统发育和重组分析.结果显示,本研究的10份HCRV L分离株,包括1个最早报道的HCRV HLS1-2L分离株,可分为2个不同来源的类群.结合10份分离株采集地的环境信息,对比可看出其气候、温度、降水等差异很大,推测HCRV在中国南部地区的广泛分布与不同地区多态的气候类型有关,在它们的进化过程中,突变和重组发挥作用.RdRp是参与HCRV在细胞内的复制和转录的重要蛋白,对RdRp序列的分析,可为后续研究HCRV RdRp的遗传变异对HCRV侵染能力的影响提供理论基础,也为HCRV的防治提供思路.     

乳腺癌改良根治术患者术后复发转移的危险因素及血清CA125、COX-2、sTNFR-P55的预测价值研究

摘要 目的：探讨乳腺癌改良根治术患者术后复发转移的危险因素及血清糖类抗原125（CA125）、环加氧酶-2（COX-2）、可溶性肿瘤坏死因子受体P55（sTNFR-P55）的预测价值。方法：对2014年1月至2016年12月新疆医科大学第一附属医院收治的109例行乳腺癌改良根治术的乳腺癌患者进行前瞻性研究,所有患者术后均随访5年,其中2例失访,107例完成随访。根据5年内患者复发转移情况将其分为复发转移组（n=31）和未复发转移组（n=76）。收集患者入院时的临床病理资料,采用电化学发光法检测术前血清CA125,采用酶联免疫吸附法检测术前血清COX-2、sTNFR-P55。采用logistic回归模型分析患者术后复发转移的影响因素,绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估血清CA125、COX-2、sTNFR-P55对术后复发转移的预测价值。结果：复发转移组肿瘤直径＞5 cm、浸润性非特殊癌、脉管癌栓、雌激素受体（ER）/孕激素受体（PR）阴性、无内分泌治疗构成比、TNM分期IIIA期、腋窝淋巴结转移数量4~9个构成比高于未复发转移组（P<0.05）。复发转移组血清CA125、COX-2、sTNFR-P55水平高于未复发转移组（P<0.05）。多因素logistic回归分析结果显示,肿瘤直径＞5 cm、浸润性非特殊癌、TNM分期IIIA期、脉管癌栓、腋窝淋巴结转移数量4~9个、CA125升高、COX-2升高、sTNFR-P55升高是乳腺癌改良根治术患者术后5年内复发转移的独立危险因素（OR=1.318、1.213、1.223、1.137、1.257、1.241、1.313、1.351,P<0.05）。血清CA125、COX-2、sTNFR-P55均可有效预测乳腺癌术后复发转移,曲线下面积（AUC）分别为0.803、0.749、0.761,三指标联合预测术后复发转移的AUC为0.915,灵敏度和特异度分别为0.94、0.83。结论：肿瘤直径、浸润性非特殊癌、TNM分期、脉管癌栓、腋窝淋巴结转移数量以及术前血清CA125、COX-2、sTNFR-P55异常升高是乳腺癌改良根治术患者术后5年内复发转移的危险因素,术前血清CA125、COX-2、sTNFR-P55联合检测可预测乳腺癌改良根治术后的复发转移风险。     

基于线粒体DNA D-loop区序列的我国灰鹅遗传多样性和起源分析

为了探究我国灰鹅品种的遗传多样性和系统进化,运用DNA测序技术测定了我国13个灰鹅品种mtDNAD-loop区521bp序列。结果表明:这13个灰鹅品种521bpD-loop区序列的T、C、A和G碱基含量分别为23.8%、29.0%、32.3%和15.0%;平均单倍型多样度和核苷酸多样度分别为0.19245和0.00036;13个灰鹅种间变异大于种内变异,且均未出现群体扩张现象;共享单倍型和系统进化树分析表明,伊犁鹅起源于灰雁(Anser anser),其余12个灰鹅品种起源于鸿雁(A.cygnoides)。     

