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1.
体内外精原干细胞介导大群生产转基因鸡   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究以重组的绿色荧光蛋白基因为标记,采用公鸡睾丸内转染精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)和体外转染SSCs再移植的方法,探索家禽转基因新方法.同时比较了公鸡接受不同剂量外源基因的转基因效率.结果显示:(i)接受外源基因剂量分别为50,100,150和200μg/mL时,48h后睾丸细胞显示绿色荧光的比率分别为4.0%,8.7%,10.2%和13.6%,差异显著(P〈0.05).睾丸内注射外源基因第25天后,随着时间的增长,精子表达绿色荧光的百分率逐渐提高,到第70天后表达率达到高峰,且趋于稳定,4个剂量组分别为12.7%,12.8%,15.9%和19.1%.差异显著(P〈0.05);(ii)第70天的睾丸冰冻切片观察,曲精细管周边均有荧光表达;(iii)F1代中,56.2%(254/452)的胚盘表达绿色荧光.活鸡血样PCR检测56.5%(13/23)为阳性,Southern blot检测证明外源基因已整合到鸡基因组;F2代中,53.2%(275/517)的胚盘表达绿色荧光.活鸡血样PCR检测52.9%(9/17)为阳性;(iv)F,代和F2代鸡心、肝、肾和肌肉等组织冰冻切片观察和PCR检测,绿色荧光阳性率在50.0%~66.7%之间;(v)体外SSCs转染外源基因后移植,可在受体公鸡睾丸中生长发育,正常产生精子.后代中,12.5%(8/64)的胚盘表达绿色荧光,活鸡血样PCR检测11.1%(2/18)为阳性.结果证明精原干细胞介导转基因是一种简单、高效、可大群体生产转基因鸡的有效途径.  相似文献   
2.
利用微卫星技术分析中国部分地方鸡种的遗传结构   总被引:43,自引:2,他引:41  
利用7个微卫星标记对鹿苑鸡、固始鸡、藏鸡、白耳鸡、仙居鸡、茶花鸡、大骨鸡、北京油鸡、狼山鸡、河南斗鸡、泰和乌骨鸡和萧山鸡等12个中国地方鸡种的等位基因频率、基因杂合度、平均基因杂合度、多态信息含量以及群体间的亲缘关系进行分析。研究结果表明,12个地方鸡种在7个微卫星座位上的基因频率存在一定的差异;鹿苑鸡的平均基因杂合度最高,为0.5929;茶花鸡的平均遗传杂合度最低,为0.3514。平均多态信息含量也出现了类似的结果,说明鹿苑鸡的遗传多样性最丰富。模糊聚类分析结果表明,12个地方鸡种间,泰和乌骨鸡与河南斗鸡的亲缘关系相对较近,而固始鸡与其他11个地方鸡种的亲缘关系相对较远。12个地方鸡种可以聚为3类:泰和乌骨鸡、河南斗鸡、狼山鸡、大骨鸡、萧山鸡、北京油鸡、鹿苑鸡聚为第1个类群;茶花鸡、藏鸡、仙居鸡、白耳鸡聚为第2类群;固始鸡为第3类群。  相似文献   
3.
红色原鸡和中国家鸡遗传多样性及亲缘关系   总被引:1,自引:0,他引:1  
对红色原鸡(Gallus gallus)和中国家鸡(Gallus domesticus)之间的遗传多样性和亲缘关系进行系统分析,可以为中国家鸡的起源进化、种质资源保护以及科学开发利用等研究提供理论依据,但迄今尚未见用微卫星标记进行分析比较的公开报道.本研究利用29对微卫星引物对红色原鸡Gallus gallus spadiceus亚种和Gallus gallus gallus亚种以及14个中国家鸡品种的568只个体进行扫描,共检测到286个等位基因,平均值为9.86±6.36;所有群体的期望杂合度为0.6708±0.0251,皖南三黄鸡的期望杂合度最高(0.6442),固始鸡的最低(0.4532).单个位点偏离Hardy-Weinberg平衡的群体数从0-7不等.整个群体平均遗传分化为17.9%(P〈0.001),约有16.7%的遗传变异源自群体间的差异,所有的位点都极显著地贡献于这一结果(P〈0.001);杂合子缺失的水平很高,为0.015(P〈0.01),有8个位点显示显著的杂合子缺失.群体间的Reynolds’遗传距离从0.036(萧山鸡-鹿苑鸡)~0.371(泰国红色原鸡-河南斗鸡)不等,而Nm值变异范围为从0.583(泰国红色原鸡-河南斗鸡)~5.833(萧山鸡鹿苑鸡).NJ系统发生树中,鹿苑鸡、萧山鸡、北京油鸡、河南斗鸡、淮南麻黄鸡、狼山鸡等重体型的鸡种首先形成一大类;鹿苑鸡与萧山鸡以及茶花鸡与藏鸡有着较近的遗传关系;茶花鸡和藏鸡与两个红色原鸡亚种亲缘关系较近,中国红色原鸡Gallus gallus spadiceus亚种与所有中国家鸡品种的亲缘关系比泰国红色原鸡Gallus gallus gallus亚种要近.结果表明:29个微卫星位点均具有较高的多态性,红色原鸡和中国家鸡群体间存在着极显著的遗传分化;中国家鸡和红色原鸡两个亚种的亲缘关系从近到远的排序是:进化型品种-原始型品种(茶花鸡与藏鸡)-中国红色原鸡亚种(Gallus gallus spadiceus)-  相似文献   
4.
