抗IFITM1 单克隆抗体的制备及检测

目的：制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-induced transmembrane protein 1, IFITM1)的单克隆抗体,为检测IFITM1 及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法：以结肠癌患者的癌组织为材料,提取总RNA,以RT-PCR扩 增得到IFITM1 cDNA 序列,经ECoRⅠ和HindⅢ双酶切后,克隆入pGEX-4T-3 进行原核表达并纯化得IFITM1-GST;以该融合蛋 白免疫BALB/c 小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌 患者结肠癌组织中的IFITM1。结果：成功构建了IFITM1 原核表达载体,获得了IFITM1-GST 重组蛋白;制备得到了1 株抗 IFITM1 单克隆抗体,腹水ELISA 效价为1:30000,抗体亚类为IgG1,可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患 者结肠癌组织中的IFITM1。结论：获得了1 株可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1 单克隆抗体2F-1,为进 一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。     

抗IFITM1单克隆抗体的制备及检测

目的：制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1（interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1）的单克隆抗体,为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法：以结肠癌患者的癌组织为材料,提取总RNA,以RT—PCR扩增得到IFITM1 cDNA序列,经EcoR 和HindⅢ双酶切后,克隆入pGEX-4T-3进行原核表达并纯化得IFITM1-GST;以该融合蛋白免疫BALB／c小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果：成功构建了1FITM1核表达载体,获得了IFITM1-GST重组蛋白;制备得到了1株抗IFITM1单克隆抗体,腹水ELISA效价为1：30000,抗体亚类为IgG1,可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论：获得了1株可用于ELISA、Westem-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1单克隆抗体2F—1,为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。     

高山松种实性状与生殖适应性

高山松(Pinus densata)是云南松(P. yunnanensis)与油松(P. tabulaeformis)自然杂交产生的二倍体杂种,是植物同倍体杂交物种形成的典型案例。高山松分布于青藏高原东南缘,占据了两个亲本种都不能正常生长的高海拔地带。良好生殖适应性的产生是物种形成的关键,但对高山松在高海拔生境下生殖适应性的变异与杂交起源遗传背景关系的研究尚未见报道。该研究通过对来自该种分布区内6个代表居群样本、13个反映高山松生殖适应性的种实性状的分析,探讨了其生殖性状在居群水平的变异模式,揭示了具有不同遗传组成和起源历史的高山松居群的生殖特性。研究结果表明:6个研究居群在种实性状上存在显著差异;可育种鳞数、总种鳞数、总种子数、可育种鳞率和可育种鳞密度等与纬度呈显著负相关关系;球果结种率与经度和生态梯度值呈显著的正相关关系;胚珠败育率则与经度和生态梯度值呈显著的负相关关系;球果长度也呈现了与经度的显著负相关。高山松球果结种率很高,平均为74%;球果的结种数、种子长和种翅长与云南松、油松及其它松属双维管亚属多数种接近;球果长度、球果总种鳞数接近油松的报道。这些结果表明,高山松在亲本种不能正常生长、繁衍的高原环境下具备正常的生殖能力;其种实特征在居群间分化显著并呈现一定的地理梯度变化。居群间的显著差异反映了其杂种起源特性,与高山松居群的遗传背景有关,也反映了处在异质生态环境中的高山松居群具有各自的生殖生态进化趋向。     

黄芪总黄酮对病毒性心肌炎小鼠心律失常与内质网应激因子的影响

目的：研究黄芪总黄酮（TFA）对病毒性心肌炎小鼠心律失常与内质网应激及缝隙连接蛋白作用,明确TFA抗病毒性心肌炎合并心律失常作用机制。方法：36只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组、病毒性心肌炎组和TFA组（n=12）,病毒性心肌炎组腹腔内无菌注射含0.1 ml/d 10-950 TCID柯萨奇B3病毒（CVB3）,注射3 d制备Balb/c小鼠病毒性心肌炎模型,TFA组给予CVB3同时尾静脉注射0.1 ml TFA （20 mg/L）,共7 d。实验结束后心电图检测心律失常发生率后处死小鼠,取心脏行HE染色,观察心肌病理改变,Western blot检测各组小鼠心肌细胞葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、内质网应激信号通路因子激活转灵因子4（ATF4）及缝隙连接蛋白（Cx43）表达。结果：与正常组比较,病毒性心肌炎组GRP78与ATF4的表达显著升高（P<0.01）,Cx43表达明显下降（P<0.01）;与病毒性心肌炎组比较,TFA组小鼠心肌细胞GRP78与内质网应激信号通路因子ATF4表达明显减少（P<0.01）,Cx43表达明显增多（P<0.01）。结论：TFA抗心律失常作用可能与缓解内质网应激及增加Cx43表达有关。     

色季拉山柳兰属观赏植物资源调查及网脉柳兰育苗技术研究

2007-2008年,在西藏色季拉山先后进行了3次柳兰属Chamaenerion观赏植物资源的调查,并于2008年进行了网脉柳兰C.conspersum的育苗试验,调查和试验结果发现:(1)色季拉山有两种观赏价值较高的柳兰属植物,分别是柳兰C.angustifolium、网脉柳兰,而宽叶柳兰C.latifolaum的分...     

基于水凝胶的“自下而上”组织工程技术研究进展

随着微纳生物制造技术和新型生物材料(如新型水凝胶)的发展,基于模块化组装的"自下而上"组织工程技术引起了广泛的关注,在复杂微结构和血管化组织/器官构建方面显示了广阔的发展前景.本文介绍了"自下而上"组织工程技术的基本原理及模块单元的制备和组装方法,综述和讨论了"自下而上"组织工程技术在体外重构三维组织/器官方面取得的最新研究进展,并对其在生物医学领域的发展前景进行了展望.