一个马铃薯种质资源圃致病疫霉群体的分析

由致病疫霉Phytophthora infestans引起的晚疫病是马铃薯生产上最严重的病害之一,认识其群体结构特征,可为晚疫病防控策略的制定以及抗病品种的合理布局提供指导。对2009年采自宁夏一个种植有93个品种(品系)的马铃薯种质资源圃的致病疫霉进行了交配型、致病型和线粒体DNA单倍型分析,结果表明,116个致病疫霉菌株中存在A1、A2和自育型3种交配型,发生频率分别为24.1%、57.8%和18.1%,A2交配型为优势类型;对其中43个菌株的致病型进行测试,检测到两种致病类型:1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11和3.4.10,发生频率分别为95.3%和4.7%,可克服所有11个抗病基因的1.2.3.4.5.6.7.8.9.10.11类型占绝对优势;对62个菌株的线粒体DNA单倍型进行分析,检测到Ia和IIa两种类型,发生频率分别为74.2%和25.8%。综合表型和基因型数据分析发现,该马铃薯种质资源圃中致病疫霉群体致病型单一,但致病型毒力因子高度复合;线粒体DNA分析表明,该马铃薯种质资源圃引入了遗传背景较为复杂的致病疫霉"新"群体。     

植物附生微生物与叶部病害生物防治研究进展

人们早已发现绿色植物叶面(phylloplane)栖居有大量微生物。在一百多年前微生物学家就从植物叶面分离到许多真菌和细菌。1910年Potter首先证实,叶面附生微生物在干扰真菌引起的叶部病害中起着重要作用。至本世纪上半叶,叶面微生物仍为人们所忽视。相反,在这期间土壤微生物得到很大发展,在土传植物病原菌生物防治研究方法上取得了很大进展,为后来的植物叶部病害生物防     

非致病微生物在植物—病原菌协同进化中的作用

非致病微生物在植物－病原菌协同进化中的作用单卫星（西北农业大学植保系,陕西杨陵７１２１００）ＴｈｅＲｏｌｅｏｆＮｏｎ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｉｎＰｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅｎＣｏｅｖｏｌｕｔｉｏｎ￥ＳｈａｎＷｅｉｘｉｎｇ（Ｄｅｐａｒｔ－ｍｅｎｔｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ,ＮｏｒｔｈｗｅｓｔｅｒｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｙａｎｇｌｉｎｇ,Ｓｈａａｎｘｉ７１２１００）．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙ,１９９３,１２（６）,５４－５９．Ｉｎｖｉｅｗｏｆｐｒｅｓｅｎｔｐｒｏｂｌｅｍｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｃｏｎｔｒｏｌ,ｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓｉｎｂｉｏｌｏｇ－ｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌｏｆｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｓａｎｄｐｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ,ｔｈｅａｕｔｈｏｒｐｏｉｎｔｅｄｏｕｔｔｈｅｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｏｆｎｏｎ－ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓｉｎｈａｂｉｔｉｎｇｐｌａｎｔｓｕｒｆａｃｅｓｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔ－ｐａｔｈｏｇｅ     

大豆疫霉菌一个DNA指纹分析重复序列探针的鉴定

【目的】大豆疫霉菌指纹分析的建立和黑龙江与新疆大豆疫霉菌群体的群体遗传分析。【方法】利用生物信息学方法寻找大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)的中度重复序列,并对黑龙江和新疆大豆疫霉菌进行DNA指纹分析。【结果】分析得到一个中度重复序列,定名为PS1227。Southern blot分析表明PS1227在大豆疫霉菌基因组中约有34条可辨的介于1.5-23kb之间的杂交条带,其中21个杂交条带在49个供试菌系中表现多态性。单游动孢子分析表明PS1227指纹特征在病菌无性生殖阶段表现稳定。利用PS1227标记,本实验发现采自黑龙江HP4002、SY6和GJ0105菌系分别与新疆的DW303、71228和71222菌系具有完全相同的指纹特征。【结论】获得一个可用于大豆疫霉菌流行学和群体生物学研究的指纹分析序列PS1227,在分子水平证实了新疆大豆疫霉菌可能由黑龙江传入。     