中国红原鸡和泰国红原鸡遗传多样性分析   总被引:9,自引:0,他引:9  
利用29个微卫星DNA标记对来自中国的红原鸡Gallus gallus spadiceus亚种和来自泰国的红原鸡Gallus gallus gallus亚种进行遗传多样性分析, 评估亚种内的遗传变异和亚种间的遗传分化, 结果表明: 共检测到168个等位基因, 每个位点的等位基因数从2到13不等, 所有位点平均的期望杂合度和PIC值分别为0.5780和0.53。中国和泰国红原鸡29个微卫星位点平均有效等位基因数分别为3.79和4.79, 平均基因杂合度为0.5379和0.6385, 两个红原鸡亚种均表现出较高的群体杂合度和丰富的遗传多样性。群体分化系数为19.4%(P<0.01), 两个红原鸡亚种间的Reynolds’遗传距离和Nm值分别为0.157和1.040。由此可见, Gallus gallus spadiceus亚种和Gallus gallus gallus亚种群体具有不同的群体遗传结构, 群体之间存在明显的遗传分化, 并不能将其认定为是同一亚种, 这也为中国家鸡具有独立的起源提供了一定的佐证。  相似文献   
5.
鸡胚不同发育时期原始生殖细胞的分离方法   总被引:11,自引:0,他引:11  
采用Ficoll密度梯度离心法和EDTA-胰酶酶解法两种方法,分别提取第14期(孵化53h)血液、第19期(孵化72h)和第28期(孵化132h)生殖腺中的PGCs,以比较两种分离方法对3个发育时期的鸡胚原始生殖细胞在相同体外培养条件下存活时间的差异。结果发现,两种分离方法均能分离到一定数量的原始生殖细胞,但是酶解法分离到的原始生殖细胞的相对数量较Ficoll密度梯度离心法的多,存活时间较长,是一种适宜的分离方法;对鸡胚发育第14、19、28期3个时期提取的原始生殖细胞进行体外培养,存活时间分别为:72h、88h和80h,三者之间差异显著。结果表明:在鸡胚孵化的第19期,因原始生殖细胞大量聚集在肢体后端的生殖嵴原基处,因而较容易收集,体外培养较为适宜,具有较强的可操作性[动物学报49(6):835~842,2003]。  相似文献   
6.
目的探索鸡EPGCs单细胞克隆建立细胞系的可能性,并对其生物学特性进行鉴定。方法采取19期和28期的鸡EPGCs,体外培养传至第4代的细胞聚合体,用胰酶消化将细胞分散成单细胞悬液,将单个细胞接种至96孔板,每个孔内接种1个细胞,生长出的细胞集落用胶原酶消化传代,细胞化学法和免疫荧光法检测多向分化细胞的表面标志物;常规染色体核型检查。结果接种的288个单细胞中有9个扩增,其中7个传至第2代,2个传至第4代,克隆形成率为3.1%。扩增出的2~4代单细胞克隆能稳定增殖不分化,具有正常二倍性染色体核型、碱性磷酸酶阳性、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-1等特征性细胞表面标志物呈阳性;离体情况下具有形成类胚体和类上皮样细胞的能力。结论建立鸡EPGCs单细胞克隆细胞系是可行的,其生物学特性稳定。  相似文献   
7.
"动物遗传原理与育种方法"作为农业硕士专业学位(畜牧领域)一门主干课程,也是一门理论与实践相结合的课程。传统的举例教学方式不仅难以满足现代专业学位教学要求,而且也难以让学生系统掌握遗传育种理论与实践知识。本文在对开放式全程案例教学的内涵与特点进行分析的基础上,结合"动物遗传原理与育种方法"案例的教学实践,阐述了全程案例教学设计中典型案例选择、案例的课堂讲解和组织讨论、案例的课堂总结以及课程教学评价等设计技巧与注意事项,为农学专业学位研究生培养过程中案例教学法的应用和推广提供一定的参考。  相似文献   
8.
一例12号染色体臂间倒位的细胞遗传学研究   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
徐琪  陈国宏  刘莉  张学余  李碧春  吴信生 《遗传》2003,25(5):521-525
小麦主要经济性状大多属数量性状,是受 微效多基因控制的。为了探索小麦常用亲本配 制组合时各主要经济性状的遗传变异规律,于 1980年选用了江苏、浙江两省普遍采用的UP 301、泰山1号、908、早白、白壳早、短秆早6 个品种作为杂交亲本,研究并分析了主要经济 性状的遗传参数,为有效地选配亲本,提高育种 成效,提供一些理论依据。  相似文献   
9.
鹌鹑的核型及G带分析   总被引:7,自引:0,他引:7  
分别采用外周血淋巴细胞培养法和胰酶处理法,对鹌鹑染色体的核型和G带进行了研究。结果表明,鹌鹑染色体数目为2n=78,有10对大染色体(包括Z、W),29对小染色体。染色体形态分别为:NO.1染色体为sm型,NO.2、Z染色体为m型,其余染色体均为t型,这与前人研究结果存在一定差异。G带分析结果显示,鹌鹑的前9对大染色体及Z、W染色体G带可分为27个区,134带。  相似文献   
10.
为探讨国家级保护鸭种群的遗传多样性和遗传分化关系,利用17个微卫星标记,对我国6个国家级保护鸭品种资源的遗传多样性进行了分析,统计了平均遗传杂合度(H)、多态信息含量(PIC)、基因多样度(FST)、平均遗传分化系数(GST)和遗传距离等。结果表明,各鸭品种的杂合度较高,除两个群体表现为显著的杂合子缺失外,其他群体均处于Hard-Weinberg平衡状态。6个鸭种群间平均FST值为17.0%,平均遗传分化系数GST为14.7%,各品种平均杂合度为0.706~0.604,平均多态信息含量(PIC)为0.561~0.663。本研究说明我国6个国家级保护鸭品种资源各品种内和品种间的遗传变异大,遗传多样性丰富。  相似文献   
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