胰岛细胞抗体分型与胰岛细胞凋亡的实验研究

研究通过大量临床糖尿病病人胰岛细胞抗体（Islet Cell Antibody,ICA)检测,发现ICA阳性反应有两种完全不同的形态学表现;弥漫型ICA和边缘型ICA,经免疫组织化学双标技术鉴别。弥漫型ICA可同时有着染α细胞和β细胞,边缘型ICA则仅着染α细胞。这种只着染α细胞的ICA国内外尚未见有报道,为探讨其在糖尿病发病中所起的作用。选择1型糖尿病（1-DM）的弥漫型ICA和边缘型ICA各3例。另选正常3例作对照,用患血清分别以2、4、8小时三个时相与分离并贴壁生长的正常人胰岛细胞孵育后,进行原位细胞凋亡检测。结果发现,弥漫型ICA,边缘型ICA均可导致胰岛细胞产生凋亡,其中弥漫型ICA使β细胞及α细胞出现凋亡;边缘型ICA使α细胞产生凋亡,这一结果提示;糖尿病发病机制除与分泌胰岛素的β细胞有密切关系的经典途径之外,可能还与分泌胰高血糖素的α细胞存在某种关系。     

用猪、家兔、大鼠、小鼠和豚鼠胰腺做抗原免疫组织化学检测ICA的比较研究

免疫组织化学检测Ⅰ型糖尿病（ＩＤＤＭ）病人血清中的胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）需用“Ｏ”型血人胰腺做抗原。因为人胰腺来源困难,所以,本研究选用猪、家兔、大鼠、小鼠和豚鼠以及“Ｏ”型血正常人胰腺作抗原,对１１例ＩＤＤＭ患者和１０例正常人血清,进行ＩＣＡ免疫组织化学检测,以期筛选寻找ＩＣＡ免疫组织化学检测的最佳抗原替代品。选用已确诊为ＩＤＤＭ并用“Ｏ”型血正常人胰腺作抗原ＩＣＡ检测为阳性患者的血清１１份,正常人血清１０份,同步用ＰＯＰＡ免疫组织化学技术进行检测。结果发现：在１１份ＩＤＤＭ患者血清中,用猪胰腺与用“Ｏ”型血正常人胰腺作抗原,１１例均为阳性,而用家兔和大鼠胰腺作抗原各有１０例为阳性。但用小鼠和豚鼠胰腺作抗原,则分别只有２例和１例呈阳性。在１０例正常人血清中,人和各种动物胰腺均呈阴性反应。本研究结果表明猪胰腺是ＩＣＡ免疫组织化学最佳替代品,其次是家兔和大鼠的胰腺。小鼠和豚鼠胰腺作抗原检测ＩＣＡ结果差异较大     

大鼠中枢和外周组织中脑钠素样物质的分布、特性和作用

本工作首先应用特异性脑钠素放射免疫测定、放射受体分析和免疫组织化学的方法,研究了大鼠中枢神经系统和一些外周组织中脑钠素免疫活性物质的分布、生化特性、受体结合和生物学作用,提出脑钠素可作为一种新的神经递质或循环激素,广泛分布于体内不同组织内,并参与水电介质和心血管活动的调节。     

K物质在大鼠心脏内的分布及其对心血管活动的作用

本工作应用特异性K物质放射免疫分析法测定了大鼠心脏的K物质样免疫活性,心房和心室含量分别为19.9±3.5和4.1±0.8pmol/g组织。心脏内的K物质样免疫活性物质主要以单一分子形式存在。用免疫组织化学方法证明K物质免疫活性存在于心脏神经纤维内。大鼠心肌杂交细胞株(CP8401)细胞上含有K物质特异性结合部位,KD为1.61×10~(-10)mol/L,Bmax为8.08×10~(-12)mol/L。用心肌杂交细胞和离体心脏进行体外实验,证明K物质可释放ANF,这种释放可为速激肽受体拮抗剂[D-Pro~2,D-Trp~(7,9)]-SP部份抑制。给麻醉大鼠静脉注射K物质可引起血压降低、心率加快、左心室内压和收缩速度下降。这一作用亦可被[D-Pro~2,D-Trp~(7,9)]-SP所部份抑制。应用大鼠离体灌流心脏模型,发现K物质可升高心脏灌流压、左心室收缩期峰压、左心室内压最大上升速率和加快心率、具有正性变时和变力性作用。 本工作提示,K物质存在于心脏神经纤维内,在心肌细胞上具有K物质的特异性结合位点。K物质可促进心肌细胞释放心钠素,并可调节心脏的功能。     

糖尿病大鼠视网膜血管铺片技术的改进及形态学观察

近年来我国糖尿病的患病率在逐年增加 ,病例总数居世界第二。糖尿病视网膜病变 (DiabeticRetinopathy DR)是糖尿病最为常见和严重的微血管病的并发症之一 ,也是成人主要致盲的疾病之一 ,病程愈长致盲机率愈高。DR发病机理至今尚未完全阐明 ,认为与多种因素的协同作用有关。目前 ,临床尚无有效的防治手段。因此研究 DR的发病机理 ,研制出有效治疗药物的任务迫在眉睫。视网膜毛细血管铺片技术是一种研究 DR理想的方法 ,不仅可清楚地观察到毛细血管的结构、走行、分布。还可进行定量分析细胞之间的比例、血管的密度、管径的大小等。但是 ,…