高效、快速地将外源DNA导人根癌土壤杆菌

室温下用50mmol/L CaCl₂处理根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)以制备感受态细胞．然后经O℃冰浴及28℃热击处理,成功地将Ti质粒中间载体(>10kb)导入了根癌土壤农杆菌中。转化效率每个活细胞可达10 -4～10 -5转化子或10 6转化子／μgDNA。探讨了该菌细胞生长状态、CaCl2溶液浓度、温度、液氮、热击、复苏时间以及感受态细胞于4℃或-20℃(加15％甘油)下保存时间对根癌土壤杆菌转化的影响。     

谈谈我们开设的植物分子生物学实验课

1990年，在陈章良教授的帮助下，我们首次在植物生理生化大实验中增加了植物分子生物学实验。经过4年的实践，一套植物基因工程的核心实验和必要的设备已在我们的教学中建立起来，并积累了一些教学经验。这些实验受到系内外本科生，硕士、博士研究生，进修教师及校外有关技术人员的欢迎。现借《通讯户教学园地”专栏介绍开设这些实验的指导思想、内容及教学情况，与同行交流、共勉。1开设植物分子生物学实验课的必要性在科学技术飞速发展的今天，植物生理学的研究必然要借鉴和吸收其他学科研究的成果，包括物理、化学、生物学中的生物化学、…     

高效、快速地将外源DNA导入根癌土壤杆菌

室温下用50mmol/LCaCl_2处理根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)以制备感受态细胞,然后经0℃冰浴及28℃热击处理,成功地将Ti质粒中间载体(>10kb)导入了根癌土壤农杆菌中。转化效率每个活细胞可达10~(-4)～10~(-5)转化子或10~6转化子/μgDNA。探讨了该菌细胞生长状态、CaCl_2滚滚浓度、温度、液氮、热击、复苏时间以及感受态细胞于4℃或—20℃(加15％甘油)下保存时间对根癌土壤杆菌转化的影响。