传代内皮细胞形态和功能变化的关系

现在内皮细胞体外培养技术已在医学实验中得以日渐广泛的应用,为了更为合理地选择传代内皮细胞来进行各种研究,本实验结合了 传代内皮细胞在相差显微镜下的形态学改变及图象分析技术和蛋白质分泌功能的变化,探讨了传代内皮细胞形态和功能变化的关系。结果显示,传代内皮细胞存在着形态和功能相对稳定的阶段,在此阶段的几代细胞是作为实验选材的理想对象。而非稳定阶段的各代细胞间形态和功能都存有显著性差异,不应作为实验选材。     

酵母表达系统及其应用研究

酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具,拥有转录后加工修饰功能,适合于稳定表达有功能的外源蛋白质。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比,酵母表达系统操作简便,成本低廉,可大规模进行发酵,是最理想的重组真核蛋白质生产制备用工具。介绍了酵母表达系统的特点、常用酵母表达系统(载体和菌株)、酵母表达的一般步骤、实现高效表达的策略以及酵母表达系统的应用成果等。     

NF-κB活化与机体的免疫应答

NF—κB组成性活性参与机体免疫功能的维持和正常发挥,涉及T细胞、B细胞等多种重要免疫细胞的发育;免疫球蛋白的合成;免疫受体如MHC Ⅰ类分子、T细胞受体、IL-2R以及补体、急性时相蛋白等的表达调控。某些因素的刺激可以在一个极短的时间内使NF-κB的诱导性活性上升数倍,甚至数十倍,结果引起免疫应答过度,造成以自身免疫损伤为特征的免疫病理的发生。正确认识NF-κB活化与机体的免疫应答关系,有助于我们对NF-κB信号转导途径中存在的高级管理机制的研究,成为人们破译NF-κB活化的免疫生理应答及免疫病理应答调节的关键,对于临床寻求免疫病理损伤的有效干预措施具有重要的指导性作用。     

脊髓缺血再灌流时脊髓神经元的电活动规律

脊髓损伤的救治是神经科学研究的难点 ,目前实验性药物治疗取得了较好的效果 ,但临床应用效果不理想 ,患者功能改善极为缓慢。加强损伤脊髓功能变化规律及其机制的研究十分必要。在脊髓电生理功能的研究方面 ,除大量诱发电位的研究外 ,有关损伤条件下神经元电活动、脊髓损伤电位及损伤电流等研究较少。本实验利用细胞外记录技术 ,观察脊髓缺血及再灌流损伤时脊髓神经元的电活动变化 ,以分析损伤条件下神经元功能的变化规律及其意义。1　材料与方法(1)模型制备　日本大耳白家兔 10只 ,(2 .2 5± 0 .2 5 )ｋｇ ,雌雄不拘 ,以选择性腰动脉阻断…     

NF-кB活化与机体的免疫应答

NF-_κB组成性活性参与机体免疫功能的维持和正常发挥,涉及T细胞、B细胞等多种重要免疫细胞的发育;免疫球蛋白的合成;免疫受体如MHCⅠ类分子、T细胞受体、IL-2R以及补体、急性时相蛋白等的表达调控。某些因素的刺激可以在一个极短的时间内使NF-_κB的诱导性活性上升数倍,甚至数十倍,结果引起免疫应答过度,造成以自身免疫损伤为特征的免疫病理的发生。正确认识NF-_κB活化与机体的免疫应答关系,有助于我们对NF-_κB信号转导途径中存在的高级管理机制的研究,成为人们破译NF-_κB活化的免疫生理应答及免疫病理应答调节的关键,对于临床寻求免疫病理损伤的有效干预措施具有重要的指导性作用。     

Toll样受体4介导内毒素对内皮细胞NF-κB的激活

为探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在内毒素(LPS)对内皮细胞NF-κB激活中的作用,以LPS刺激培养的ECV-304细胞为模型,运用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测了内皮细胞TLR4的表达及LPS对其表达的影响.同时利用基因转染和抗体阻断方法进一步观察了TLR4在LPS对内皮细胞NF-κB激活中的作用.研究发现,LPS能明显上调内皮细胞TLR4的表达,呈一定的时间和剂量依赖性.转染TLR4的功能突变体和运用抗TLR4单抗能明显抑制LPS对内皮细胞NF-κB的激活.提示TLR4介导了LPS对内皮细胞NF-κB激活,可能在LPS对内皮细胞激活/损伤效应中具有重要的地位.     

内皮细胞培养中清除成纤维细胞的新方法

在原代细胞培养中很容易混杂成纤维细胞,并且随着传代次数的增加,由于成纤维细胞生长迅速,在培养细胞中所占的比例也日渐增加。本文介绍一种清除成纤维细胞的方法,对各种非成纤维细胞的原代培养有一定参考价值。以往是用0.1％的胶原酶消化法来清除成纤维细胞。但由于胶原酶价格昂贵,故并不     

油酸性肺损伤时纤维细胞生长因子的变化

纤维细胞生长因子(FGF)是分子量为16000—18000的蛋白,对中胚层来源的细胞,如成纤维细胞,血管内皮细胞有促进增殖作用。正常机体,除脑组织外,其他器官组织中FGF含量极低,不易检出。在慢性纤维化疾病和脑损伤时,FGF明显增加。油酸可引起多种动物急性肺损伤,导致反应性细胞增生,肺纤维     

高渗盐液对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

高渗盐液对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响宁可周继红王正国朱佩芳１李金鸣１王丽娟（第三军医大学野战外科研究所,重庆６３００４２;１中国医科大学药理学教研室）近年实验研究及临床应用表明,高渗盐液对失血性休克有明显的复苏作用,然而其作用机理尚不清楚。本研究利用...     

烧冲伤后不同治疗方案下微循环和总血容量变化比较

在考虑Ｆａｈｒａｅｕｓ效应和微循环调节作用的基础上,考察了一套新的计算微循环、大循环和总体血容量变化的方法,并用于烧冲复合伤后早期一次性注入高渗萄聚糖（ＨＳＤ）与乳酸林格氏液（ＬＲ）治疗间的疗效比较;血浆粘度测量值被引入这一计算。结果表明这一新方法通过分别对微循环、大循环血容量的估计,能更确切、更清晰地显示伤后治疗时血容量的变化和分布情况。显示了ＨＳＤ方案有可能是通过显著增加总血容量,改善大循环、微循环血容量,因而达到维持血压而减轻组织水肿等功效。结果表明,以本文提供的方法为基础发展一种方便实用的临床检测方法是可取的。