快速叶绿素荧光动力学及其在植物抗逆生理研究中的应用

快速叶绿素荧光动力学是研究光合原初反应的无损探针,可监测光合反应的多个事件,并能反应植物的生理状况,可以应用于环境物理及化学条件胁迫对植物的影响(如化肥及除草剂的使用;CO2、O2、O3浓度的变化及温度、光强度胁迫等);也应用于农业生产(如确定耕作方式及日常管理;除草剂、杀虫剂及激素的使用;品种选优等);更是光合生理研究的便捷工具。介绍了快速叶绿素荧光动力学中的JIP-test分析方法,并从光、水分、温度、盐等多个方面介绍了JIP-test方法在植物抗逆生理研究中的应用。     

血清乳酸评估对危重患者预后的临床研究

目的:研究血清乳酸评估对危重患者预后的意义,为后期临床诊断提供参考。方法:选取2012年3月—2014年4月我院收治的危重患者78例,对其血清乳酸进行评估,根据评估结果分为观察组与对比组,40例患者血清乳酸在监测过程中升高为观察组,38例患者血清乳酸监测持续正常为对比组。分析两组患者不良预后与临床变化,同时将观察组存活与死亡患者的血清乳酸监测情况进行评估。结果:观察组多器官功能不全者32例,休克31例,死亡22例;对比组多器官功能不全者15例,休克3例,死亡8例。观察组进入重症监护病房后,死亡组乳酸值为(6.21±2.51)mmol/L,乳酸峰值为(8.87±2.59)mmol/L,0.5天乳酸清除率为(23.21±18.54)mmol/L;存活组乳酸值为(2.21±1.89)mmol/L,乳酸峰值为(4.12±2.15)mmol/L,0.5天乳酸清除率为(44.78±26.58)mmol/L。结论:血清乳酸评估对危重患者预后具有十分重要的意义。     

c-abl 通过与雌激素受体β相互作用上调其转录活性

雌激素受体β(ERβ)在心血管疾病发生发展中起着重要的作用,但是其在心血管病中发挥作用的机制还不清楚.因此寻找与ERβ相互作用的共调节因子对阐明ERβ信号通路具有重要价值.应用GST沉淀、免疫共沉淀技术,发现ERβ可以与c-abl相互作用,并可被c-abl磷酸化.通过荧光素酶报告基因方法发现,c-abl可以上调ERβ转录激活的活性,并且上调作用可以被c-abl的抑制剂STI571抑制.上述结果提示c-abl是新的ERβ共刺激因子,为进一步研究ERβ通路在心血管疾病中发挥作用的机制打下基础.     

2010年诺贝尔生理学或医学奖

<正>2010年10月4日,诺贝尔奖委员会在瑞典卡罗林斯卡医学院宣布,将2010年度诺贝尔生理学或医学奖授予英国生理学家罗伯特.爱德华兹(Robert G.Edwards),以表彰他在体外受精(in vitro fertilization,IVF)技术领域作出的杰出贡献。     

人TANK结合激酶1的基因克隆、表达及生物活性鉴定

目的:克隆人TANK结合激酶1(TBK1)基因,构建其真核表达载体,检测该基因在293细胞中的表达,并利用萤光素酶报告基因实验检测其生物活性。方法:应用RT-PCR方法,以HeLa细胞RNA为模板,扩增获得TBK1基因,定向克隆到pcDNA3-Flag载体中,以LipofectAMINE2000转染试剂转染pcDNA-Flag-TBK1至293细胞中进行瞬时表达,并利用萤光素酶报告基因实验检测诱导β干扰素(IFN-β)转录的情况。结果:测序结果表明,从人HeLa细胞总RNA中克隆到正确的TBK1基因全长编码序列,利用Western印迹检测其在293细胞中获得有效表达,利用萤光素酶报告基因实验检测TBK1可以诱导IFN-β转录激活。结论:真核表达的人TBK1具有相应的生物学活性,为研究其功能奠定了基础。     

