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1.
In order to develop a detailed physical map of the thermo-sensitive genie male-sterile (TGMS) gene-encompassing region and finally clone the TGMS gene, a high-quality rice bacterial artificial chromosome (BAC) library from TGMS rice 5460S was constructed. The method of constructing BAC library was examined and optimized. The 5460S library consists of 19 584 BAC clones with an average insert size of 110 kb, which represents about 5 times rice haploid genome equivalents. Rice inserts of up to 140 kb and 250 kb were isolated and appeared stable after 100 generations of serial growth. Hybridization of BAC clones with mitochondrial and chloroplastic genes as probes demonstrated that this library has no organellar contamination. The 5460S library was screened with 3 molecular markers linked to tmsl gene as probes and at least 1 BAC clone was identified with each probe. The insert ends of positive clones were successfully isolated using thermal asymmetric interlaced PCR (TAIL-PCR) technique.  相似文献   
2.
右旋糖酐蔗糖酶是一种以蔗糖为唯一底物,将蔗糖分子中D-葡萄糖基催化转移到受体分子上的葡萄糖基转移酶。利用右旋糖酐蔗糖酶的转糖基作用,以蔗糖为葡萄糖糖基供体,槲皮素为糖基受体,对槲皮素糖苷的酶法合成进行了探索。通过对该酶催化反应体系、催化反应条件及产物分析的研究,结果表明:在25℃下,右旋糖酐蔗糖酶能够在30%DMSO-70%乙酸-乙酸钙(0.02 mol/L,pH值5.4)的反应体系中催化合成一种槲皮素葡萄糖苷,在这个反应体系下,以10%的蔗糖作为糖基供体,槲皮素为糖基受体,右旋糖酐蔗糖酶活力为40 U/mL,转速为150 r/min,槲皮素糖苷的转化率最高,可达39.5%。通过质谱分析确定是一种槲皮素单糖苷,分子量为464。该研究结果为黄酮类物质的糖基化修饰奠定了基础。  相似文献   
3.
甘草是广泛使用的中药材之一.甘草中含有多种活性物质,甘草多糖作为主要的活性大分子,具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗补体以及免疫调节等生物活性.本文对近年来水溶性甘草多糖的分离纯化、结构解析以及生物活性研究的最新进展进行综述.  相似文献   
4.
温敏核不育水稻5460S细菌人工染色体文库的构建和鉴定   总被引:9,自引:0,他引:9  
为了构建温敏核不育 (TGMS)基因区域的精细物理图谱并最终分离TGMS基因 ,以温敏核不育水稻 5 46 0S为材料 ,摸索优化了构建植物细菌人工染色体 (BAC)文库的方法 ,构建了一个高质量的BAC文库 .该文库由 1 95 84个克隆构成 ,插入片段平均长度为 1 1 0kb ,相当于水稻单倍体基因组大小的 5倍 ;以分子量分别为 1 40和2 5 0kb的 2个大BAC克隆进行稳定性传代实验 ,经 1 0 0代传代后其插入的DNA片段仍然稳定存在 ;以线粒体和叶绿体基因为探针筛选BAC文库 ,未检验出叶绿体和线粒体DNA的污染 ;以和tms1基因连锁的 3个分子标记作为探针对BAC文库进行了筛选 ,每个探针至少可获得一个阳性克隆 ,利用热不对称性交错PCR(Tail PCR)法成功分离了阳性克隆的左右末端序列 .  相似文献   
5.
优良水稻品种“明恢63”BAC文库的构建   总被引:4,自引:0,他引:4  
“明恢63”是我国许多重要的水稻杂交组合中的恢复系。为了对其进行深入的遗传学研究以及克隆控制重要农艺性状的基因,以细菌人工染色体(pBeloBAC11)为载体,克隆经限制性内切酶消化后部分收集的“明恢63”基因组DNA,将连接混合物转化细菌DH10B,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库共有26000个转化子,插入片段为90~240kb,平均大小为150kb。经计算该文库覆盖9倍水稻基因组。该文库正在用于构建几个基因所在区段的物理图谱,为图位克隆打下基础  相似文献   
6.
