ERK1/2信号通路对黄芪苷Ⅳ抗H_2O_2诱导H9c2细胞氧化损伤的作用

目的:研究黄芪苷Ⅳ(AST)是否通过细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。方法:用200μmol/L的H2O2处理细胞6 h,采用MTT法检测细胞存活率,建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型;比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活力以及丙二醛(MDA)含量;Western blot检测H9c2细胞ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果:在H2O2浓度为200μmol/L作用6 h条件下,细胞存活率降低程度适中,实验结果重复性好,确定后续实验采用200μmol/L H2O2作用6 h建立模型。与H2O2组比较,10 mg/L及20 mg/L AST均显著提高细胞存活率(P<0.01),使细胞培养液中LDH活性显著降低(P<0.01),T-SOD及Mn-SOD活力显著提高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01)。10 mg/L及20 mg/L AST均显著增加H2O2损伤的H9c2细胞p-ERK1/2蛋白的表达(P<0.01),当用PD98059(ERK1/2的抑制剂...     

黄芪苷Ⅳ对微囊泡损伤的大鼠胸主动脉环舒张功能的保护作用

目的：以缺氧/复氧诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）释放的微囊泡（H/R-EMVs）处理大鼠胸主动脉环,造成其舒张功能损伤,探究黄芪苷Ⅳ（AST）对大鼠胸主动脉环舒张功能的影响及相关机制。方法：采用缺氧12 h/复氧4 h的方法诱导体外培养的HUVECs产生MVs,H/R-EMVs保存于D-Hank's液中备用。雄性Wistar大鼠开胸取出胸主动脉,制备3~4 mm宽、内皮完整的胸主动脉环。实验分为6组：H/R-EMVs组,在孵育胸主动脉环的培养基中加入H/R-EMVs,使其终浓度为10μg/ml;不同剂量AST组分别采用10、20、40、60 mg/L AST与10μg/ml H/R-EMVs共同孵育胸主动脉环;对照组给予等体积的D-Hank's溶液。孵育时间为4 h,每组各测定5个血管环。观察AST对舒张功能的影响,检测一氧化氮（NO）含量及t-eNOS、p-eNOS、t-Akt、p-Akt、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白质水平。结果：H/R-EMVs对大鼠胸主动脉环舒张功能有明显的抑制作用（P<0.01）。与H/R-EMVs组相比,AST 20、40和60 mg/L组剂量依赖性地提高大鼠胸主动脉环的舒张率（P<0.01）,使NO含量增加（P<0.05,P<0.01）;t-eNOS、t-Akt和ERK1/2蛋白质水平不变,p-eNOS、p-Akt和p-ERK1/2蛋白质水平增高（P<0.01）。结论：AST可显著改善H/REMVs损伤的大鼠胸主动脉环的舒张功能,其机制与提高NO含量及增加p-eNOS、p-Akt和p-ERK1/2蛋白质水平有关。     

小鼠无代价长寿?

目前对线虫的研究已经发现了上百种蛋白 ,当编码这些蛋白的基因发生突变时 ,线虫的寿命得以延长。说明这些蛋白与哺乳类动物细胞的衰老可能有一定的关系。近年在线虫体内发现的DFA 2蛋白 ,无论在结构上还是功能上均与人类的胰岛素或胰岛素样生长因子 (IGF)受体相似。当其活性降低时 ,线虫的寿命可延长一倍。随后在果蝇体内也发现了类似的受体。然而 ,由于在哺乳类动物体内同时存在胰岛素受体和IGF受体 ,甚至在某些组织还发现了胰岛素IGF I受体 ,且两者的细胞内信号转导途径间又有交叉 ,使对寿命调节机制的研究变得较为复杂。抑制生长…     

在体大鼠延迟相心肌缺血预适应模型的改进与评价

目的:改进并评价在体大鼠延迟相心肌缺血预适应模型.方法:大鼠分为延迟相缺血预适应组(DPC组)和缺血/再灌注组(I/R组).观察缺血/再灌注期间心率、血压、心电图ST-段变化,记录室性心律失常的发生情况,测定血浆肌酸激酶活性.结果:与I/R组比较,DPC组经预适应性缺血刺激后,缺血期ST-段抬高幅度明显降低(P＜0.01),室早、室速出现时间推迟(P＜0.01),持续时间缩短(P＜0.01),室颤发生率降低(P＜0.01),再灌注期间血浆肌酸激酶活性升高的程度降低(P＜0.05),心肌梗死范围缩小(P＜0.01).结论:所建立的在体大鼠延迟相预适应模型的实验过程缩短,死亡率降低,可为心肌缺血预适应和药理性预适应的研究提供重要手段.