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1.
从谷氨酸棒状杆菌中已经分离到质粒pxzl0145,该质粒带有氯霉素抗性。通过电子显微镜和BamH I酵切后在1%琼脂糖凝胶电泳上测定pXZl0145质粒的大小为5.3kb。用Bam—HI、PstI、EcoRI、saII等限制酶进行酶切,并用BamH I+sa1 I、BamH I+Pst I、Pst I+sal I、EcoR I+Pst I、EcOR I+BamH I等双重酶切,得到pxzlol45限制性内切酶的图谱。证明BamH I和Pst I为单一酶切点。将pxzl0 145与pBR322利用BamH I切点连接得到一嵌台质粒pxz34。这一质粒能在大肠杆菌中复制,在大肠杆菌中表现有氨苄青霉素和氯霉素的抗性,但是抗氯霉素的能力大大降低,只抗2Y/ml。  相似文献   
2.
CpG序列的免疫激活机理及应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
CpG序列是一些在动物体内具有强烈的免疫激活功能的寡聚脱氧核苷酸。本文探讨了CpG 序列在动物体内激活免疫反应的作用机理,概述了CpG应用研究的进展,展望了CpG 序列的应用前景  相似文献   
3.
降钙素基因相关肽基因直接注射大鼠   总被引:6,自引:0,他引:6  
所设计的基因表达一个含降钙素基因相关肽(CGRP,37个氨基酸)、及其N端信号肽和C端酰胺化位点的多肽.该基因克隆到哺乳动物表达载体pBPV上并构成pBPV-CGRP.将此质粒DNA直接注射自发高血压大鼠并导致其血压在注射样品后3~22 d内明显下降,下降幅度超过了12%,在第16天甚至达到了24.42%.基因直接注射比CGRP本身的降压作用维持时间更久.  相似文献   
4.
以猪IgG重链恒定区为抗原载体的抗口蹄疫病毒DNA疫苗的研制   总被引:10,自引:0,他引:10  
口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是当今世界上最为严重的家畜传染病之一,主要危害猪、牛、羊等偶蹄动物.FMD的致病原为FMD病毒(FMDV),属小RNA病毒科口蹄疫病毒属,有A、O、C、SATⅠ、SATⅡ、SATⅢ及AsiaⅠ共7个血清型.FMDV结构较简单,完整的病毒颗粒由4种结构蛋白VP1、VP2、VP3及VP4各60个拷贝构成的衣壳包裹一条单股正链RNA组成,其中VP1是主要的抗原蛋白[1].  相似文献   
5.
基因疫苗--防治疾病的新武器   总被引:15,自引:0,他引:15  
基因疫苗(genevaccine)又名DNA疫苗(DNAvaccine)。基因疫苗常被称作“裸”DNA疫苗。它不含肽、蛋白质或病毒载体,只是由来源于病原体的一个抗原编码基因及作为其载体的质粒DNA组成。这段抗原编码基因可在活体细胞中控制合成抗原蛋白,从而引起免疫反应。它所合成的抗原蛋白类似于亚单位疫苗,区别只在于基因疫苗的抗原蛋白是在免疫对象体内产生的。1990年,Wolff等发现,对肌肉直接进行DNA注射能够得到表达的蛋白产物,并指出,这可能为发展疫苗提供新的途径。1993年,Ulmer等将携带流感病毒核心蛋白编…  相似文献   
6.
在基因工程技术的研究中,如何改善转化 的有效性是一个非常重要的研究课题,它直接 影响到实验的成败。1970年Mandel等[51发现 经氯化钙处理的E. coli细胞可以吸取I噬菌 体DNA, 1972年Cohen等[3,证明氯化钙处理 过的细胞对于质粒DNA也是一个很有效的受 体。1979年Dagert等〔‘,报道了延长氯化钙处 理时间能提高质粒DNA的转化效率4-6倍。 而目前在E. coli克隆化系统中基本上仍沿用 Cohen转化法。 本文报道我们对Gagert方法作了某些改 进,使转化效率进一步提高20多倍,为提高工 作效率提供了有效的方法。  相似文献   
7.
棒状杆菌启动功能片段的克隆和顺序测定   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
利用大肠杆菌(Escherichia Coli)的白动子探针质粒pGA46-4,从谷氨酸棒状杆菌(Corynebacrerium glutainicum)染色体DNA中筛选启动功能片段,并测定了重组质粒pGA46-4上的一个约0.4kb的启动功能片段的核营酸顺序。利用pGA46-4和棒状杆菌质粒pXZ10145的EcoRI大片段组建了在大肠杆菌和力士棒杆菌(Corvnebacierium herculis)中都能复制的穿梭质粒pXZ10。  相似文献   
8.
增殖Blp7、Blp11、Blp16这一类群噬菌体并抽提其DNA,用电镜法测定噬菌体DNA长度为62.75±1.47 kb,并证实它们与λ噬菌体相似,含有一个能使DNA环化的粘性末端。DNA经碱部分变性后,电镜观察可以识别Blp 7 DNA分子的R端与L端。用限制性内切酶EcoR1、BamHI酶切Blp7及Blp16 DNA,经琼脂糖凝胶电泳后,观察到DNA分子的多态性。  相似文献   
9.
噬菌体Chmon 4A是噬菌体λ经过改建而成的,可用作基因工程的载体。由于这种噬菌体载体与相应的宿主菌Escherichia coil DP50supF一起成为EK_2级安全宿主载体系统,同时  相似文献   
10.
一定纯度的λ-DNA是基因工程研究常用的材料。目前所通用的提纯方法氯化铯密度梯度离心法或聚乙二醇6000沉淀-柱层析法,或则耗费昂贵,或则不易纯化。我们采用了一种较简便有效的差速离心法制备和纯化λ-DNA,介绍如下: 采用λ噬菌体溶源性大肠杆菌[Escherichia  相似文献   
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