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斑马鱼二价体制备与多重带显带的方法学探讨 总被引:3,自引:0,他引:3
采用碱性低渗结合高氯仿一步显带技术获得了斑马鱼二价体高分辨多重G带,所出现的带纹丰富,反差明显。采用地高辛为标记的以限制性内切酶AfuⅠ介导的原位切口平移技术使斑马鱼二价体上呈现出类G带的多重带,获得了明暗反差强烈的带纹结果。通过比较多个不同分裂相的多条染色体,发现带纹的分布具明显特征性.并且特征一致,带纹数目基本吻合。首次从方法学上对斑马鱼二价体的制备过程及多重带显带技术进行了分析、探讨和总结,力求将该技术程序化、系统化,使其具有可重复性和可操作性,并对显带的可能机理进行了讨论。 相似文献
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应用PRINS技术定位黄鳝Hox基因的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
Hox基因是近年来发现的支持基因组复制进化理论的最有力的证据。该研究应用引物原位延伸 (PRINS)技术 ,在黄鳝有丝分裂染色体标本上开展Hox基因的定位研究。研究结果表明 ,在黄鳝染色体组中可能存在有 6个Hox基因簇 ,这些基因簇分别位于黄鳝第 1、2、3、6、8和 10号染色体 ,相对着丝粒距离分别为 2 8 2 4± 2 88、4 5 5±1 39、13 89± 2 0 3、74 32± 1.86、38 0 3± 2 .4 1和 5 8 18± 2 0 5。该研究定位黄鳝Hox基因将有助于挖掘黄鳝染色体的来源和进化特征 ,并为基因组复制进化理论提供黄鳝这一特化物种的细胞遗传学证据。 相似文献
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刺鳅X染色体DNA文库的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
刺鳅(Mastacembelus aculeatus)是具有明显X和Y异形性染色体分化的淡水鱼。本实验室通过显微切割(Microdissection)和兼并引物PCR(DOP-PCR)方法,从雌性刺鳅中期染色体分裂相中分离获得X染色体并扩增其DNA,利用T载体和电转化方法,建立了刺鳅X染色体DNA质粒文库。该文库插入片段的平均长度约为500bp,理论上包含X染色体98%以上的序列。当用荧光原位杂交(FISH)来验证文库的专一性时发现,在无竞争性DNA杂交条件下,整个X和Y染色体上都表现出强烈的杂交信号,并且常染色体上也出现一些随机散布信号;当含有竞争性DNA时,常染色体上的信号消失,仅性染色体上异染色质区域保留有较强信号。就此,本文对刺鳅性染色体上的序列类型进行了探讨。 相似文献
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基因组的三维空间组织在调节其功能、维持表观遗传和稳定性方面起着重要作用。虽然基于荧光原位杂交的标记技术或单细胞显微观察等方法对此进行了广泛研究,但是细胞内部的时空动态在很大程度上仍难以捉摸。目前标记和观察活细胞中特定内源基因组位点的方法操作难度大且对生物的侵入性伤害较大。CRISPR的发现彻底改变了基因组工程领域。除了基因编辑方面的应用,近年来,CRISPR/Cas9系统在活细胞中特定内源性DNA序列的可视化方面得到一定的发展。通过比较几种不同的成像技术,主要综述基于CRISPR技术在活细胞体内基因组时空成像的基本原理、发展及影响成像效率的主要因素,为探究开发更加简便易行的基于CRISPR成像技术提供一定的思路。 相似文献
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