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1.
β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化而生成。酰化有化学法和酶法两种。采用青霉素G酰化酶或a—氨基酸酯酶或,a—氨酰转移酶的酶法,具有工艺操作简单、无需基团保护、环境污染轻等优点。继日本人于70年代初试验成功酶法之后,80年代初我们开展了这方面研究。制备方面,胞外酶优于胞内酶;使用方面,固定化酶优于固定化细胞。在用具有青霉素G酰化酶活性的固定化大肠杆菌(Escherichia coli)细胞合成头孢氨苄的基础上,又研究了用固定化巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP931胞外青霉素G酰化酶酰化合成头孢氨苄的条件。本文报道这一研究结果。  相似文献
2.
胞外青霉素酰化酶产生菌的选育   总被引:6,自引:6,他引:0       下载免费PDF全文
利用纸片显色方法,从土壤甲诀速筛选出98株产胞外青霉素酰化酶的菌种,经复筛其中10株酶活力较高,经鉴定均属于巨大芽孢杆菌。经单株分离得46号菌,用这株菌进行了产酶条件的研究,在最适产酶条件下,酶话力比开始提高了3.6倍。在此基础上又进行了物理化学因素处理,得突变株UL-81,酶活力达720u/1 Ooml发酵液。对原株和突变株进行比较,发现UL-81菌落、细胞形态、诱导剂苯乙酸用量及添加时间等明显不同于原株。在500L罐发酵酶活达8 20u/1OOml发酵液,为开始酶活的16倍。  相似文献
3.
固定化细胞生产7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸   总被引:4,自引:3,他引:1       下载免费PDF全文
为了用重排酸制备7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA),我们从20株具有青霉素酰化酶活性的大肠杆菌中筛选裂解重排酸的菌株,发现凡能裂解青霉素G的菌株都能裂解重排酪,其中 Asl.76菌胜酶活力高。  相似文献
4.
为筛选较优的产青霉素酰化酶的菌种,我们从9个属的232株纽菌中选出了19株产青霉素酰化酶的大肠杆菌,其中,AS 1.76和E 110为最好。还对大肠杆菌AS 1.76的产酶条件进行了研究。结果表明,最适的培养基成分是(%):蛋白胨l,苯乙酸0.2,玉米浆0.3,氯化钠0.5;在250毫升的三角瓶中装30毫升培养基时,通气量正合适:培养基的初始pH以7.0为佳;培养时间15小时。在未加玉米浆的培养基中,少量的Fe2+(5馓克/毫升)对酶形成有刺激作用,过量的Fe2+(大于10教克/毫升)是不利的;在培养基中添加0.3%的玉米浆能降低Fe2+对酶形成毒害作用。  相似文献
5.
聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶性质的研究   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
将巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)青霉素酞化酶连接到聚丙烯腈纤维载体上,制成固定化青霉素酰化酶。其表现活力约为2000u/g。水解青霉素G的最适温度为50℃;最适PH为9.0;在PHS.5~10.3、温度50℃以下酶的活力稳定;表观米氏常数Ka为1.33×10-8mol/L;最大反应速度Vm为2.564mmol·min-1;苯乙酸为竞争性抑制剂,抑制常数为0.16mol/L。水解10%的青霉素G钾盐溶液,使用20批,保留酶活力80%。  相似文献
6.
巨大芽孢杆菌BP931胞外青霉素G酰化酶的产生条件   总被引:3,自引:2,他引:1       下载免费PDF全文
研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7%,氮源1号0.5%,酵母膏1.0%和苯乙酸0.8%组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲酸为底物,培养滤液酶活力为9.0IU/ml。诱导物苯乙酸于培养6h后加入,酶活力可以提高到11.0IU/ml。Ca2+、Al3+、Sn3+、Mn2+和Fe2+离子降低酶的形成;Cu+和C02+离子显著抑制菌生长,降低酶的形成;Zn2+,Cd2+和Hg2+离子完全抑制菌生长和酶形成。  相似文献
7.
固定化大肠杆菌AS1.76细胞酶促合成头孢立新的研究   总被引:3,自引:2,他引:1       下载免费PDF全文
本文报道固定化大肠杆菌(E.coli)AS1.76细胞酶促合成.的研究结果。用2%7一ADcA,4%。PGME,在pH6.0,10℃一15℃进行反应,头孢立新的合成率达到82%。在上述条件下,用固定化细胞柱制备头孢立新,每次投7-ADGA log,PGME 20g,平均得头孢立新12g,收率为70.6%。  相似文献
8.
酶法合成羟头孢霉素   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
本文报道具有青霉素酰化酶的大肠杆菌(E. coli PN-66)细胞酶促合成羟头孢霉素的研究结果。酶反应的最适温度为20℃,最适pH为6.0。羟头孢霉素的合成率随着母核7一氨基脱乙酰氧基头孢烷酸的浓度的增加而提高,随侧链对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐在与7一氨基脱乙酰氧基头孢烷酸的配比中的增加而提高。苯乙酸和苯氧乙酸对羟头孢霉素的合成有着强烈的抑制作用。在合适的条件下,羟头孢霉素的合成率可达90%以上。  相似文献
9.
10.
选出了一栋产氨基苄青霉素酰化酶的北京棒状杆菌(Corynebacteria pekinense) AS1.586,并对其产酶条件进行了研究。结果表明,最适培养基成份为(%):L-谷氨酸钠0.2,酵母膏0.2,磷酸氢二钾0.3,氯化镁0.1,硫酸亚铁0.01,葡萄糖2,硫酸镉0.1,牛肉蛋白胨0.7,起始pH7.0,通气量在250ml 三角瓶中装30ml发酵培养基为最适,于28℃,180转/分的旋转摇床上振荡培养24小时,在此条件下最终酶活力可达5.4u/ml。  相似文献
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