磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备

人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是一个肝癌潜在的诊断标志物和治疗靶点。为获得抗GPC3单克隆抗体,用PCR方法克隆GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入pGEX-2T载体,构建了pGEX-2T-gpc3表达载体。转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,获得高效表达。经纯化后获得分子量为58 kD的蛋白。以该重组蛋白为免疫原,通过免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和筛选获得1株抗该重组蛋白的单克隆抗体1F3。Western blot分析显示,该抗体具有较好的特性,可用于GPC3蛋白的功能和应用研究。     

海南睑虎种群密度调查研究

关于睑虎属Goniurosaurus物种的研究主要集中在新种描述和系统进化等方面,对种群密度量化的研究较少。为研究海南吊罗山国家级自然保护区海南睑虎Goniurosaurus hainanensis种群的资源现状,2019年7-9月,在保护区内选取2个不同海拔梯度的样区(A样区551~688 m和B样区289~448 m),采用标记重捕法对该物种的种群密度进行了调查,并分别采用Schnabel法和Lincoln指数法进行种群密度估算。结果显示:采用Schnabel法估算的种群密度A样区为501只/hm^2,B样区为1999只/hm^2;采用Lincoln指数法估算的种群密度A样区为583只/hm^2,B样区为1403只/hm^2。结果表明:该物种的种群密度随海拔升高呈下降趋势。     

海南睑虎繁殖生物学特征初步观察

关于睑虎属(Goniurosaurus)物种的研究主要集中在新种描述、分类分布以及系统进化等方面,繁殖生物学资料基本空白。本课题组于2017年9月至2019年8月对海南吊罗山国家级自然保护区内海南睑虎(G.hainanensis)的繁殖生物学特征进行了调查研究。结果发现,海南睑虎的繁殖期为3~10月,共观察到雌性个体147只,雄性个体179只。繁殖高峰期为7~8月,该段时间共观察到雌性96只,其中怀卵个体为51只,怀卵率为53%,怀卵数(1.9±0.5)枚,80%雌性个体的怀卵数为2枚,具有年产多窝卵的特性。卵均重、窝卵重、卵长径、卵短径、相对窝卵重1(窝卵重/产后母体体重)和相对窝卵重2[窝卵重/(产后母体体重+窝卵重)]与雌性体长无显著相关性。卵长径、卵短径和窝卵重与卵均重呈显著相关。孵化温度为22~26℃,孵化相对湿度为80%~95%,孵化周期为65~70 d(n=4),出壳过程持续近2 h(n=4)。吊罗山海南睑虎种群雌雄性比约为1︰1.2,成幼比约为8︰1,雌雄体型大小不存在两性异形。