拟南芥与大豆疫霉菌的非寄主互作及一个感病突变体的遗传分析

非寄主抗病性是一种普遍的自然现象, 该文通过建立拟南芥-大豆疫霉菌(Arabidopsis thaliana-Phytophthora sojae)非寄主互作系统, 筛选对大豆疫霉菌感病的拟南芥突变体, 为研究植物对卵菌的非寄主抗病性遗传机制奠定基础。以大豆疫霉菌游动孢子接种拟南芥T-DNA插入突变体离体叶片, 从代表12 000个独立转化株系的40 000株T₃代T-DNA插入拟南芥突变体中获得一系列对大豆疫霉菌感病的突变体。其中突变体581-51感病性状表现稳定, 离体叶片接菌后3天内出现明显的水渍状病斑, 4–5天后产生大量卵孢子和/或孢子囊。细胞学观察发现有典型的吸器形成。Southern杂交和遗传分析结果表明, 581-51突变体含有4个T-DNA插入事件, 其感病性状可能由隐性单基因控制。     

一种简便的适用于酵母双杂交系统的酵母质粒提取方法

目的:建立一种适用于酵母双杂交系统的简便快捷的酵母质粒提取方法。方法:以酿酒酵母为供试材料,用玻璃珠振荡法破除酵母细胞壁,提取酵母总DNA,最后通过电转化大肠杆菌DH10B获得目的质粒。结果:粗提得到的质粒可直接转化DH10B,作为模板用于PCR分析及酵母双杂交后续的序列分析等,大大降低了工作量。结论:该方法简便快捷,经济实用,降低了成本,提高了效率,可以作为一种实验室酵母质粒提取方法。     

PCR技术在植物病原物和植物抗病研究中的应用

着重结合植物病原物的群体遗传、毒性变异和分子检测,以及植物抗病机制和抗病基因定位等领域,综述了聚合酶链反应技术在植物病理研究中的应用现状和潜力。     

大豆疫霉菌的EMS化学诱变

以甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulfonate,EMS)为诱变剂,通过其对大豆疫霉菌Phytophthora sojae休止孢萌发的影响,确定化学诱变条件。通过收集单卵孢子,建立了包含640个单卵孢子系的突变体库,其中约有50%的诱变菌系在培养性状和菌落形态方面发生了明显变化,菌落形态多样,表现出较紧密或松散,近圆形或不规则;气生菌丝减少,生长速度较慢或快;在卵孢子产量方面,8.13%的菌系有增加,20.41%的菌系减少,27.82%的菌系极少或者没有卵孢子产生,43.64%的菌系卵孢子产量类似野生型。以质膜氢离子泵蛋白基因PsPMA1(plasma membrane H+-ATPase1)为对象,通过TILLING技术,从320个大豆疫霉菌突变体中获得9个突变体,进一步确认了EMS对大豆疫霉菌的诱变效果,并且估算EMS对大豆疫霉菌的诱变频率至多每115kb发生一个核苷酸变异。新构建的突变体库为开展大豆疫霉病菌的功能基因组研究奠定了遗传材料基础。     

拟南芥与大豆疫霉菌的非寄主互作及一个感病突变体的遗传分析

非寄主抗病性是一种普遍的自然现象,该文通过建立拟南芥．大豆疫霉菌（Arabidopsis thaliana—Phytophthora sojae）非寄主互作系统,筛选对大豆疫霉菌感病的拟南芥突变体,为研究植物对卵菌的非寄主抗病性遗传机制奠定基础。以大豆疫霉菌游动孢子接种拟南芥T—DNA插入突变体离体叶片,从代表12000个独立转化株系的40000株T3代T。DNA插入拟南芥突变体中获得一系列对大豆疫霉菌感病的突变体。其中突变体581-51感病性状表现稳定,离体叶片接菌后3天内出现明显的水渍状病斑,4—5天后产生大量卵孢子和／或孢子囊。细胞学观察发现有典型的吸器形成。Southern杂交和遗传分析结果表明,581—51突变体含有4个T-DNA插入事件,其感病性状可能由隐性单基因控制。