TBK1相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域突变体的构建、表达及生物活性鉴定

目的:构建TANK结合激酶1(TBK1)相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域突变体真核表达载体,检测该基因相关突变体在293细胞中的表达,并利用萤光素酶报告基因实验检测其生物活性。方法:根据文献报道的突变序列及QuickChange Site-Directed Mutagenesis实验设计手册,设计合成2条针对TBK1相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域突变体的引物,以实验室之前构建的TBK1野生型真核表达载体为模板,构建TBK1激酶活性缺失突变体和泛素样结构域突变体真核表达载体,分别命名为pcDNA3-Flag-TBK1(KD)、pcDNA3-Flag-TBK1(ΔULD)。以LipofactAMINE2000转染试剂转染至293细胞中进行瞬时表达,利用萤光素酶实验检测2种TBK1突变体诱导β干扰素(IFN-β)转录的情况。结果:测序结果表明,TBK1相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域缺失突变体真核表达载体构建成功,Western印迹检测表明其在293细胞中获得有效表达;用萤光素酶报告基因实验检测,与野生型TBK1相比,其相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域缺失突变体诱导IFN-β转录激活的作用明显降低。结论:真核表达的TBK1相关激酶活性缺失突变体和泛素样结构域突变体具有相应的生物学活性,为研究其功能奠定了基础。     

人TBK1小干扰RNA质粒的构建及稳定干扰TBK1细胞株的筛选

目的:构建人TANK结合激酶1(TBK1)的小干扰RNA真核表达质粒,并筛选出稳定干扰TBK1的细胞株。方法:根据文献报道的序列和载体的黏性末端,设计合成2条针对TBK1的DNA序列,退火后连接到载体pSUPER.retro.neo+gfp上,经测序分析正确后得到质粒psiTBK1。用脂质体转染质粒psiTBK1到MCF-7细胞中,经G418加压筛选稳定表达TBK1小干扰RNA的细胞株,用免疫印迹检测细胞中TBK1的表达情况,将干扰效果好的细胞株命名为MCF-7/siTBK1,再用萤光素酶试验检测MCF-7/siTBK1细胞对外源TBK1诱导干扰素-β(IFN-β)转录的情况。结果:免疫印迹结果证实建立的稳定细胞株MCF-7/siTBK1能够有效干扰TBK1的表达,并在外源TBK1存在的情况下抑制IFN-β的转录活性。结论:构建了表达TBK1小干扰RNA的质粒psiTBK1,筛选出稳定干扰TBK1表达的细胞株MCF-7/siTBK1,为深入研究TBK1在先天免疫中的作用提供了平台。     

胃苏颗粒联合四联疗法对幽门螺杆菌相关性消化性溃疡患者血清炎性因子、胃肠激素及生活质量的影响

摘要 目的：探讨胃苏颗粒联合四联疗法对幽门螺杆菌（Hp）相关性消化性溃疡患者血清炎性因子、胃肠激素及生活质量的影响。方法：选取2018年3月~2019年12月期间我院收治的Hp阳性消化性溃疡患者124例,根据奇偶数字法将患者分为对照组、联合组,各62例。对照组给予四联疗法,联合组给予胃苏颗粒联合四联疗法,疗程均为4周。对比两组疗效、Hp根除率、炎性因子水平、胃肠激素水平、生活质量及不良反应。结果：联合组Hp根除率、临床总有效率高于对照组（P<0.05）。联合组治疗4周后SF-36量表各维度评分较对照组更高（P<0.05）。联合组治疗4周后血清降钙素原（PCT）、白介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平低于对照组（P<0.05）。联合组治疗4周后胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率对比差异无统计学意义（P>0.05）。结论：胃苏颗粒联合四联疗法治疗Hp相关性消化性溃疡患者,可有效改善患者体内血清炎性因子及胃肠激素水平,并提高其生活质量和Hp根除率,疗效优于单纯四联疗法。