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1.
2.
1995年云南瑞丽HIV1毒株的基因变异和分析   总被引:28,自引:3,他引:25  
从1995年瑞丽静脉注射毒品者及其配偶26人的血样中,经PCR扩增细胞内HIV基因并对其envC2-V3区进行测序,结果发现18人为B亚型HIV1,8人为C亚型HIV1毒株,在瑞丽以B亚型毒株为主,与我们以往报告一致,C亚型毒株的出现曾有报告,我们进一步分析发现,C亚型毒株感染者多在1994和1995年被感染,根据其核苷酸序列测定的基因离散率(2.25%),远小于B型毒株(6.7%),也说明它是近  相似文献
3.
中国首例人类免疫缺陷病毒(HIV-1)A亚型毒株的鉴定   总被引:16,自引:1,他引:15  
中国首例人类免疫缺陷病毒(HIV-1)A亚型毒株的鉴定苏玲邢辉羊海涛1罗小光2邵一鸣(中国预防医学科学院艾滋病参比实验室,北京100050)关键词人类免疫缺陷病毒(HIV),艾滋病(AIDS),亚型,套式聚合酶链式反应(nested-PCR),序列分...  相似文献
4.
广西壮族自治区HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析   总被引:12,自引:0,他引:12  
使用PCR技术对14份广西HIV-1阳性感染者外周血单核细胞(PBMCs)样品进行扩增,获得HIV-1膜蛋白(env)基因的核酸片段,并对其C2-V3及邻区350-450个核苷酸序列进行了测定和分析。结果表明,14份样品中9份为泰国B(B′)亚型,5份为E亚型毒株。其中B′亚型毒株的基因离散率为4.2%,与A-E参考亚型及部分B亚型代表株序列相比较,与包括泰国、缅甸及云南德宏在内的B亚型毒株序列十分接近,相互之间基因离散率在3.0%-4.4%的范围内;而E亚型毒株的基因离散率为2.1%,与国际E亚型毒株的基因离散率最近,为5.6%,与其它国际参考亚型基因离散率很远,在21.1%-27.3%。根据以上数据及其它资料提示,广西存在B′和E两种亚型的HIV-1的流行,且其B′亚型毒株的传入,与流行在云南德宏州的相同亚型HIV-1毒株密切相关,而E亚型毒株则可能是由泰国经越南传入广西的  相似文献
5.
感染性马传染性贫血病毒嵌合克隆的构建   总被引:11,自引:0,他引:11  
在已有的全长感染性克隆pFD3的基础上,构建了新的低拷贝的全长克隆pLGFD3-8。按照疫苗制备过程中env基因的变化情况,采用基因替换和定点突变的方法,构建了一系列具有马传染性贫血病毒(EIAV)强毒株env基因及其主要突变特征的嵌合克隆。利用这些克隆转染FDD细胞,并用逆转录酶活性检测和PCR方法确定其感染性。结果发现,在FDD细胞中传代3次后,可在细胞培养物中检测到逆转录酶活性和原病毒DNA的存在,在电镜下可以观察到典型的EIAV病毒颗粒。这一结果为进一步研究马传染性贫血病毒致病的分子机制和免疫保护机理奠定了良好的基础。  相似文献
6.
应用异源双链泳动分析法快速确定(HIV-1)基因亚型   总被引:10,自引:0,他引:10  
应用异源双链泳动分析法(Heterouduplex mobility assay,HMA),对来自我国云南、四川、新疆、浙江、广东、福建、天津7省市73份HIV感染者样品,进行了HIV-1膜蛋白(env)基因片段亚型分析。通过HMA能确定亚的有70份,占样品总数的95.89%(70/72)。其中A亚型2.86%(2/70),F亚型2.86%(2/70),泰国B亚型18.58%(13/70),欧美B  相似文献
7.
我国HIV-1B'/C重组流行株Tat蛋白的表达、纯化及功能分析   总被引:7,自引:0,他引:7  
根据全国HIV分子流行病学研究发现,B'和C亚型HIV-1在我国发生了重组,并以优势株形式在我国广泛流行.为了探讨这种HIV-1B'/C重组毒株tat基因的变异与其表型之间的关系,利用pET表达系统在大肠杆菌中高效表达了三种不同基因变异类型的Tat蛋白,重组蛋白占菌体总蛋白的26%,Western blot显示较好的反应原性,并通过金属鏊合层析纯化了目的蛋白.荧光素酶活性检测表明:体外表达的Tat蛋白具有明显的生物学活性,可以反式激活HIV LTR引导的报告基因的表达;三种Tat蛋白在激活活性上的差异与流行现场检测的病毒载量的高低存在明显的对应关系,说明tat基因的变异可以引起病毒生物学特性的改变,进而影响病毒的流行特征.此结果为进一步研究我国HIV重组毒株的基因变异特征及变异规律奠定了基础.  相似文献
8.
研究我国艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒样颗粒(VLP)候选疫苗的免疫原性,为疫苗进行灵长类实验提供实验依据。将gag和gag-V3 VLP不同剂量(50μg、10μg、1μg)在有佐剂(氢氧化铝)和无佐剂条件下皮下免疫小鼠,然后眼眶采血,用ELISA法观察免疫鼠血清中抗体与剂量关系,以及中和抗体滴度和抗体IgG亚型IgG1和IgG2a的水平。同时取鼠脾淋巴细胞,体外抗原刺激后收取淋巴细胞分泌上清  相似文献
9.
HIV—Pol基因的套式PCR检测   总被引:6,自引:0,他引:6  
王斌  邵一鸣 《病毒学报》1994,10(4):357-363
10.
为探索Semliki森林病毒(SFV)衍生的复制型DNA载体可否用于HIV疫苗的候选载体,对该载体与传统DNA疫苗载体对HIV-1Pr55^gag的表达与体液免疫原性进行了系统比较研究。将野生型(wtgag)及密码子改造(syngag)的HIV-1ⅢB gag基因分别克隆于SFV DNA载体及传统DNA疫苗载体[pCDNA3.1( )],对其Pr55^gag细胞内表达水平、Pr55^gag病毒样颗粒释放、以及在BALB/c鼠的体液免疫原性进行了比较。在293T、H1299、C2C12和BHK细胞系中,SFV-wtgag可以Rev非依赖方式有效表达Pr55^gag,而pC-wtgag转染的细胞不能有效表达Pr55^gag,从而不能诱导小鼠产生免疫反应。虽然SFV质粒的细胞转化效率明显低于pCDNA载体,SFV-wtgag和SFV-syngag在细胞内Pr55^gag的表达量与pC-syngag相似,而Pr55^gag病毒样颗粒的释放明显低于pC-syngag。在肌内注射免疫的小鼠中,低剂量(0.1和1.0μg)的SFV及pCDNA gag表达质粒均未诱导出GAG特异性免疫反应。在高剂量(10,30,100μg)免疫组中,与SFV gag表达质粒相比,pC-syngag可诱导出较高水平的TH1型GAG特异性抗体。SFV-syngag较SFV-wtgag可诱导出高水平的体液免疫反应。结果提示,SFV衍生的复制子单独使用不能在小鼠诱导出优于传统DNA疫苗载体的HIV01 GAG特异性体液免疫反应,其原因可能与病毒样颗粒的释放有关。密码子改造的gag基因的优势在SFV载体系统中得到了进一步证实。  相似文献
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