珍稀共生食用菌松口蘑的人工驯化

松口蘑是与松树共生的一种外生菌根真菌 ,被国内外誉为“蘑菇之王” ,极其珍稀昂贵。松口蘑的研究内容涉及到与近缘种的进化关系 ,与松树共生的生态环境 ,菌丝体的分离 ,纯化 ,培养方法及其真伪鉴定 ,纯培养的菌根建成 ,以及松口蘑半人工栽培试验等方面。讨论了目前人工驯化栽培松口蘑存在的问题及可能的解决途径。     

松口蘑菌丝体的分离和RAPD-PCR分析

针对松口蘑 [Tricholomamatsutake(S .ItoetImai)Sing .]菌丝体分离培养困难和各种相关分离物目前难以用出菇试验鉴定的现实 ,采用 8种培养基配方 ,对 9个不同来源的松口蘑子实体的不同部位及菌根、菌土进行组织分离 ,计接种试管 81 0多支 ,结果从菌褶部位获得 94支慢生型的菌丝体分离菌株 ,从菌柄部位仅获得 1支快生型的菌丝体分离菌株。以马铃薯葡萄糖土壤滤液培养基 (PDAS)、马铃薯葡萄糖麦麸滤液培养基 (PDAW )、BM培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (PDA)对菌褶进行组织分离 ,获慢生型菌丝体的成功率依次为 74.4%、35.5%、156%和 8.9%。以各分离菌株的来源松口蘑子实体和中日两国松口蘑研究者提供的分离菌株作为DNA参照样品 ,对从供试子实体、菌根、菌土进行组织分离获得的各种相关纯培养物进行亲菌鉴定。采用筛选的 1 7个随机引物介导 2 5个供试松口蘑子实体及其分离菌体的RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA) PCR反应 ,全部获得了清晰而稳定的DNA指纹图谱 ,结果一致表明 :每个松口蘑子实体的菌盖 (含菌褶…     

伞菌DNA简易序列分析引出的思考

目的:伞菌物种以子实体形态特征为分类依据,研究以菌丝体代替子实体进行种质资源鉴定的遗传证据。方法:以常见的食用伞菌香菇、平菇子实体的不同部位组织及其分离菌丝体为供试材料,制备了12个随机引物介导的RAPD-PCR指纹,把DNA指纹图谱转化为简易的序列数据,经生物信息处理软件比较分析。结果:香菇不同菌株子实体DNA相似性系数在0.886～0.986之间,平菇不同菌株子实体DNA相似系数在0.779～0.976之间。对于供试的单个子实体而言,香菇和平菇子实体的菌盖、菌褶、菌柄及其组织分离菌丝体,与以此为菌种栽培得到的子实体相比较,所获得的有限DNA指纹图谱全部相同。结论:揭示了香菇和平菇不同菌株的遗传多样性,初步反映了伞菌不同发育阶段在分子水平上的遗传变异和亲缘关系,争论了以菌丝体代替子实体使用RAPD手段进行种质资源鉴定与系统发育分析引出的真菌遗传问题。     

强力安对食用菌生产中杂菌的毒力测定

试验利用滤纸片、管碟抑菌圈法测定了强力安杀菌剂对木霉TrichodermaviridePers.exFr、链孢霉MoniliasitophilaMont等食用菌生产上的杂菌的毒力,结果表明强力安具有明显的抑菌、杀菌作用。试验还测定了强力安对食用菌的作用,结果表明强力安对平菇Pleurotusostreatus(JacexFr)Quel、金针菇Flammulinavelutipes（Fr）Sing具抑制力,而对黑木耳Auriculariaauricula(l.exHook)Underw、香菇Lentinulaedodes(Berk)Pegler则未发现抑制作用。根据强力安对供试菌的最低抑制浓度,作者提出了生产实际上的用药浓度,以供参考。     

塑料管碟法测定抗生素的抗菌活性

介绍了一种以塑料吸管代替牛津杯测定抗生素生物活性的新方法。     

外生菌根蘑菇分离技术折DNA鉴定方法

外生菌根真菌中存在一些食用蘑菇,由于其食药用价值极高而自然资源稀少,人们正努力探索驯化栽培的可能途径,作为供试菌种的各种分离培养物的真伪鉴定就成了研究者关注的焦点.评述了国内外近年来发展的几种外生菌根蘑菇分离菌株的DNA鉴定方法,并对它们进行了分析讨论.     

松茸利用淀粉的初步研究

目的：研究松茸在以淀粉为碳源的人工培养基上生长的可能性,初步了解共生菌根真菌松茸离体培养下的营养生长习性。方法：采用改良真菌合成培养基和单因子试验方法,比较了葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、可溶性淀粉和普通玉米淀粉等不同碳源对松茸纯培养菌丝体生长的影响,描述了菌丝体萌动生长速度与菌落扩展的态势,定期收获并称量菌丝体生物量（干重）,然后进行统计分析。结果：当查氏（Czapek）培养基以KNO3为供试氮源,供试碳源是普通玉米淀粉时,移植的松茸菌块萌发菌丝体相对延迟,长势较弱,松茸菌落扩展速度为0.13～0.2mm·d-1之间,生物量积累较少;以NH4Cl为优化氮源,松茸菌落扩展速度提高至0.37mm·d-1,1个月生物量积累27.3mg;进一步添加1‰（W/V）马铃薯汁,菌落扩展速度达到0.63mm·d-1,生物量积累达73.4mg。结论：共生真菌松茸可以利用淀粉作为单一碳源进行营养生长,但菌丝体扩展速度和生长态势较其它供试碳源条件下弱。而普通淀粉经改性加工成可溶性淀粉后,松茸长势有所改善。优化氮源,补充生长因子,则显著促进了松茸利用普通玉米淀粉的生长水平。     

香菇系统分类研究述评

香菇是一种引起木材腐朽的担子真菌,也是世界上最著名的食用菌之一。我国最早栽培香菇,至今已有８００多年历史。在世界六大商业蘑菇生产中,香菇产量名列第二或第三位。香菇的学名争论由来已久,目前面临两种学名选择,其一是Ｌｅｎｔｉｎｕｌａｅｄｏｄｅｓ（Ｂｅｒｋ...     

冻融法快速提取真菌微量培养物基因组DNA

目的:外生菌根真菌松茸Tricholoma matsutake(S.Ito et Imai)Sing.又名松口蘑,是一种极其珍稀昂贵的野生食用蘑菇资源.为了保护利用松茸资源的生物多样性,需要研究发展适用松茸的基因组DNA的提取方法.方法:对传统的液氮冷冻研磨的细胞破壁方法加以改进,采用液氮冷冻与室温融化交替处理松茸菌丝体与其它供试真菌细胞,进而萃取、浓缩、沉淀DNA.结果:利用本文研究的方法分离纯化出了满足分子生物学实验要求的高质量细胞总DNA.结论:该法相对简便、安全,可行、可靠,对供试真菌培养物需求量较少,既适用于担子真菌松茸,也适用于供试的其它真菌类群如酵母菌、丝状霉菌,应用前景广阔.     

香菇的电泳核型分析

采用钳位均匀电场（ＣＨＥＦ）凝胶电泳进行香菇的电泳核型分析,香菇染色体ＤＮＡ呈现８个谱带,结果与香菇联会丝复合物电镜研究一致。以酿酒酵母、裂殖酵母染色体作参照物,香菇染色体大致在７～２．２Ｍｂ之间,染色体组总计约３３Ｍｂ。电泳核型分析也可研究ｒＲＮＡ基因定位。