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酵母PH02蛋白及其变异体与PHO5UAS体外的相互作用 总被引:3,自引:3,他引:0
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利用酵母PHO81与大肠杆菌产β-半乳糖苷酶的融合基因,系统地研究了PHO81基因在酵母酸性磷酸醋酶的不同调控因子的单缺失株和双缺失株中的表达规律,它与酸性磷酸酯酶基因PHO5和PHO11的控制机制相似。构建了ADH1启动子控制下PHO81表达质粒。在PHO81在细胞内组成型表达时,酸性磷酸酯酶基因的表达仍受无机磷的控制,揭示PHO81蛋白可能在不同浓度无机磷条件发生变构。PHO81在酸性磷酸酯酶基因表达系统中是一个中介因子。在此基础提出了一个酸性磷酸酯酶基因调控的分子模型。 相似文献
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p53可以同细胞内的许多种蛋白质形成复合物从而参与细胞周期调节、基因表达调控、细胞分化、细胞程序化死亡和抑制肿瘤的发生等各项生理过程。为了筛选与p53作用的蛋白质因子,利用酵母双杂交(two-hybrid)系统,筛选了HeLa细胞的cDNA文库。在1.5×106个转化子中筛选到6个阳性克隆。经DNA全序列分析,结果表明5个阳性克隆中的cDNA序列编码产物均由158个氨基酸构成,分子量为17kD的人泛肽交联酶。同源性比较表明,该泛肽交联酶与人的UBC9(97%)、线虫的UBC(76%)、裂殖酵母的HUS5(66%)、拟南芥菜的UBC(66%)和啤酒酵母的UBC9(56%)有较高的同源性。进行了16种正常人组织和7种肿瘤细胞株的Northern杂交分析,结果显示:它在心脏、胎盘、胸腺、睾丸、卵巢、结肠和外周血白细胞中的表达较在肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、前列腺和小肠中为高,而在脑和肺中则检测不到表达。它在宫颈癌细胞株、乳腺癌细胞株、淋巴瘤细胞株和畸胎瘤细胞株中的表达较高,而在肺癌细胞株、肝癌细胞株和神经胶质瘤细胞株中则无明显表达。 相似文献
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敖世洲 《Acta biochimica et biophysica Sinica》1998,30(3):217-219
酵母酸性磷酸酶基因表达的分子机制敖世洲(中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室,上海200031)酵母酸性磷酸酶PHO5基因是一种阻遏型基因,它的表达受高浓度无机磷的阻遏,在低浓度无机磷条件下去阻遏[1]。PHO5基因的转录至少受5种蛋... 相似文献
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以pBR 322为载体直接从染色体DNA Bam H1片段中克隆中华蟾蜍大分子核糖体RNA(rRNA)基因,经抗四环素基因插入灭活和菌落的原位杂交筛选,获得一株rRNA基因重组体pMGr1。经凝胶电泳分析和电子显微镜测量,插入片段为12.9千碱基对(kb)。pMGr1和染色体DNA经几种限制性内切酶作用和Southern杂交分析,结果表明中华蟾蜍rRNA基因的重复单位大小是均一的,并得到pMGr1的限制性图谱。 相似文献
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携带质拉pBR322的大肠杆菌8021经亚硝基胍诱变后,获得一批温度敏感突变株。携带这些质粒的宿主细胞在含药(氨基苄青霉素、四环素)培养基中,于30℃能正常生长,而于42℃则不能正常繁殖;接种于无药培养基中,即使42℃亦能正常生长。这些突变株中,有四株在37℃亦能表现温度敏感性。对其中一株进行了高温(42℃)敏感细胞分离的观察,在42℃时,耐药细胞数目基本稳定,而敏感细胞数目明显增加。 通过这些突变株对药物抗性的温度敏感性观察、突变质粒DNA的转化及高温分离现象,证明宿主对药物抗性的温度敏感性是由于质粒复制部分发生突变所致。 从它们的电泳及Eco RI酶解图谱来看,在突变质粒的分子量及切点数目上未看到与出发株的差异。 相似文献