模型实验教学在组织学与胚胎学实验教学中的尝试

组织学与胚胎学是重要的医学基础课,属于形态学科。目前,组织学与胚胎学实验教学多采用数码互动实验教学,切片观察为主要手段,而切片观察主要是观察组织的平面结构,欠缺立体结构的观察。模型实验教学是以组织学与胚胎学的形态为中心组织学生制作立体模型,启发学生思维,充分发挥想象力,培养学生的动手能力和实践能力。     

建构主义学习理论在人体胚胎学教学中的应用

建构主义是一种认知学习理论,它体现的是“学生为主体,教师为指导”的教学思想。本文根据建构主义学习理论的思想,结合人体胚胎学的特点,探讨建构主义学习理论在人体胚胎学的应用。开展建构主义学习理论的教学实践,有利于学习人体胚胎学课程,有利于培养医学生的综合素质。     

显微系统化与大学生科研培训计划中科研思维的培养

显微系统化是指将各种显微镜融合并统一利用,联合操作,所用程序一体化、规范化、统一化和数字化。显微系统化通过系统化管理,在大学生科研培训计划（Student Research Training Program,SRTP）中实施。实行显微系统化,可突破显微镜本身时间和空间上的局限性,能够进一步完善科学、高效的科研培训计划模式,对从感性方面培养大学生理解科研的概念和建立科研思维的能力、提高大学生科研素养具有重要作用。     

外源性VEGF促进大鼠Ⅱ度烫伤创面中晚期愈合

目的探究Ⅱ度烫伤时外源性血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对皮肤愈合及其对表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)迁移、分化的影响方法健康Wistar大鼠随机分为VEGF组、空白对照组、阿西替尼(Axitinib,VEGF抑制剂)组。采用水浴烫伤法制备Ⅱ度烫伤模型,分别以0.2μg/ml VEGF、PBS溶液和10μg/ml阿西替尼处理各组创面,各组均治疗7d,从烫伤至创面愈合分别在第2d、8d、14d及21d测量创面愈合情况,并取创面组织作组织学检测,运用免疫组化技术检测ECSs的分布及数量。结果①创面愈合率:烫伤后21d VEGF组>对照组>阿西替尼组;②愈合速度:烫伤后1-7d空白对照组>阿西替尼组>VEGF组,其后VEGF组愈合速度逐渐加快,第14d开始愈合速度表现为VEGF组>空白对照组>阿西替尼组;③组织学变化:烫伤后8-21d,VEGF组表皮细胞增殖明显,表皮修复和毛囊再生迅速,均早于空白对照组及阿西替尼组。④ECSs阳性细胞率变化:烫伤后第8-14dVEGF组ECSs阳性细胞率明显高于空白对照组和阿西替尼。结论Ⅱ度烫伤时,外源性VEGF在愈合中晚期加快愈合速度使愈合时间明显缩短,并且促进毛囊汗腺的再生使修复后的创面在外观、功能与正常皮肤相近,有助于提高全层皮肤创面的愈合质量。     

氟对小鼠胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌的影响

目的:观察不同剂量氟化钠(NaF)对体外培养的小鼠胰岛β细胞增殖活力和胰岛素分泌的影响。方法:选用小鼠胰岛β细胞株Beta-TC-6作为实验对象,分别以0、0.1、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/LNa F干预24 h、48 h、72 h、96 h观察对β细胞形态学的影响,采用四唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]比色法,检测不同剂量NaF对β细胞增殖活力的影响;用酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定不同剂量NaF对β细胞胰岛素分泌的影响。结果:0.5 mg/L、1.0 mg/L的NaF作用72 h时,可使胰岛β细胞增殖活力和胰岛素分泌较对照组明显增强(P0.05);≥8.0 mg/L时随着NaF剂量的增加和作用时间的延长,胰岛β细胞的增殖活力和胰岛素分泌明显减弱(P0.05)且随着NaF剂量的增加和时间的延长,细胞生长缓慢,数量减少,不易贴壁或融合成片,多边形细胞减少,可见较多椭圆或圆形细胞。结论:NaF对胰岛β细胞的增殖和胰岛素分泌呈剂量效应关系,随着剂量的增大和时间的延长对细胞增殖活力和胰岛素分泌能力的抑制逐渐增强。     

在烫伤条件下VEGF对大鼠皮肤eNOS基因表达的影响

目的:探讨大鼠烫伤愈合过程中VEGF对皮肤组织eNOS基因表达的影响。方法:采用了大鼠深II度烫伤模型,分别以VEGF和阿西替尼(VEGF抑制剂)干预,观察大鼠烫伤后愈合过程的组织学变化,PCR检测创面eNOS基因的表达。结果:肉眼观察VEGF组大鼠创面最早愈合,对照组大鼠愈合速度其次,阿西替尼组创面愈合最晚;HE染色结果显示伤后第2、8、21天VEGF组炎性细胞浸润程度、新生毛细血管数量均高于对照组和阿西替尼组,PCR结果显示烫伤后第2、8天VEGF组的eNOS基因的表达明显上调,且同时间点与对照组比较有统计学意义(P0.05)。结论:VEGF可诱导烫伤创面eNOS基因的表达,增加血管生成重要因子NO的生成,有利于创面愈合。     

