植物双元表达载体pCRI1210的构建及其功能验证

pBI121是转基因研究中的常用载体,但是其多克隆位点相对较少,所携带的GUS基因检测较为复杂。为了增加其多克隆位点,增强其表达效率,简化其检测方法,本研究在pBI121载体的基础上,在其骨架中插入含有CaMV35S启动子、棉花β-tubulin基因内含子和CaMV 35S polyA终止子的干涉表达框,该表达框含有GFP报告基因。通过验证,所插入的干涉表达框能够正常表达插入的外源基因,且GFP基因可以正常表达。该载体被命名为pCRI1210,它是一种双元植物表达载体,既可以用来当作表达载体,又可以用作干涉载体。本研究为转基因研究提供了一种非常实用的工具。     

结直肠癌相关周期蛋白质研究进展

细胞周期蛋白是调控真核细胞有丝分裂时相的一类蛋白质,在肿瘤细胞的分裂增殖活动中同样起到十分重要的调控作用。在结直肠癌中,细胞周期蛋白的异常表达和调节失控十分常见。在结直肠癌相关周期蛋白的研究中,关于细胞周期蛋白Cyclin D1的研究最深入,可作为结直肠癌的一项诊断指标并作为其增殖程度的监测。近年来,随着周期蛋白Cyclin E、B1和周期蛋白依赖激酶Cdk1、Cdk4以及p21等在结直肠癌发生发展中的作用陆续得到一系列相关实验的初步证实,结直肠癌的研究不断向前推进,细胞周期蛋白必将为结直肠癌的治疗提供新的靶点。本文主要从细胞周期蛋白在结直肠癌中的表达、治疗效果这2个方面,介绍近年来结直肠癌相关周期蛋白的研究进展。     

棉花大田植株叶柄组织培养体系的建立

以早熟棉花品种'中棉所24'为材料,通过对大田棉花植株叶柄灭菌条件、叶柄愈伤组织诱导与分化、胚状体的萌发及植株再生所需的培养基等进行研究,以建立棉花大田植株叶柄组织培养体系.结果表明:棉花植株叶柄经0.1%HgCl2灭菌4～5 min后,横切成0.8 cm左右的小段,在MSB+0.05 mg·L-1IAA+0.05 mg·L-1KT+0.05 mg·L-12,4-D+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel(pH 5.8)培养基上培养,易获得分化的愈伤组织;愈伤组织在添加有KT/IAA(MSB+0.08 mg·L-1IAA+0.08 mg·L-1KT+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel,pH6.5)或ZT/IBA(MSB+0.1 mg·L-1ZT+0.1 mg·L-1IBA+25 g·L-1葡萄糖+2 g·L-1Gel,pH 6.5)的分化培养基中,均可以获得胚性愈伤组织.胚性愈伤组织在MSB+0.05 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1IAA+25 g·L-1蔗糖+2 g·L-1Gel(pH 6.5)培养基上,形成胚状体、生长发育成再生植株.     

棉花体细胞胚胎发生的研究进展

经过30多年的发展, 已经在多个不同的棉花品种中获得了体细胞胚, 并再生成苗。但由于体细胞胚胎发生往往受多种因素影响, 如何从愈伤组织高效率地转化为胚性愈伤组织依然是限制棉花组织培养与遗传转化的关键问题之一。本文概述了棉花体细胞胚胎发生的研究进展, 分别从棉花体细胞胚胎发生的起源、影响棉花体细胞胚胎发生的内外因素以及寻找棉花体细胞胚胎发生特异表达基因等几方面进行综述, 并对研究中存在的问题进行了讨论。     

益生菌干预治疗对非小细胞肺癌化疗患者肠道菌群、免疫功能及相关并发症的影响

目的:研究观察益生菌干预治疗对非小细胞肺癌化疗患者肠道菌群、免疫指标及相关并发症的影响。方法:选取自2016年1月-2018年12月赤峰学院附属医院收诊的80例非小细胞肺癌(NSCLC)需要化疗患者作为观察对象,将其随机分为益生菌给药组及安慰剂对照组,每组各40例。测量两组患者化疗前后体格指标,观察患者化疗相关并发症的发生情况,定量检测治疗前后双歧杆菌属、乳酸杆菌属、大肠杆菌和肠球菌属,血清CD3^+、CD4^+、CD8^+T细胞水平,粪便悬浮液中的粪便SIg A含量的变化。结果:化疗后,益生菌给药组患者的BMI、WHR均显著高于安慰剂对照组(P<0.05);益生菌给药组的双歧杆菌、乳酸杆菌含量及粪便SIg A含量与安慰剂对照组相比显著增加,肠球菌、大肠杆菌的含量显著减少(P<0.05);化疗后,益生菌给药组CD3^+、CD4^+T细胞比例显著增加(P<0.05),CD8^+T细胞比例显著下降(P<0.05),安慰剂对照组无明显改善(P>0.05);益生菌给药组的CD4^+/CD8^+比例与安慰剂对照组相比较显著升高(P<0.05)。结论:益生菌干预能调节NSCLC化疗患者的肠道菌群失衡,提高其免疫功能,并减少患者化疗期间相关并发症。     

农杆菌介导棉花大规模高效转化体系的研究

对农杆菌介导法转化棉花技术体系进行了综合改进,突破基因型的限制,使多品种或基因型(10个以上)的我国主栽棉花品种(系)转化成功,其中中棉所24号发展成为快速模式化转化品种(转化周期5～7个月,转化率8．1％),CCRI27、CCRI36等多个品种转化体系基本成熟。不同转化体系的愈伤组织诱导率为10％～40％,愈伤组织胚性愈伤诱导率达到10％～40％,转化率总体平均达到1．8％,并对大批量再生苗的鉴定予以程序化。实现棉花转基因规模化,达到年产转基因棉花植株2000～4000株以上的水平。     

