革兰氏阴性菌中β-内酰胺酶诱导表达调控机制研究进展

β-内酰胺类抗生素是应用最广的一类抗菌药物。β-内酰胺酶能将β-内酰胺类抗生素水解,其诱导表达是革兰氏阴性菌对该类抗生素产生耐药性的最主要原因。文中重点综述了革兰氏阴性菌中β-内酰胺酶诱导表达的两种调控机制。在经典的ampR-ampC调控系统中,β-内酰胺酶的诱导表达与肽聚糖循环密切相关,并且LysR型转录因子AmpR发挥核心的调控作用。近年来发现β-内酰胺类抗生素能激活双组分系统,从而诱导β-内酰胺酶的表达。最后,讨论了革兰氏阴性菌中β-内酰胺类耐药今后的研究方向。     

基于人生规划的小班研讨——以“微生物学”课程为例

以教师讲解为主的传统课堂教学模式已不能满足新时代人才培养的要求。需寻找新的课堂教学方法,充分调动每一位学生的学习积极性,提高学生的学习效率和满足度。本课程采用"大班授课小班研讨"的教学方法,依据学生的人生规划分班研讨,根据教学内容等四项原则设置研讨主题,引导学生明确奋斗目标,鼓励学生真正地主动学习,培养学生的独立思考能力和创新思维,有效地提高了学生对"微生物学"课程的热爱度和知识点的掌握度。本文可为"大班授课小班研讨"教学模式在本科教学过程中的实践提供参考。     

细菌吸附及转运芳香族化合物的研究进展

芳香族化合物是一类具有苯环结构的有机物,它们结构稳定,不易分解,并可通过食物链进行生物富集和生物放大,对生态环境及人类健康造成极大危害。细菌具有超强的分解代谢能力,能降解多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)等多种难降解芳香族污染物。吸附和转运是细菌进行芳香族化合物细胞内代谢的前提。虽然芳香族化合物的细菌降解已取得较为显著的研究进展,但吸附和转运机理仍不甚清楚。本文讨论了细菌对芳香族化合物的吸附有积极作用的细胞表面疏水性、生物被膜形成和细菌趋化性等影响因素,总结了FadL家族、TonB依赖性受体蛋白、OmpW家族等外膜转运系统和主要协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily, MFS)转运体、ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运蛋白等内膜转运系统对该类化合物跨膜运输作用,并对跨膜转运机制进行了讨论和阐述,旨在为芳香族污染物的防控和治理提供一定理论参考。     

D-氨基酸氧化酶在不同毕赤酵母宿主菌中的表达比较

D-氨基酸氧化酶（DAAO）在转化头孢菌素C生产7-ACA和转化DL-氨基酸制备α-酮酸和L-氨基酸上起着重要的作用。采用DNA操作技术,将来源于三角酵母的DAAO基因连接至表达载体pPIC35K上,再将表达质粒pPIC35KDAAO分别整合P. pastoris的宿主细胞KM71和GS115,经筛选获得阳性重组菌PDK13（Mut^S）和PD27（Mut⁺）。重点对两种突变菌的表达条件进行了比较。结果显示：PDK13（Mut^S）株比PD27（Mut⁺）株消耗甲醇慢、诱导时间长,但对通气量要求低、表达水平高,摇瓶活力分别达到2700和2500 IU/L,14L发酵罐内活力分别达到10140和8463 IU/L。初步探索了DAAO对DL-苯丙氨酸的拆分,结果显示基因工程菌表达的DAAO具有良好的转化DL-苯丙氨酸制备苯丙酮酸和L-苯丙氨酸的能力。     

浙江古田山自然保护区野含笑群落特征研究

野含笑为我国省级珍稀濒危植物。通过对野含笑群落的特征进行分析和研究,结果表明。野含笑群落植物种类丰富,科属组成分散,区系成分复杂。从属的地理成分来看,热带分布的属明显多于温带分布的属。群落的生活型以高位芽植物为主,地面芽植物次之。该群落叶的性质以小型叶、单叶、革质、非全缘为主。群落垂直结构复杂,地上成层明显,可分为乔木层、灌木层和草本层,并有一定数量的层间植物。灌木层一乔木层一草本层物种多样性依次递减。野含笑种群的年龄结构属稳定型。     

L-赖氨酸产生菌A—111的研究

以产生谷氨酸的菌株2305作为出发菌株,经N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(简写为MNNG)和赖氨酸类似物S-(2-氨基乙基)-L-半胱氨酸(AEC)诱变处理,获得高丝氨酸缺陷型和抗AEC的产L-赖氨酸菌株A-111。本文报道该菌株的筛选方法、发酵条件试验、扩大试验结果。     

构建网络实验室 促进微生物学实验教学与管理

探讨网络实验室的构建与微生物教学与管理的实践。实践证明,利用网络实验室,可以提高学生对实验的熟悉程度,弥补实验室已有硬件条件的局限,以仿真实验弥补传统实验教学的不足。同时,网络实验室能拓展学生的实验技能、有效加强毕业环节的过程管理与提高指导毕业实践的时效性,并提高真实实验室的运行效率。利用实验室网站,可以展示学生的实验结果、学习成就,以提升学生的成就感。     

在“微生物学”课堂教学中立德树人

立德树人是高等教育的中心环节,思想政治工作应贯穿教育教学全过程。微生物学是一门与人类日常生活密切相关的学科。本文通过若干具体案例,介绍如何在"微生物学"课堂教学过程中立德树人。在传授微生物学专业知识的同时不断加强思想政治教育,从而提高学生的思想水平、政治觉悟、道德品质、文化素养,让学生成为德才兼备、全面发展的人才。此外,为其他自然科学类课程教学实现立德树人提供借鉴和参考。     

Methanopyrus sp. SNP6源黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶序列分析及在大肠杆菌中的异源表达

Methanopyrus sp.SNP6是一株极端嗜热产甲烷菌,本文将其黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶基因(fads)进行生物信息学分析并在大肠杆菌中加以表达。生物信息学分析发现,FAD合成酶由150个氨基酸残基组成,理论分子量为17 049.93,等电点为8.95;三级结构为同源二聚体,每个单体含有五股平行的(折叠,比典型的核苷酸结合折叠少一个β折叠。扩增fads基因,构建重组表达质粒p ET28b(+)-fads,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。实验结果显示,该FAD合成酶能在大肠杆菌中高效表达,但部分蛋白以包涵体形式存在。本研究对Methanopyrus sp.SNP6源FAD合成酶进行了蛋白质序列和结构的分析,并首次实现了其在大肠杆菌中的稳定高效表达,为后续该酶的研究和开发提供了基础。     

强化表达SAM合成酶促进SAM在毕赤酵母中累积

S 腺苷甲硫氨酸 (S adenosyl L methionine ,SAM)是生物体硫代谢的重要中间代谢物质 ,在体内起着转甲基、转硫基、转氨丙基的作用 ,具有重要的药用和保健价值。将酿酒酵母来源的SAM合成酶 2基因置于GAP启动子调控下 ,构建胞内组成型表达质粒 ,并电转化至毕赤酵母菌株GS115。经Zeocin抗性和培养筛选到一株高产SAM的重组菌。对重组菌表达工艺的研究表明 ,碳源、氮源、pH和溶解氧对SAM的累积有较大影响。在优化条件下 ,重组细胞培养 3天 ,SAM累积量可达 2 .49g/L。