小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法

目的：建立一种简易高效的成年小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法。方法：取成年昆明小鼠胰脏,用胶原酶法急性分离得胰腺腺泡细胞,加荧光染料fluo-4-AM标记胞内钙;以乙酰胆碱（ACh）为兴奋剂作用于胰腺腺泡细胞,激光扫描共聚焦显微镜发射488 nm激光并同步、实时、动态地记录此过程中胰腺腺泡细胞产生的钙振荡。结果：1一定浓度的ACh（如100 nmol/L）可稳定地激发胰腺腺泡细胞产生典型钙振荡,且此钙振荡可被阿托品完全阻断;2胞浆内不同部位的钙振荡有强弱不同,但呈同步变化节律;而不同细胞间的钙振荡强弱和节律往往不同;3钙振荡的幅度和节律与Ach具有剂量依赖效应。结论：小鼠胰腺腺泡细胞钙振荡的激光共聚焦成像研究方法简单易行、直观形象、高效、灵活,可作为常规方法使用,具有良好的应用前景和推广价值。     

生物膜通道检测的新技术—膜片钳

从单个细胞来看,生命物质的特征之一是细胞被一层膜所包围。我们已经知道,活细胞的结构比较复杂,其中膜结构实际上涉及到细胞活性的各个水平。例如,在真核细胞中,膜充满了细胞,出现在线粒体,高尔基体和细胞核等。这些细胞膜起到把细胞质分开并为生命过程的发展提供骨架的作用。尽管细胞膜有内外之分,但一般认为它们是互相连通的。人们常把蛋白质或核酸等看作基本“生命”实体,但从更多的证据来看,这些细胞要素在某些类型的膜把它们从周围环境     

桂西壮族人群乙肝病毒基因型研究

To study the distribution characteristics of Hepatitis B virus (HBV) genotypes in groups of the Zhuang nationality of Baishe in Guangxi, the PCR sandwich hybridization-ELISA technique was used to determine the genotypes in 30 patinets of Zhuang nationality with hepatitis B. Geontype B, C, D and non A-F were found in this group, in which 56.6% of them were type D,46.6% type C,33.3% typeA-F, 20% type B, Most patients were found with types C D, D B or C B. It is suggested that there are genotypes D, C, B and non A-F in this area, and the major one was genotype D. There are mixture of genotypes C D, B C, D B in this region, so the HBV genotype might be associated with area and nationality.     

向日葵分子生物学研究进展

向日葵是一种营养价值极高的资源植物,向日葵的研究和生产在当前我国中西部大开发的战略中具有重要的意义。本文对近年来国内外向日葵分子生物学研究的最新进展,在蛋白质、酶、基因及基因工程、分子标记等方面进行了综述。特别对生化标记、分子标记技术在向日葵研究上的应用及所取得的成果作了重点介绍,并对今后向日葵研究工作进行了展望。     

X射线损伤修复交叉互补基因1（XRCC1）单核苷酸多态性与神经胶质瘤易感性关系的meta分析

目的：采用meta 分析方法探讨X 射线损伤修复交叉互补基因1（XRCC1）单核苷酸多态性与神经胶质瘤易感性的关系。方法：研究检索了PubMed、EMBASE、ISI Web of sciences、ScienceDirect 及CNKI 数据库从建库至2012 年9 月关于XRCC1 基因多态性与神经胶质瘤相关性的相关文献。合并的OR 值及其95%CI用于评估不同基因模型与神经胶质瘤风险的关联强度。采用亚组分析和meta 回归分析来探索潜在的异质性来源。结果：研究最终纳入12 篇Arg399Gln、8 篇Arg194Trp 和5 篇Arg280HisXRCC1 位点多态性与神经胶质瘤关系文章用于meta 分析。Arg399Gln 位点多态性在所有基因模型下合并OR 值均有显著意义;Arg194Trp 位点多态性在纯合子基因模型和隐性基因模型下合并OR 值具有显著意义;未发现Arg280His 位点多态性与神经胶质瘤风险相关基因模型。亚组分析和meta 回归分析显示Arg399Gln 位点多态性的所有基因模型风险仅在亚洲人群当中具有显著意义,亚洲人群的风险显著高于白种人群。Arg194Trp对照组人群不符合Hardy-Weinberg平衡（HWE）可能高估了风险。结论：本研究结果显示XRCC1 Arg399Gln 基因多态性仅为亚洲人群的神经胶质瘤风险的候选基因,Arg194Trp 基因多态性的风险可能是由于对照组不符合HWE 的研究所导致的。     

用高效液相色谱法测定鱼样中的维生素D3和E

用高效液相色谱法测定鱼样中的维生素Ｄ＿３和Ｅ徐立红,陈专,徐盈,张甬元（中国科学院水生生物研究所,武汉４３００７２）ＭＥＡＳＵＲＥＭＥＮＴＯＦＶＩＴＡＭＩＮＤ＿３ＡＮＤＶＩＴＡＭＩＮＥＯＦＦＩＳＨＳＡＭＰＬＥＳＢＹＨＰＬＣ￥ＸｕＬｉｈｏｎｇ,Ｃｈｅｎ...     