肿瘤干细胞与胃癌

最近的一项研究报导,采用流式细胞仪分选技术从人胃癌细胞株中分离出CD44^＋胃癌干细胞. 20～30×10³个CD44＋细胞入NOD/SCID 鼠腹部皮下和胃浆膜下能形成胃癌移植瘤, 100×10³个CD44^－的细胞入NOD/SCID 鼠体内不形成肿瘤.采用无血清、无粘附间质的干细胞体外培养方法,发现CD44^＋的细胞能形成肿瘤微球体,具有自我更新能力,而CD44^－的细胞则不形成球形克隆.上述的实验结果说明,在人胃癌细胞株中存在胃癌肿瘤干细胞.据此可以相信,胃癌干细胞是胃癌细胞中具有自我更新及分化潜能的一小群细胞,不能被目前的化疗、放疗等抗癌治疗措施所杀灭,是胃癌术后复发、肿瘤进展扩散转移的根源.胃癌干细胞可能来源于骨髓干细胞.随着对胃癌肿瘤干细胞生物学研究的深入,必将为胃癌的临床诊断和治疗提供新的策略.     

棉花光敏雄性核不育突变体PSM4创制及其特性研究

为了创造棉花光敏雄性不育系材料,解决杂交制种中人工去雄成本高的问题,自2006年起进行了大规模组织培养,创造棉花突变体,以期筛选出棉花光敏雄性不育材料。2012年在组织培养再生植株后代中发现新型光敏核不育材料PSM4(photoperiod sensitive male sterility mutant of cotton),并于2012~2017年在海南三亚吉阳镇中寥村中棉所南繁基地和安阳中棉所试验田进行材料选育、生长发育调查及光周期实验。结果表明:(1)PSM4在日照时数大于12h时表现为雄性不育;在日照时数为11.5~12h时表现为有少量花粉,处于育性转变期;在日照时数小于11.5h时表现为正常可育。(2)遮光试验显示,PSM4花药败育关键时期为开花前12~15d;石蜡切片显微观察显示,花药败育原因是在长日照条件下花粉壁外层物质缺失引起的。(3)遗传规律研究显示,PSM4育性受单隐性基因控制,不受阴雨气候条件影响。(4)用6个棉花品系与PSM4进行正反交试验发现F1代均可育,F2代分离出光敏核不育单株,分离比符合3∶1的单隐性分离规律。研究认为,新型棉花光敏核不育材料PSM4农艺性状优良,其光敏不育突变为隐性性状,所有的陆地棉品种(系)均为其恢复系,有利于杂交种的培育和棉花混选混交育种群体的建立,具有广阔的应用前景。     

真核蛋白质的亚细胞位点预测研究进展

研究真核蛋白质的亚细胞位点是了解真核蛋白质功能,深入研究蛋白质相关信号通路内在机制的基础。同时,可以为了解 疾病发病机制及为新药研发提供帮助。因此,研究真核蛋白质的亚细胞位点意义十分重大。随着基因组测序的完成,真核蛋白质 序列信息增长迅速,为真核蛋白质亚细胞位点的研究提出了更多的挑战。传统的实验法难以满足蛋白质信息量迅速增长的需求。 而采用生物信息学手段处理大规模数据的计算预测方法,可在较短时间内获得大量真核蛋白质亚细胞位点信息,弥补了实验法 的不足。因此,运用计算预测法预测真核蛋白质的亚细胞位点成为生物信息学领域的研究热点之一。本文主要从提取真核蛋白质 的特征信息、计算预测方法及预测效果的评价三个方面,介绍近年来真核蛋白质亚细胞位点预测的研究进展。     

超低气腹压辅助悬吊在腹腔镜结肠全系膜切除术(CME)中的应用

目的:探讨超低气腹压辅助悬吊在腹腔镜结肠全系膜切除术(CME)中应用的可行性和临床价值。方法:选择2016年9月1日至2018年9月1日在我院接受腹腔镜CME手术的50例结肠癌患者,将其随机分为正常气腹压力组(Ⅰ组)与超低气腹压组(Ⅱ组),每组各25例。观察和比较两组患者的术中各时间点血流动力学和血气分析指标、术中出血量、术后排气时间、术后住院时间、术后并发症发生情况以及手术切除范围和标本质量。结果:两组患者气腹前平均动脉压(mean arterial pressure, MAP)、心率(heart rate, HR)、动脉血二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide in artery, PaCO_2)、血氧分压(partial pressure of oxygen, PaO2)比较差异均无统计学意义(P0.05);两组患者平卧位气腹后15、30、60、120 min时MAP、HR、PaCO_2逐渐升高,PaO2逐渐下降,其中气腹后30、60、120 min时与气腹前比较差异均具有统计学意义(P0.05);气腹结束时,两组患者的MAP、HR、PaCO_2均下降,PaO2升高,Ⅱ组患者基本恢复气腹前水平,Ⅰ组患者与气腹前比较差异均具有统计学意义(P0.05)。Ⅰ组患者气腹30、60、120 min时MAP、HR、PaCO_2均显著高于Ⅱ组(P0.05),而PaO2显著低于Ⅱ组(P0.05)。Ⅱ组术中出血量、排气时间及住院时间均明显低于Ⅰ组(P0.05),而Ⅰ组术后并发症发生率明显高于Ⅱ组(P0.05)。两组患者切除平面、肿瘤距切缘的距离和巴结清扫数目比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:超低气腹压辅助悬吊在腹腔镜结肠全系膜切除术(CME)中的应用具有可行性,对患者心肺功能的影响较小,且正常气腹压力CME疗效基本相同,可成为老年患者尤其是伴有心肺疾患者的一种选择。