一种获取精确胚胎天数鼠脑皮质神经细胞原代培养方法

目的:探讨获取精确胚胎天数鼠脑皮质神经细胞原代培养方法.方法:首先将性成熟雌雄SD大鼠1∶1合笼于代谢饲养盒内,次日观察有无阴栓(同时做阴道涂片),若有记为E0.取E17孕鼠断颈处死,无菌状态下取出子宫,剥离羊膜与胚外膜,取得胚胎.胚胎断头,在解剖显微镜下用尖镊沿双眼、小脑和脑干腹侧切取大脑皮质,用0.125％胰酶进行温和消化,采用MEM加10％胎牛血清、10％马血清和1％ L-Glutamine混合培养基,用0.73 MPoly-L-Omithine Hydrobromide处理的培养板入37℃,10％CO2孵箱内培养.结果:雌鼠一次可排出阴栓3-5个不等,阴栓为奶黄色、锥体形、质韧.同时做阴道涂片可见活动精子;获取得胚胎脑皮质细胞呈贴壁生长,其胞体饱满,折光性好,突起明显,与周围细胞形成网络连接.结论:用阴栓并精子涂片判断胚胎胎龄简便而准确;E17胚胎适宜体外培养获得脑皮质细胞;组合培养基加处理过的培养板和10％ CO2孵箱浓度的新方法获得了状态良好的脑皮质神经细胞.     

培养破骨细胞扫描电镜样本制备方法的探讨

目的：探讨体外培养的破骨细胞在自制牛股骨磨片和细胞爬片中扫描电镜制备方法。方法：实验分两组,一组采用新鲜牛股骨制备成5mm×5mm大小的薄片,作为共培养之需;另一组,采用盖玻片制成5mm×5mm的细胞爬片。分别以5×104种植于骨磨片和爬片,培养5天后进行扫描电镜的制备并观察。结果：破骨细胞在牛骨磨片表面生长良好,充分伸展,有细胞突起伸入到实验组材料深部,并形成骨陷窝;在爬片表面生长的破骨细胞,细胞生长良好,粘附性强,细胞之间相互连接较紧密,细胞表面突起明显。结论：牛股骨磨片与破骨细胞在体外相容良好,材料有利于破骨细胞的生长及细胞功能的表达,而破骨细胞爬片更适于细胞外形的观察。将两种方法结合既能反映破骨细胞的形态结构又能展示其破骨功能。     

氟骨症患者血清骨钙素与糖代谢关系的研究

目的:探讨氟骨症患者血清中骨钙素(Osteocalcin,OCN)与糖代谢之间的关系。方法:在新疆阿克苏地区饮水型氟中毒病区沙雅县等,通过WS192-2008《地方性氟骨症诊断标准》确诊的患者60例作为氟骨症组;选取该地区经相同诊断方法诊断为无氟中毒骨病变的,且经X线拍片排除佝偻病等相关骨骼疾病的健康60例作为对照组。采集血清酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法与化学法等检测总骨钙素(Total osteocalcin t OCN)、未羧化骨钙素(Uncarboxylated osteocalcin,uc OCN)、空腹胰岛素(Fasting insulin,FINS)、空腹血糖(Fasting blood glucose,GLU)及糖化血清蛋(Glycated serum protein,GSP)水平,计算胰岛素抵抗指数(Insulin resistance index,HOMA-IR)。SPSS16.0软件进行数据统计,Pearson法分析氟骨症OCN与糖代谢指标之间的相关性。结果:与对照组比较,氟骨症组uc OC、FINS、GSP水平显著升高(P0.05)。氟骨症组OCN、HOMA-IR较对照升高但无统计学差异(P0.05)。氟骨症组GLU水平与对照组相比降低但无统计学差异(P0.05)。相关回归分析显示氟骨症组uc OC与FINS呈正相关(r=0.543,P0.05),与GLU、HOMA-IR呈负相关性(r=-0.902,r=-0.530,P0.05),与OCN、GSP无相关性(P0.05)。结论:氟骨症患者血清未羧化骨钙素显著升高,影响胰岛素分泌与抵抗,与糖代谢紊乱有一定相关性。     

人结肠切片三种特殊染色的比较

目的比较人结肠组织切片阿利辛蓝AB染色(Alcian Blue)、过碘酸雪夫氏PAS染色(Periodic Acid Schiff)及洋红三种染色方法及镜下特点。方法取人结肠,Carnoy氏固定液固定,对结肠组织进行阿利辛蓝AB染色、PAS染色及洋红染色,光学显微镜下观察染色效果。结果三种染色都能清晰显示结肠组织的结构,尤其对结肠的粘膜层进行了观察。阿利辛蓝染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为红色,杯状细胞中的黏液染为蓝紫色;洋红染色使结肠上皮吸收细胞的细胞核染为蓝紫色,杯状细胞中的黏液染为红色。结论阿利辛蓝和洋红染色均能清楚显示杯状细胞中的黏液,且染色后的细胞质和细胞核成为互补色,结构清晰,对比明显。