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1.
猪肥胖基因cDNA的克隆与分析   总被引:33,自引:0,他引:33  
戴茹娟  李宁  吴常信 《遗传学报》2000,27(4):290-297
肥胖基因(ab)是近年刚被克隆的新基因,该基因产物Leptin是反映体内脂肪含量和调节体重的重信号因子,首次报道猪ob基因全长序列,并对不同种物ob基因的同源性进行了比较,以λUni-ZAP^TM为载体构建了猪脂肪cDNA文库,根据已知的人和鼠ob基因序列设计PCR引物,利用PCR法筛选猪脂肪cDNA文库,并用RT-PCR从脂肪RNA中扩增的366bp猪ob基因片段作探针,获得了全长3277bp的  相似文献   
2.
猪肥胖基因在大肠杆菌中的高效融合表达   总被引:2,自引:2,他引:0  
采用PCR方法扩增猪肥胖基因编码原成熟蛋白cDNA序列,并在5′端加上BamHⅠ位点,3′端加上EoRⅠ位点,将5′端密码子CCC转变为大肠杆菌常见密码子CCG,扩增得到459bp的片段,克隆于融合表达载体p GEX-2TBamHⅠ和EcoRⅠ位点,酶切、测序正确,经0.1mmol/LIPTG诱导表达出一条约42kD的融合蛋白,其中26kD为pGEX-2T中带有的谷胱苷肽转移酶,16kD是猪肥胖基因表达产物瘦蛋白。利用非融合表达产品制备抗血清,检测融合表达的重组蛋白,Western-blot为阳性。  相似文献   
3.
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