新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因的克隆和抗冻活性分析

根据GenBank中已发表的昆虫抗冻蛋白基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR技术结合3'-RACE扩增的方法,从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲 Microdera punctipenis dzunarica中获得了长约294 bp不含信号肽的抗冻蛋白cDNA片段,命名为MpAFP5,其全长序列为363 bp(GenBank注册号为：AY821792)。基因测序结果表明, MpAFP5-cDNA片段与加拿大拟步甲Dendroides canadensis AFP 8基因片段、黄粉甲Tenebrio molitor THP 4-9基因片段的核苷酸同源性分别达68.4%和71.8%,氨基酸序列同源性分别达70%和81%。将MpAFP5构建到原核表达载体pGEX4T-1中,重组质粒pGEX4T-1-MpAFP5在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达融合抗冻蛋白,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约为37 kD,Western印迹分析证明MpAFP5在大肠杆菌中正确表达。细菌的抗冻实验结果显示准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白对细菌具有显著的抗冻保护作用,保护效果与抗冻蛋白剂量呈正相关性。     

向日葵品种鉴定和纯度分析的AFLP研究

从杂交油葵A15及其亲本的1/2粒干种子中提取基因组DNA,选用17对引物组合进 行AFLP分析,构建了它们的指纹图谱。17对引物在A系与R系当中共扩增出1125条扩增产物,其中144条带表现出多态性,平均每对引物扩增66条带,不同引物组合产生的DNA片段数目在50～70之间,大小分布于100bp～500bp,多态性比率为12.8%。从中筛选出的2对引物E_AAC/M_CTC和E_ACG/M_CTG可将亲本和子代区分开：引物对E_AAC/M_CTC在A系中扩增出440bp、190bp、160bp 3条特征谱带,在R系中扩增出380bp、350bp、225bp、180bp 4条特征谱带,E_ACG/M_CTG在A系中扩增出了2条特征带480bp和265bp,在R系中扩增出490bp、220bp、205bp、125bp 4条特征谱带,且上述谱带均在子代中出现。用引物组合E_ACG/M_CTG对A15、双亲以及与A15外型十分相似的10个常用油葵杂交种进行AFLP分析,不仅表现出良好的多态性,并能够清楚地将它们加以区分。以其对50粒A15杂交种子进行纯度鉴定,得到与大田纯度检测一致的结果,说明使用AFLP标记检测油用向日葵的品种和纯度是可行的。对现行种子纯度和品种鉴定的方法进行了讨论。     

狂犬病病毒CTN-1V株在人二倍体细胞Walvax-2株的适应传代

目的建立狂犬病病毒固定毒CTN-1V株在人二倍体细胞Walvax-2株上的传代适应株。方法用狂犬病病毒固定毒CTN-1V株经昆明小鼠鼠脑回传后的病毒接种Walvax-2细胞,连续传代,检测各代次病毒的滴度及免疫原性。结果 CTN-1V株能较好地适应Walvax-2细胞,通过连续带毒传代至第7代,病毒滴度可达6.78 lg LD50/mL,并在第10~15代内滴度维持在7.0 lg LD50/mL以上,15~30代滴度稳定在7.0 lg LD50/mL左右。以15代适应毒株CTN-1V-HDC P15制备的疫苗原液,各项指标均符合《中华人民共和国药典》三部(2010版)的要求,疫苗效力在6.0IU/剂以上。结论所获人胚肺二倍体细胞Walvax-2株传代适应狂犬病毒固定毒株CTN-1V-HDC可用于人用狂犬病疫苗的生产开发。     

多层CT灌注成像参数与胃癌患者病理分化程度和血清CEA、AFP、CA72-4的关系研究

目的:探讨多层CT灌注成像参数与胃癌患者病理分化程度和血清癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖抗原72-4(CA72-4)的关系。方法:选取2016年5月到2018年5月期间在我院接受治疗的胃癌患者60例作为胃癌组,根据患者肿瘤细胞不同病理分化程度将患者分成中高分化组(34例)和低分化组(26例),另选取同期于我院进行健康检查的60例健康志愿者作为对照组。比较不同病理分化程度的胃癌患者多层CT灌注成像参数[血流量(BF)、达峰时间(TTP)、Patlak血容量(PBV)、Patlak表面通透性(PPS)],比较胃癌组和对照组血清CEA、AFP、CA72-4水平,分析胃癌患者多层CT灌注成像参数与血清肿瘤标志物的相关性。结果:胃癌组血清CEA、AFP、CA72-4水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。中高分化组PBV、PPS均明显低于低分化组,TTP明显高于低分化组,差异有统计学意义(P0.05),中高分化组和低分化组的BF比较差异无统计学意义(P0.05)。经Pearson法分析显示,胃癌患者的BF、TTP、PBV与CEA、AFP、CA72-4无明显的相关性(P0.05),PPS与CEA、AFP、CA72-4呈正相关(P0.05)。结论:胃癌患者的多层CT灌注成像参数与患者的病理分化程度有关,且部分参数还与血清肿瘤标志物CEA、AFP、CA72-4呈正相关。