提高农杆菌转化水稻频率的研究

以16种重要的籼稻和粳稻栽培品种为材料,研究了影响农杆菌转化水稻频率的有关因素,结果表明,CC培养基是绝大多数水稻全国组织的最适诱导与继代培养基;添加2．5－5mg/L ABA可以有效地改善水稻愈伤组织的质量,籼稻愈伤组织所需的筛选剂浓度低于粳稻愈伤组织所需的浓度,根癌农杆菌EHA105菌株对水稻的转化效果优于LBA4404和AGL1菌株的效果,头孢霉素对农杆菌的抑制效果优于羧苄青霉素的效果,共培养后进行适当的干燥处理既可增强脱菌效果,又可提高转化频率,应用我们所优化的农杆菌转化技术体系,获得了10个品种的水稻转基因植株。     

基因枪转移Bar基因获得抗除草剂(Basta)的糜子蔗克隆再生植株

用糜子蔗(sorghum×sugarcane)×millet sorghum茎尖愈伤组织为受体,通过基因枪轰击将Bar基因转入糜子蔗细胞;用除草剂Basta含量分别为1、2.5、5、10mg/L的8114诱导与分化培养基上选择抗性愈伤组织;在Bast a含量为1与1.5mg/L筛选培养基上,选择出3个快速增殖并大量再生绿苗的体细胞无性系(Clone),如BarC1、BarC2、BarC3;BarC1、C2再生植株用Basta含量为1、2.5-5mg/L的溶液进行抗性检测,证明这些小植株具有极强的抗性。 Abstract:The Bar genes were introduced into〔(sorghum×sugarcane) ×millet sorghum〕callus cells using particle bombardment.The callus were cultured on the 8114 media with Basta,the Bastas concentration is 1,2.5 and 5,10mg/L.3 Clones with regenerated capacity were screened out on the media with Basta 1,2.5mg/L,for example BarC1,BarC2,BarC3.The regenerated plant from BarC1、BarC2 were cultured on the solution with Basta 1.5,2.5,and 5mg/L,high resistance were obtained in these regenerated plants.     

小麦Na+/H+反转运蛋白基因的克隆和特性

以水稻(Oryza sativa L.) Na+/H+反转运蛋白cDNA片段为探针,从小麦盐胁迫cDNA文库中筛选和克隆了2个小麦Na+/H+反转运蛋白基因,分别命名为TaNHX1 和 TaNHX2.序列分析表明TaNHX1为2 029 bp,包含一个完整的1 638 bp的ORF,编码546个氨基酸,其中含有DIFFIYLLPPI跨膜区.TaNHX2为1 693 bp,包含部分ORF及808 bp的3′-UTR.这2个基因与已知的水稻、拟南芥(Arabidopsis thialiana)和滨藜(Atriplex gmelini)中的同类基因NHX的相似性约为70%.RT-PCR分析表明小麦苗经400 mmol/L NaCl处理1 h后,TaNHX1的转录水平有所提高.     

药物诱导玉米远缘杂种雌配子体产生异源种质纯系(英文)

中国玉米种质资源少,只有远缘杂交才有可能获得遗传多样性。但是,远缘杂交Ｆ２的疯狂分离,使得一个优良性状的稳定往往需要经过多代选择,耗时费力。我们利用从孤雌生殖产生的纯合２倍体,仅２～３年即选育出了优良异源种质纯系５４０（Ｆｉｇ．１）,而常规育种至少要５～６年。本工作选用ｚｉ３３０,旋９,ＭＯ１７,黄早４等自交系与远缘种属２倍体多年生类玉米（ＤＰ）杂交,将其Ｆ１的ＢＣ１去雄,在花丝上喷撒ＭＨ,ＤＭＳＯ,ＰＥＧ,诱导孤性生殖。纯系５４０的株高、穗位、穗长等农艺性状（Ｆｉｇ．３）优于ＤＰ（Ｆｉｇ．２）,但其抗逆性优于亲本ｚｉ３３０。染色体分带结果：纯系５４０（Ｆｉｇ．６）的总带数为８,与亲本（Ｆｉｇ．４＆５）相同。但其Ｃ带特征,一方面,兼有二者的特点,如：第２对同源染体的一条染色体长臂,和第５对同源染色体的两条长臂均表现ＤＰ的Ｃ带特征,为异染色质末端带;另一方面,出现两者之间没有的现象,如：第８对同源染色体的长臂近末端显示异染色质带,为同型配对,而ｚｉ３３０的笫８对同源体不显带。这可能是染色体重组的结果。