通过显微注射法构建ES细胞(MESPU 13)嵌合小鼠

为了研究一个新建的小鼠胚胎干细胞系(ES细胞系)MESPU 13,我们将ES细胞显微注射到C57BL/6J小鼠的囊胚中构建嵌合鼠。在注射了2-9个ES细胞的136个囊胚中,127个囊胚(93%)经过3个小时的培养后重新出现囊胚腔。当把119个恢复的囊胚移植到假孕雌鼠的子宫内时,获得63只(52.9%)出生鼠。在59只存活到可以判断毛色阶段的小鼠中,有21只(35.6%)被判定为嵌合鼠。显示了该ES细胞系具有较高的嵌合能力。     

ES细胞（MESPU13）嵌合体小鼠的GPI分析

为了评判小鼠ＥＳ细胞系ＭＥＳＰＵ１３的分化潜能,我们对１９只嵌合小鼠的心、肝、脾、肺、肾、胰腺、生殖腺、肌肉和血液的ＧＰＩ（磷酸葡萄糖异构酶）进行了分析。在这些样品中,来源于ＥＳ细胞的Ａ型条带的检出情况和小鼠的毛色嵌合率成正比关系。当毛色嵌合率低于４０％时,除了少数小鼠的肾脏外,没有看到Ａ型的条带。当毛色嵌合率大于８５％时,几乎所有的器官组织都检测到Ａ型条带,显示了ＥＳ细胞在发育形成内、中、外胚层的细胞方面具有很高的分化潜能。另外,在毛色嵌合率大于８５％的其中的６只嵌合鼠的肌肉中,只观察到Ａ型的条带,表明这些肌肉只单独来源于ＥＳ细胞。     

脂蟾毒配基诱导人肝癌细胞凋亡作用的研究

目的 通过体外脂蟾毒配基对人肝癌细胞（Bel7402）的凋亡诱导作用,为研究其抑制肿瘤细胞生长的作用机制提供依据。方法 通过应用流式细胞光度术检测细胞凋亡;采用细胞免疫细胞化学显色检测和Western blotting分析凋亡相关基因蛋白的表达来研究脂蟾毒配基对人肝癌细胞（Bel7402）凋亡的诱导作用。结果 表明脂蟾毒配基能够诱导Bel7402细胞发生凋亡,凋亡率大于50%;脂蟾毒配基提取液(浓度1.0 μm）作用于Bel7402细胞24小时后,bc1-2蛋白的表达下调,到48、72小时后下调更明显;而Bax蛋白的表达从24小时后开始上调,到48、72小时后表达上调明显。使用方差分析法与对照组相比较,P<0.05 ,统计学有显著意义。结论 提示诱导肿瘤细胞凋亡可能是脂蟾毒配基抑制、杀伤人肝癌细胞的机制之一。     

白介素-6及肿瘤坏死因子α对新生儿低出生体重的影响

研究表明,在子宫内感染如绒毛膜羊膜炎发生时,脐血内的细胞因子浓度产生很大的变化,其中细胞因子白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平都有显著性升高。有人提出这些细胞因子正是分娩发动的原因,它们通过促进前列腺素PGS的合成导致分娩。与此同时,由于母体的血液循环,母体血清中IL-6、TNF-α的浓度也有显著性变化,可作为检测宫内感染的诊断指标加以应用。     

新生儿基因CYP2E1 5′端RsaⅠ和PON2311位点多态性与早产的关系

探讨新生儿基因细胞色素P450 2E1（CYP2E1）5‘端RsaI多态性和对氧磷酶2（二乙基对硝基苯磷酸酯酶2）基因311位点（PON2311）多态性对早产的影响。采用横断面调查方法,使用统一的调查表,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎,活产,早产和对照新生儿进行调查,共得到有效样本194个母亲－新生儿对。单因素分析结果显示：CYP2E1野生纯合子基因型（cut/cut)与突变纯合子基因型（uncut/uncut)/杂合子基因型（cut/uncut)比较,对早产的影响不具有统计学意义,而PONS2 Ser311Ser纯合子基因型与Cys311Cys纯合子基因型／Cys311Ser杂合子基因型比较,对早产的影响具有显著的统计学意义。进一步分析CYP2E15‘端RsaI位点多态性和PON2311位点多态性是否存在交互作用。结果显示：CYP2E1野生纯合子基因型和PON2 Ser311Ser纯合子基因型这一组合与参照组比较,对早产的影响具有显著的统计学意义。基因CYP2E15‘端Rsa I位点多态性与新生儿早产不相关,但基因PON2311位点多态性与新生儿早产相关,且CYP2E1 5‘端RsaI位点多态性和PON2311位点多态性之间对早产的影响存在交互作用。     

