Ad5-knob蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及其活性检测

采用PCR技术, 从AdEasy 1质粒DNA中获得knob全长序列, 克隆入pGEM T vector中。DNA测序鉴定后, 构建pQE 30/knob重组表达载体, 转化大肠杆菌M15 pREP4),IPTG诱导表达腺病毒5 型纤维蛋白的knob功能域(Ad5 knob), SDS PAGE分析,表达产物主要以可溶性蛋白的形式存在于细菌裂解液上清之中。经Ni2 NTA亲和层析一步分离纯化后,洗脱产物中Ad5 knob蛋白纯度超过95%。N 端氨基酸测序证实了纯化产物为Ad5 knob蛋白,细胞受体结合实验检测到所得蛋白能够与Hela细胞上的相应受体特异性结合。上述结果表明在大肠杆菌中已经高效表达了可溶性Ad5 knob蛋白,一步即纯化该蛋白,并具有良好的生物活性,为其下阶段的深入研究提供了重要的实验材料。     

Ad5-knob蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及其活性检测

采用PCR技术, 从AdEasy-1质粒DNA中获得knob全长序列, 克隆入pGEM-T vector中.DNA测序鉴定后, 构建pQE-30/knob重组表达载体, 转化大肠杆菌M15 pREP4),IPTG诱导表达腺病毒5型纤维蛋白的knob功能域(Ad5-knob), SDS-PAGE分析,表达产物主要以可溶性蛋白的形式存在于细菌裂解液上清之中.经Ni2+-NTA亲和层析一步分离纯化后,洗脱产物中Ad5-knob蛋白纯度超过95%.N-端氨基酸测序证实了纯化产物为Ad5-knob蛋白,细胞受体结合实验检测到所得蛋白能够与Hela细胞上的相应受体特异性结合.上述结果表明在大肠杆菌中已经高效表达了可溶性Ad5-knob蛋白,一步即纯化该蛋白,并具有良好的生物活性,为其下阶段的深入研究提供了重要的实验材料.     

直肠癌腹腔镜Dixon 术与传统Dixon 术的临床效果对比分析

目的:对比腹腔镜直肠癌Dixon术与传统Dixon术两种手术方式的优缺点。方法:对我院2005年9月至2010年8月期间326例行腹腔镜下直肠癌Dixon术与传统Dixon术的患者临床资料作回顾性对比分析。结果:腹腔镜直肠癌Dixon术手术时间、胃肠功能恢复和住院时间较传统开腹Dixon术时间短,术中出血量较传统Dixon术少,术后镇痛方面较传统手术有优越性,术后粘连性肠梗阻发生率较传统手术少、术后吻合口瘘发生率及肿瘤复发率两者无显著性差异。结论:腹腔镜直肠癌Dixon与传统Dixon手术相比,术中出血少,创伤小,术后恢复好,具有明确的微创优势,是安全可行的。     

内镜套扎治疗门静脉海绵样变性食道静脉曲张破裂出血的疗效分析

目的:探讨内镜下曲张静脉套扎术(EVE)治疗门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血的疗效.方法:回顾性分析了2004年3月～2007年8月,我院采用内镜下曲张静脉套扎术治疗15例门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血的临床资料.结果:15例患者经EVL治疗均能有效控制出血,其急诊止血率达93.3%;经1-3次EVL治疗后曲张静脉基本消失,消失率达86.7%;随访6个月～4.1年,一年期静脉曲张复发率为38.5%,两年期静脉曲张复发率为33.3%,三年期静脉曲张复发率为25%,四年期静脉曲张复发率为0.在整个随访期中有8例患者自第一次EVL术后食管曲张静脉基本消失从未复发.结论:EVL治疗门静脉海绵样变性引起食道静脉曲张破裂出血是一种安全有效、简单易行的方法,可以起到急诊止血、消除曲张静脉和预防再出血的作用.     

湖南省健康人群血清总蛋白、白蛋白参考值调查

目的：本实验旨在建立湖南省健康人群血清总蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）及A/G比值的参考值区间。方法：收集4543例湖南省城乡健康参考个体,采用全自动生化分析仪测定其血清TP、ALB值,并计算A/G比值,按不同年龄、性别、城乡进行分组统计学分析,建立适合湖南省人群TP、ALB及A/G比值的参考值。结果：湖南省健康人群参考区间为TP：66.51～82.85 g/L,ALB：43.09～50.19g/L,A/G比值为1.05～2.19;TP随年龄增大而稍有升高,中年达到高峰,后随年龄增大而降低,在各年龄组,女性均高于男性（P〈0.05）,乡村地区TP值高于城市地区（P〈0.05）;ALB随年龄增大稍有升高,在青壮年到达高峰而后下降,在儿童青少年、青壮年组血清ALB男性高于女性（P〈0.05）,而在中年、老年组血清ALB无差别,乡村地区ALB值高于城市地区（P〈0.05）;A/G比值随年龄的变化存在一定的差异性,A/G比值随年龄增大稍有增高,在青壮年组达到高峰而后下降,且在各年龄组男性高于女性（P〈0.05）,城市地区A/G值高于乡村地区（P〈0.05）;湖南省健康人群的TP、ALB与全国其他省市的TP、ALB存在差异。结论：湖南省健康人群TP、ALB、A/G比值参考区间与全国其它省份稍有差异,血清TP、Alb、A/G比值存在年龄、性别和地区差异性。     

湖南省健康人群血清总蛋白、白蛋白参考值调查

目的:本实验旨在建立湖南省健康人群血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)及A/G比值的参考值区间.方法:收集4543例湖南省城乡健康参考个体,采用全自动生化分析仪测定其血清TP、ALB值,并计算A/G比值,按不同年龄、性别、城乡进行分组统计学分析,建立适合湖南省人群TP、ALB及A/G比值的参考值.结果:湖南省健康人群参考区间为TP:66.51～82.85 g/L,ALB:43.09～50.19g/L,A/G比值为1.05～2.19;TP随年龄增大而稍有升高,中年达到高峰,后随年龄增大而降低,在各年龄组,女性均高于男性(P＜0.05),乡村地区TP值高于城市地区(P＜0.05);ALB随年龄增大稍有升高,在青壮年到达高峰而后下降,在儿童青少年、青壮年组血清ALB男性高于女性(P＜0.05),而在中年、老年组血清ALB无差别,乡村地区ALB值高于城市地区(P＜0.05);A/G比值随年龄的变化存在一定的差异性,A/G比值随年龄增大稍有增高,在青壮年组达到高峰而后下降,且在各年龄组男性高于女性(P＜00.05),城市地区A/G值高于乡村地区(P＜0.05);湖南省健康人群的TP、ALB与全国其他省市的TP、ALB存在差异.结论:湖南省健康人群TP、ALB、A/G比值参考区间与全国其它省份稍有差异,血清TP、Alb、A/G比值存在年龄、性别和地区差异性.