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目的:研究H1N1流感病毒血凝素HA对人胚肺成纤维细胞的损伤作用并初步探讨其机理。方法:合成2009 H1N1的HA基因全长,分别将HA的PCR产物和pEGFP-N1质粒经Hind Ⅲ和EcoRI酶切电泳、纯化、连接并转化大肠杆菌DH5α,构建真核表达质粒pEGFP-N1/HA。质粒转染293细胞,检测其转染效率,并收获细胞总蛋白进行Western blotting检测。将阳性质粒转染MRC-5细胞,CCK-8检测HA的表达对细胞增殖活性,线粒体膜电位检测试剂盒检测其对细胞的早期凋亡的影响,ATP检测试剂盒检测HA的表达对ATP水平的改变。结果:PCR电泳检测获得分子量为1700 bp左右的目的条带,菌落PCR鉴定HA片段成功插入pEGFP-N1载体。荧光显微镜下检测pEGFP-N1/HA转染293细胞有明显荧光,Western blotting结果显示pEGFP-N1/HA转染细胞有单一的目的蛋白表达。HA的表达可明显抑制MRC-5细胞活力,HA的高表达降低MRC-5细胞的线粒体膜电位及ATP水平。结论:H1N1流感病毒HA对人肺细胞的损伤作用可能与影响肺细胞的线粒体功能有关。 相似文献
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江苏省中学生物实验教学研讨会于1992年12月2~5日在常州市召开,有来自全省各地的代表40余人参加了会议。会议围绕生物实验在生物教学中的地位与作用;生物实验与学生能力的培养;生物实验考查的有效方法及实验教具的改进与制作等问题进行了大会 相似文献
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近年来,我们在省教研室、南京师大生物学系、南京市教师进修学院生物组的指导和帮助下,对南京市部分中学的生物教学进行了调查研究,感到从加强实验操作、培养学生观察能力入手,以激发学生学习生物学的兴趣,提高生物教学的质量,是一个值得探讨的课题。本文就培养学生的观察能力问题进行一些探讨。 (一)引导观察,要有明确的目的性在引导学生观察时,教师必须向学生说明观察目的,并经常提醒学生注意所要观察的对 相似文献
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