不溶性钙盐离子积在磷及氢氟酸烧伤中毒救治中的参考作用

目的根据不溶性钙盐离子积计算，将血钙控制于正常水平，从而将血磷酸与氟控制在致死性浓度以下，达到解救磷与氢氟酸烧伤中毒目的。方法氢氟酸与黄磷于新西兰兔背部皮肤致致死性磷与氢氟酸烧伤，伤后动物分为：氢氟酸烧伤组（HF，n=10）；氢氟酸烧伤钙治疗组（HF-Ca，n=10）；磷烧伤组（P，n=12）与磷烧伤钙治疗组（P-Ca，n=12），汽油烧伤对照组（G，n=12）。两治疗组均给予钙治疗以将血钙水平控制在正常水平以上，观测伤后死亡率与血氟、磷、血总钙、游离钙水平。结果氢氟酸烧伤组伤后血氟（1．15±0．12）×10^-4mol／L，动物死亡率100％；磷烧伤后血磷显著升高，动物死亡率75％；两组血游离钙均较正常显著降低（P〈0．05），钙治疗将血钙维持于正常水平后，7d内动物死亡率降低至普通烧伤的30％水平。结论维持血钙于正常水平能够防治磷及氢氟酸烧伤致死性中毒，这一结果能够从不溶性盐离子积计算中加以解释。     

微卫星技术分析地方鸡种群体的遗传结构

利用微卫星技术和14对引物MCW150、MCW134、MCW145、MCW104、ADL210、MCW88、ADL237、ADL201、ADL289、MCW5、MCW217、MCW29、ADL176、MCW4对7个地方鸡种和1个引进鸡种的群体遗传结构特征进行了分析。根据池DNA所获得的品种间相似指数计算遗传距离。结果表明:AA鸡与其它品种鸡遗传距离最远,白耳鸡次之,其余品种间较近。这些鸡种的遗传结构特征与其地理分布有关,说明微卫星技术作为畜禽遗传结构分析的辅助手段是可行的,也是高效的 。     

食管癌颈部吻合口瘘护理效果评价

目的:探讨食管癌根治术后并发症--颈部吻合口瘘患者的具体护理措施。方法:对2009年1月～2012年1月在我科行食管癌根治术后发生颈部吻合口瘘的患者在康复过程中的护理方法进行探索和总结。结果:16例并发吻合口瘘患者均治愈出院,其中15例患者瘘口在8～20天愈合,1例患者因营养状况较差,身体消瘦,吻合口瘘在45天愈合。结论:术后密切观察,早期诊断,吻合口瘘发生后积极的宣教,有针对性的选择不同方式的瘘口护理、基础护理、营养护理和心理护理有利于患者颈部吻合口瘘的早期愈合和术后身体的顺利康复。     

层连蛋白受体及其与肿瘤转移的关系

层连蛋白受体及其与肿瘤转移的关系李慧芳谢弘（中国科学院上海细胞生物学研究所,上海２０００３１）关键词层连蛋白受体肿瘤转移肿瘤转移是一个复杂的多步连续过程,大致可概括地分为以下几个步骤：（１）恶性瘤细胞穿破基膜形成浸润灶;（２）脱落;（３）瘤细胞穿破脉...     

福建家鸭品种的分子遗传多样性

通过筛选的28个多态性较好的微卫星标记检测了福建省金定鸭、莆田黑鸭、连城白鸭、山麻鸭4个家鸭品种的遗传多样性.利用等位基因频率计算了各群体的遗传参数、群体间的Nei氏标准遗传距离D_S和D_A遗传距离,并采用邻近法（NJ）和类平均法（UPGMA）进行聚类分析和比较.结果表明,福建省4个家鸭品种全部群体的平均杂合度为0.5353,遗传一致性较好,应加强各保种场（区）多样性的保护;各品种间的遗传距离远近顺序在两种遗传距离D_S和D_A的结果中完全一致,以D_A和D_S为基础分别得到的UPGMA和NJ的聚类结果完全相同,表明在应用微卫星标记分析品种的遗传多样性时,使用更多的微卫星位点,才可以获得更准确更具普遍性的结论.4个家鸭品种的聚类与各品种的经济类型、生态地域分布关系密切.