Palmin诱导烟草氧化猝发的机制

为探讨植物对病原微生物的防御机制和激发子启动植物体内的信号转导应答过程 ,本文研究了Phytoph thorapalmi激发子palmin诱导其非寄主亲和性烟草的叶片和悬浮细胞系产生氧化猝发的分子机理。利用生化分析和激光共聚焦显微扫描技术动态观察palmin诱导烟草过敏反应中O·- 2 和H2 O2 的形成、胞间转移及引起细胞死亡的特性。结果表明 :palmin诱导激活了烟草细胞内NADPH氧化酶 ,产生大量的O·- 2 ;O·- 2 在SOD催化下迅速转变成H2 O2 ,并且H2 O2 在一定范围的细胞间转移和积累 ,最后诱发烟草细胞的过敏性坏死反应。palmin诱导氧化猝发过程还有Ca2 和蛋白激酶的参与。     

烟草—烟草花叶病毒互作中的质膜NADPH氧化酶

以NN烟草(NicotianatabacumL.)品种“SamsunNN”(与烟草花叶病毒(TMV)发生非亲和互作)和普通烟草(N.tabacumL.)“3002”品种(与TMV发生亲和互作)叶片为材料,采用差速离心法和两相法制备密闭的正向型质膜(PM)囊泡。用SOD敏感的依赖于NADPH的Cytc的还原表示质膜NADPH氧化酶产生超氧阴离子(O-·2)的活性。加入0.01%TritonX_100可使酶活性提高约80%,证明NADPH结合位点在质膜电子载体蛋白胞质结构域上,而O-·2在质膜外侧生成,在反应过程中发生了跨质膜的电子传递。质膜NADPH氧化酶的活性可部分地被哺乳动物NADPH氧化酶的专一性抑制剂DPI(diphenyleneiodonium)抑制,最大抑制达70%。受TMV侵染后,NN烟草NADPH氧化酶活性显著升高,而普通烟草的酶活性基本不变。对质膜NADPH氧化酶在烟草_TMV互作早期活性氧生成和启动过敏反应中的作用展开讨论     

Phytophthora palmi分泌的10.6kD蛋白激发烟草的过敏反应

从疫霉菌Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｌｍｉｖｏｒａ Ｂｕｔｌｅｒ的培养滤液中分离出分子量为１０．６ｋＤ的不含糖基的耐热蛋白．这种１０．６ｋ蛋白能诱导烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）叶片发生过敏性坏死反应。而疫霉菌另一种Ｐ．ｍｅｌｏｎｉｓ Ｋａｔｓｕｒａ的培养滤液中不含这种类似蛋白,不能诱导烟草叶片发生过敏反应。利用共聚焦激光扫描显微镜,以荧光探剂ＦＤＡ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ ｄ     

烟草—TMV相互作用中质膜NADPH氧化酶的组装

比较 Ｎ Ｎ 烟草（与烟草花叶病毒（ Ｔ Ｍ Ｖ）发生非亲和相互作用）和普通烟草 ３００２ 品种（与 Ｔ Ｍ Ｖ 发生亲和相互作用）在烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 的相互作用中质膜 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的组装激活、产生活性氧的差异．用两相法制备密闭的正向型质膜（ Ｐ Ｍ）囊泡,以 Ｓ Ｏ Ｄ 敏感的 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 依赖的 Ｃｙｔ ｃ 的还原表示 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶的活性,用人类噬中性白细胞 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶亚基 ｐ４７ ｐｈｏｘ 的抗体对烟草叶片蛋白进行免疫学检测．结果显示在两种烟草叶片胞质中均存在与 ｐ４７ ｐｈｏｘ 亚基的抗体发生免疫交叉反应的相同分子量的蛋白,该蛋白在 Ｔ Ｍ Ｖ 侵染 Ｎ Ｎ 基因烟草后可向质膜发生转移,且伴随有氧化酶活性的升高．而对于普通烟草则无氧化酶膜组分和酶活性的明显变化．以上结果表明,烟草叶片质膜上存在与哺乳动物 Ｎ Ａ Ｄ Ｐ Ｈ 氧化酶相类似的氧化酶,它的组装和激活可能是烟草— Ｔ Ｍ Ｖ 非亲和相互作用早期活性氧的主要来源．     

激发子与植物抗病信号转导

着重对激发子在植物抗病信号转导中的作用,包括激发子的类型、激发子结合蛋白的存在与防御反应信号转导的药理学研究,以及抗病基因与激发子受体的关系等方面做了介绍。     

Palmin诱导烟草氧化猝发的机制

为探讨植物对病原微生物的防御机制和激发子启动植物体内的信号转导应答过程,本文研究了Phytophthora palmi激发子palmin诱导其非寄主亲和性烟草的叶片和悬浮细胞系产生氧化猝发的分子机理.利用生化分析和激光共聚焦显微扫描技术动态观察palmin诱导烟草过敏反应中O*-2和H2O2的形成、胞间转移及引起细胞死亡的特性.结果表明:palmin诱导激活了烟草细胞内NADPH氧化酶,产生大量的O*-2;O*-2在SOD催化下迅速转变成H2O2,并且H2O2在一定范围的细胞间转移和积累,最后诱发烟草细胞的过敏性坏死反应.palmin诱导氧化猝发过程还有Ca2+和蛋白激酶的参与.