以一株降解植物甾醇产生雄烯二酮的分枝杆菌为研究对象,先后利用亚硝基胍(NTG)和N+注入技术对其进行诱变处理。通过考察NTG浓度和N+注入剂量对菌株诱变效果的影响,确定了最佳诱变条件为NTG浓度为0.6 mg/mL,N+注入剂量为60×1011ions/cm2。最终选育出一株高产突变株Mycobacterium sp.N-2,其生产雄烯二酮的能力较出发菌株提高了37.8%,且传至第七代仍基本稳定。进一步研究了初始pH值、接种量和摇床转速等对高产突变菌株发酵能力的影响,确定了最佳发酵条件为初始pH值7.5,接种量12%,摇床转速260 r/min。  相似文献   
7.
张燕  张洪斌 《生物技术》2005,15(4):52-54
目的:分析白叶蒿的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法对白叶蒿挥发性化学成分进行了分析,用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量。结果:经毛细管色谱分离出31个峰,并鉴定出峰所对应的化合物。其主要化学成分为2,5-辛二烯(41.41%);(z,z)-3,5辛二烯(17.87%);桉油醇(6.75%);3,3,6-三甲基-1,5-庚二烯-4-酮(3.26%);1-甲氧基-4-(2-丙烯基)-苯(2.79%);3,3,4,4-四甲基己烷(2.71%);1R—α-蒎烯(2.67%);(1-甲基-1,2-丙二烯基)环丙烷(2.61%);7,11-二甲基-3-亚甲基-1,6,10-十二碳三烯(2.30%)等。结论:报道了白叶蒿的化学成分,为进一步开发利用提供了科学依据。  相似文献   
8.
制药工程专业微生物学教学改革与实践   总被引:1,自引:0,他引:1  
针对制药工程专业的培养目标,对微生物学的教学内容、教学方法进行了改革,建立了"基础+专业"的内容体系和多样式互动教学方法,结果表明,新的教学模式有利于培养学生的学习主动性和兴趣,取得了较好的教学效果。  相似文献   
9.
透明质酸(HA)是一种天然聚阴离子粘多糖已广泛用于医药和其它领域。目前已开发出了许多具有新的生物活性和功能性的透明质酸交联产物和衍生物,特别是水凝胶医用材料。本文综述了近年来透明质酸物理和化学改性研究的进展,重点介绍了交联改性、酯化改性、接枝改性和复合改性,以及改性产物在医药、生物组织工程支架等方面的应用前景。  相似文献   
10.
[目的]研究工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28-dexYG产右旋糖酐蔗糖酶的纯化和酶学性质.[方法]工程菌经过IPTG诱导后生产含His-tag融合蛋白的右旋糖酐蔗糖酶,通过硫酸铵沉淀、Ni-NTA亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究.[结果]经过SDS-PAGE测得该酶的分子量约为170 kDa,与理论推测值基本相同.以蔗糖为底物,酶促反应的最适温度为25~30℃,最适pH值为5.4,动力学常数Km值为10.43 mmol/L;酶活在pH 5.0~8.0较为稳定,在室温(25 ℃)保藏4天仍有59%的酶活力,4℃保存7周酶活力仅下降一半,但在35℃以上失活很快;Ca2 对催化作用有较大的促进,Mg2 有微弱的促进作用,K 对催化反应无影响,Cu2 的抑制作用最强.其他试剂对重组酶的活性有不同程度的影响,其中SDS抑制作用很强.[结论]研究为重组右旋糖酐蔗糖酶纯酶的获取、得到稳定性好、活性高的酶反应体系及利用该酶进行催化反应和工业化应用提供了重要参数.  相似文献   
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