兔脑种植VX2肿瘤动物模型的建立

目的建立兔VX2肿瘤脑内种植动物模型,观察其生长特性。方法采用兔脑内VX2肿瘤组织块种植法将VX2肿瘤组织块种植入24只成年New Zealand大白兔右侧大脑皮质内,用B超检测肿瘤的生长情况,在实验兔在肿瘤种植后第13、171、9、21、232、5天取材,进行组织学观察。并观察实验兔在种植VX2肿瘤后的生存期及出现厌食、偏瘫等神经系统体征和死亡的时间。结果VX2肿瘤组织块种植入脑内后荷瘤兔的中位生存期为24.5 d,平均生存期为24.8 d,肿瘤体积随种植后的时间在对数坐标中接近一条直线。VX2肿瘤种植入兔脑17 d后血供较丰富、呈鱼肉状生长,与正常脑组织边缘界限不清楚,第17~19天肿瘤中心出现坏死并出现腹腔内转移。光镜下从VX2肿瘤种植后第17天开始肿瘤细胞向正常脑组织浸润,并形成瘤巢,瘤周脑组织形成水肿带。结论在缺乏兔源性脑肿瘤的情况下,采用兔VX2肿瘤组织块颅内种植能较好模拟颅内肿瘤生长,为对脑肿瘤的某些实验研究提供条件。     

鱼类自然杀伤样细胞的研究进展

哺乳类自然杀伤(Natural killer,NK)细胞是先天性免疫系统的重要效应细胞,因其非特异的细胞毒杀伤作用而得名,NK细胞可介导先天性免疫应答和获得性免疫应答。与哺乳动物类似的是,在鱼类中也发现与NK细胞功能相似的细胞毒细胞,称为NK样(NK-like)细胞。NK样细胞也具有细胞毒作用,是鱼类抗病毒、细菌、寄生虫感     

鱼腥藻SP.595液泡化原生质球诱导条件的研究

用浓度为0．15mol／L的KNO3、KCl、K2SO4、KH2PO4、K2HPO4、NaNO3、NaCl、Na2SO4、NaH2PO4、Na2HPO4、(NH4)2SO4、MgSO4、CaC12等单盐分别配合0．1％的溶菌酶处理鱼腥藻sp．595(Anabaenasp．595)。经4h,KH2PO4、K2SO4、Na2SO4、NaH2PO4、(NH4)2SO4、MgSO4、CaC12能诱导形成原生质球,但液泡化原生质球极少,而KNO3、NaNO3、NaC1诱导形成少量液泡化原生质球。用相近浓度的双盐,即KNO3和NaC1、KNO3和(NH4)2SO4、NaC1和(NH4)2SO4分别配合0．1％的溶菌酶处理,诱导效果亦不佳。用相近浓度的三盐NaC1、KNO3和(NH4)2SO4及五种盐NaC1、KNO3、(NH4)2SO4、Na2HPO4和KH2PO4分别配合0．1％的溶菌酶处理,诱导原生质球和液泡化原生质球的效果明显提高,液泡化原生质球比例达到66．90％—79．97％。     

组蛋白变体及组蛋白替换

组蛋白作为核小体的基本组分,是染色质的结构和功能必需的。对于不同状态的染色质,核小体中会组装入相应的组蛋白变体,并且各种组蛋白变体的尾部也能发生多种修饰。这些变体通过改变核小体的空间构象和稳定性,决定基因转录的激活或沉默,DNA的修复,染色体的异染色化等。在组蛋白替换过程中,组蛋白变体是通过相应的染色质重构复合物组装入核小体,不同的变体有着不同的组装途径。对组蛋白变体的研究是近年来表观遗传学新的研究热点,也是对“组蛋白密码”的新的诠释。并且,组蛋白替换揭示了DNA-组蛋白相互作用变化的一种新的机制。

     

斑马鱼食源性肠炎模型及其免疫细胞成像分析方法的建立

为了研究豆粕替代鱼粉对鱼类肠黏膜免疫的影响和建立缓解肠炎药物的筛选及功能性饲料添加剂的平台, 研究采用固有免疫或适应性免疫细胞荧光标记的斑马鱼品系, 通过50%的豆粕添加量替代鱼粉作为蛋白源, 共设计了两组饲料, 分别在幼鱼固有免疫或适应性免疫的发育阶段中饲喂荧光标记的斑马鱼, 构建了斑马鱼豆粕诱导的肠炎模型, 对构建的食源性肠炎模型进行了病理、免疫细胞及分子水平的探索。结果表明, 在固有免疫方面, 斑马鱼通过增加中后肠的中性粒细胞和巨噬细胞的招募、诱导巨噬细胞形态发生抗炎/促炎状态的转换(如形成免疫突触、抗炎/促炎细胞因子等), 来应对食源性急性肠炎; 在适应性免疫阶段, 豆粕饲料促进斑马鱼中后肠淋巴细胞的聚集, 包括未成熟的淋巴细胞以及成熟的T淋巴细胞, 并且也可发生抗炎/促炎状态转换。从肠道组织病理来说, 豆粕替代鱼粉蛋白源会造成肠黏膜损伤, 结合切片HE染色显示的肠道物理屏障受到破坏的病理, 目前qPCR结果可推测肠道细胞凋亡增加, 肠上皮层紧密连接变弱并出现代偿性的细胞增生, 同时促炎因子表达增加, 免疫细胞聚集肠道, 暗示免疫屏障也受损。值得一提的是, 斑马鱼幼鱼的适应性免疫发育阶段, 即可发生类似成鱼的肠黏膜免疫调控来应对食源性肠炎, 例如通过提高调节性免疫细胞转录因子(foxp3)及效应因子(il-10、tgf-beta)来提高肠黏膜的免疫耐受。因此, 研究从模式生物的角度, 提供了一种快速、可视化的水产动物的食源性肠炎模型及相关功能饲料添加剂的在体研发平台。     

基于微单体型分子标记的草鱼亲子鉴定方法

研究选择一种新型分子标记——微单体型用于亲子鉴定, 构建了高效的标记筛选和亲子鉴定流程, 并以草鱼(Ctenopharyngodon idellus) 为例评估了该亲子鉴定方法的效果。结果表明, 利用基因组重测序数据能够准确完成微单体型标记的分型, 效果和适应性明显优于传统的基于群体遗传学推断的分型; 通过信息熵的大小能够高效筛选微单体型标记组合, 3个和5个微单体型标记的亲子鉴定结果与微卫星序列(SSR)鉴定结果的一致性分别达到97.08%和99.42%。研究表明使用微单体型分子标记可以快速而准确地完成鱼类的亲子鉴定工作。