人类21号染色体与疾病

21号染色体是人类染色体中最小的常染色体,由日本等13个国家的研究单位组成的国际基因组已完成了21号染色体的DNA序列分析,其99．7％的序列已被测定。21号染色体长臂（21q)DNA,由33546361bp组成,其中只剩下3个小的克隆裂隙和7个序列裂隙（约100kb)尚未确定,在21q,q的近着丝粒处有21q远,近区域存在很多重复序列。21号染色体有39个断裂点,原因是由于21号染色体与其他染色体发生相互易位、21号染色体内重排或受到辐射所致。人类21号染色体上的特异基因与小鼠16、17及10号染色体上的某些基因互为同质异构基因,显示了基因组在进化过程中的变异性和保守性,21号染色体基因密度较小,含有127个已知基因,98个预报基因和59个假基因,21号染色体与Down′s综合征,某些单基因遗传紊乱,某些复杂疾病（双相情感障碍、家族性复合高血脂症）、实体瘤及白血病的发生有关。     

新生儿CYP2E1基因5′端RsaⅠ位点多态性和PON2基因148位点多态性与早产的关系

为探讨新生儿细胞色素P450 2E1(CYP2E1)基因多态性和对氧磷酶2(二乙基对硝基苯磷酸酯酶2)基因(PON2)148位点多态性对早产的影响,采用横断面调查方法,使用统一的调查表,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎、活产、早产和对照新生儿进行调查,共得到有效样本209个母亲-新生儿对。单因素分析结果显示：CYP2E1野生纯合子基因型( ／ )与突变纯合子基因型(-／-)／杂合子基因型( ／-)比较,对早产的影响不具有统计学意义。而PON2 Alal48Ala纯合子基因型与G1y148G1y纯合子基因型／Ala148 Gly杂合子基因型比较,对早产的影响具有显著的统计学意义。进一步分析CYP2E1基因5′端RsaⅠ位点多态性和PON2基因148位点多态性是否存在交互作用,结果显示：CYP2E1野生纯合子基因型和PON2 Ala148Ala纯合子基因型这一组合与参照组比较,对早产的影响有显著的统计学意义。基因CYP2E1 5′端Rsa I位点多态性与新生儿早产不相关,但基因PON2 148位点多态性与新生儿早产相关,且CPY2E1 5′端Rsa I位点多态性和PON2 148位点多态性之间对早产的影响存在交互作用。     

新生儿PON2基因多态性与早产的关系

探讨新生儿对氧磷酶2基因多态性（PON2148,PON2311）对早产的影响。采用横断面调查方法,使用统一的调查表,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎、活产、早产和对照新生儿进行调查,共得到有效样本194个母亲-新生儿对。单因素分析结果显示：PON2 Ala148Ala纯合子基因型与Gly148Gly纯合子基因型 / Ala148Gly杂合子基因型比较致早产的危险性升高且有显著意义;同样,PON2 Ser311Ser纯合子基因型致早产的危险性升高且有显著意义。进一步分析PON2148位点多态性和PON2311位点多态性是否存在交互作用,结果显示：这两个位点多态性之间无明显交互作用。对氧磷酶2基因PON2148位点多态性和PON2311位点多态性与新生儿早产相关,但PON2148位点多态性和PON2311位点多态性之间对早产的影响无明显交互作用。 Association of PON2 Gene Polymorphisms in Neonates with Preterm LIANG Hong-ye1,WU Bai-yang1,CHEN Da-fang1,YANG Fan2,HU Hai-yan2,CHEN Li1,XU Xi-ping1. 1.Department of Biology & Genetics,Peking University Health Science Center,Beijing 100083,China; 2.Anqing Branch of Institute for Biomedicine,Anhui Medical University,Anqing 246000,China Abstract:The objective is to investigate whether gene polymorphisms in the PON2 gene (PON2148 and PON2311) of neonates are associated with preterm. Using standard questionnaires,194 singleton live born mother-neonate pairs (include preterm cases and term controls) were investigated by the trained field workers with cross-sectional survey at the hospitals in Anqing,Anhui Province,China. Epidemiological and clinical data and blood samples were obtained from 194 mother-neonate pairs. Among neonates,PON2 Ala148Ala homozygote is significantly associated with preterm,compared with Gly148Gly homozygote / Ala148Gly heterozygote before and after adjustment confounders and the same was true for PON2 Ser311Ser homozygote. However,when PON2148 polymorphism and PON2311 polymorphism were considered jointly,no significant gene interaction between PON2148 polymorphism and PON2311 polymorphism in relation to preterm was observed. We draw a conclusion from this research that both PON2148 polymorphism and PON2311 polymorphism in neonates are significantly associated with preterm respectively. But the gene interactions between PON2148 polymorphism and PON2311 polymorphism in neonates are not significantly associated with preterm. Key words：paraoxonase 2 gene (PON2 gene);gene polymorphism;preterm;genotype