绵羊粒细胞集落刺激因子原核表达与提纯及用于颗粒细胞培养的效果

文中旨在研究粒细胞集落刺激因子(Granule cell stimulating factor,GCSF)对绵羊颗粒细胞体外培养过程中细胞增殖和凋亡的影响,明确GCSF对绵羊颗粒细胞生存的调节作用,为今后该蛋白用于羊繁育方面的研究奠定基础。原核克隆表达纯化羊GCSF蛋白,纯化的蛋白用M-NSF60细胞检测生物学活性,将纯化的GCSF添加到颗粒细胞培养基中作为试验组,以培养基中未添加GCSF的细胞为对照,利用Alarmarblue检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果表明,羊GCSF可以原核表达并纯化,并且具有生物学活性。在24 h和48 h时,在0.06–600 ng/mL的范围内随着加入GCSF的终浓度增加,细胞活力升高。试验组颗粒细胞体外培养24 h后,与阴性对照相比,细胞周期的分布显著改变,S期细胞比例显著减少(P0.05),G2/M期细胞比例显著增多(P0.05)。试验组凋亡率和对照组相比,48 h检测时凋亡率显著降低(P0.05)。综上表明,GCSF在体外培养的绵羊颗粒细胞中,可调控绵羊颗粒细胞周期,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。     

卡拉胶对麦汁澄清的研究

卡拉胶能够有效地降低麦汁中的冷浊物沉淀,目前国内卡拉胶品种较多,但是质量不一,作用效果也不同。从卡拉胶对麦汁澄清效果出发,研究了不同来源的卡拉胶作用时间,添加量,Ｃａ＾２＋等因素对麦汁质量的影响。麦汁经卡拉胶在适当条件下处理以后进行发酵,对酵母几乎没有影响。     

不同生长阶段家蚕1-脱氧野尻霉素富集与食桑量的相关性研究

为了研究家蚕富集1-脱氧野尻霉素(DNJ)的机制,采用柱前衍生化高效液相色谱法分析不同生长阶段家蚕及其代谢产物和所食桑叶中DNJ的含量,研究家蚕幼虫体1-脱氧野尻霉素富集与食桑量的相关性。结果显示不同生长期家蚕及其副产物中DNJ的累积量有较大差异,且呈一定规律性变化,先上升后下降,于四龄时最高。家蚕幼虫期蚕体及其副产物中DNJ总累积量与其在该阶段所食桑叶中DNJ总量相当,且家蚕的任一成长发育阶段(蚁蚕和熟蚕不吃桑叶除外),其蚕体DNJ含量均大大高于桑叶中的DNJ含量,表明家蚕具有累积或富集DNJ的机能,本研究结果为进一步研究家蚕富集DNJ的机制提供了理论依据。     

孕早期胎心率意义的探讨

目的:探讨监测孕早期胎心率(fetal heartrate,FHR)对胎儿生存预后的预测价值,尤其对已有流产征兆或有重复、习惯性流产史患者的胎儿不良生存结局的预测价值.方法:收集自2003到2007年至我院门诊要求生育的正常早孕孕妇以及有先兆流产征象或重复、习惯性流产病史、孕周在5-9+6周要求生育的孕妇415例.采用超声测定孕囊(gestational sac,GS)平均直径、胚胎头臀径(crown-rump length,CRL)、FHR.如果胎儿存活,则在孕中期11-14周时测量胎儿颈项皮肤层厚度(nuchal translucency,NT).采用X检验分析孕早期胎心率与胎儿存活率及NT值的关系.结果:胎心率低时,胎儿存活率降低(P<0.05),NT值异常升高发生率增多(P<0.05).结论:孕早期胎心率测定对预测胎儿生存预后有一定的临床意义,并且胎心率减慢还与孕中期NT值异常升高相关,因此,孕早期胎心率可作为筛查和预测中晚期妊娠胎儿畸形的重点监测对象.     

瘤胃源粪臭素降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

【目的】旨在从绵羊瘤胃中分离粪臭素降解菌,并评估其粪臭素降解能力和生长性能,以期开发适用于反刍动物降臭的直接饲喂微生物。【方法】以绵羊瘤胃液为分离来源,使用含有粪臭素的MSM培养基进行富集和分离,通过细菌菌落形态观察进行初步分类;应用16S rRNA基因扩增、测序及系统发育分析进行物种鉴定;绘制菌株生长曲线,通过HPLC技术测定粪臭素降解曲线。【结果】从绵羊瘤胃液中分离出25株粪臭素降解菌,经菌落形态鉴定选出11株代表菌株进行后续研究。物种鉴定结果显示,MSML2和MSML6属于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,MSML4、MSML5、MSML7和MSML10属于阿氏普里斯特氏菌（Priestia aryabhattai）,MSML3和MSML11属于污染伯克霍尔德氏菌（Burkholderia contaminans）,MSML1、MSML8和MSML9属于成都假单胞菌（Pseudomonas chengduensis）。其中,MSML5生长速度最快,在约12 h后进入稳定期,稳定期菌体浓度最高;MSML3和MSML8在前16 h生长缓慢,32 h后进入稳定期。在粪...     

3个山羊群体中4个微卫星DNA多态性及其与杂种优势的关系

利用4个微卫星标记（OarFCB11,OarAE101,McM218,McM38）对波尔山羊、太行山羊和河北奶山羊的等位基因频率、群体多态信息含量、有效等位基因数、杂合度和遗传距离进行了遗传检测,并测定了波尔山羊与河北奶山羊及太行山羊的杂交效果。结果表明：4个微卫星标记在波尔山羊、太行山羊和河北奶山羊3个品种中存在多态性,可以用于山羊遗传多样性的评估;从不同品种来看,太行山羊的遗传变异程度最大,而波尔山羊的遗传变异程度相对较小;波尔山羊与河北奶山羊的遗传距离大于与太行山羊,波尔山羊与河北奶山羊的杂种优势高于与太行山羊,与实际杂种优势测定结果相符。 Abstract: Gene frequency, polymorphism information contents, number of effective alleles, heterozygosity and genetic distances were studied in Boer goat, Taihang goat and Hebei dairy goat using four microsatellite markers（OarFCB11,OarAE101,McM218,McM38）. The crossing effects on Hebei dairy goat and Taihang goat with Boer goat were tested. The results indicated that there are genetic polymorphisms at four microsatellite markers in three goat breeds. Four microsatellite markers can be used for genetic diversity evaluation in goat breeds. The genetic variability of Taihang goat is the highest, and Boer goat is the lowest in three goat breeds. Genetic distances between Boer goat and Hebei dairy goat is bigger than that between Boer goat and Taihang goat. The heterosis between Boer goat and Hebei dairy goat is higher than that between Boer goat and Taihang goat. It accords with testing results on actual heterosis.     

绝经后IUD取器前超声测定环距的意义

目的探讨绝经后妇女IUD取器前超声测定环距是否与取器难度有关。方法对放置IUD绝经后妇女取器前行超声测定环距,分环距>1.5cm,1.5-1.0cm,≤1.0cm三组,比较手术难度,并对绝经≤12月IUD组与对照组的围绝经期综合症、老年性阴道炎、阴道炎、子宫蒌缩情况进行分析。结果环距≤1cm组手术难度显著增加(P<0.05)。绝经≤12个月IUD组与对照组在围绝经综合症、老年性阴道炎、阴道炎、子宫萎缩发生率方面均无显著差异,(P>0.05)。结论绝经后妇女取器前超声测定环距对估计手术难度有一定意义,尤其当环距≤1cm,手术困难明显增加。绝经≤12月IUD对健康没有直接影响。