转基因动物技术研究综述

较全面介绍了转基因动物的制作方法如显微注射法、精子载体法、YAC载体法、核移植法等,并对研究中出现的制作效率低、外源基因表达不理想、对宿主和环境产生不利影响等问题作了探讨。     

产HBsAg CHO细胞无血清培养研究

在分析CHO C2 8细胞对培养基中氨基酸利用的基础上 ,对DMEM培养基进行初步优化。再采用统计学正交分析方法 ,在初步优化的DMEM培养基中添加胰岛素、转铁蛋白等促细胞生长因子 ,建立了一种适于CHO C2 8细胞持续用无血清培养基———CHO C2 8 SFM。经转瓶维持实验 ,在CHO C2 8 SFM中维持培养的细胞 ,其乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)表达水平达到用含 5 %FBS培养液维持的 70 %～ 80 % ,但纯化收率提高 1 0 %以上 ,可用于大规模生产。     

富含GC的DNA片段在哺乳动物细胞基因超高表达调控中的重要作用

通过在结构基因或基因启动子的5’和/或3’端加入天然1.006kb或人工合成0.733kb的富含GC的DNA片段(包括内含子),所构建的稳定表达载体在实验室规模实现了20多种蛋白质在哺乳动物细胞中超高表达.该实验提供了证据表明,非编码的富含GC的DNA片段(包括内含子)是一种超级"染色质开放元件",在哺乳动物细胞基因表达中起关键作用.实验还进一步表明,哺乳动物细胞的基因表达调控在染色质水平主要与DNA的一级结构,即DNA的GC含量有关.     

蒺藜苜蓿LBD转录因子基因家族全基因组分析

LBD是植物中所特有的转录因子基因家族,在调控植物侧生组织发育、营养代谢以及响应逆境胁迫等方面具有重要作用。该研究利用生物信息学手段,从全基因组水平筛选和鉴定了蒺藜苜蓿LBD基因家族,并对基因结构、系统进化、进化压力、保守域、染色体定位以及基因表达模式等进行了分析。研究结果共鉴定出2类5亚类共计56个蒺藜苜蓿LBD家族基因,在8条染色体上均有分布,但分布不均匀。该家族成员外显子数目都不超过2个,结构简单,基因间在进化时存在负向选择作用。基因表达模式分析发现,该家族成员的表达具有一定的时空特异性,并受干旱和氮素调控。该研究结果对蒺藜苜蓿LBD基因功能研究及进化分析具有重要的意义。