藜钙依赖磷酸激酶基因CaCPK的克隆及胁迫表达

以耐盐植物藜(Chenopodium album)为材料,利用同源克隆技术获得了7个CDPK基因核心序列,并将其命名为CaCPK1–7。随后通过RACE技术成功获得CaCPK1–3的开放阅读框(ORF)序列,其ORF分别包含长度为1 632、1 704和1 590 bp的核苷酸序列。CaCPK1–3分别编码由543、567和529个氨基酸残基组成的钙依赖型蛋白激酶。定量PCR实验显示,CaCPK1–4受盐胁迫诱导明显上调表达,随胁迫时间增加不同基因呈现各异的表达规律。对CaCPK1–3在其它非生物胁迫下的表达分析显示,CaCPK1、CaCPK2和CaCPK3的表达均受外源ABA和H2O2的调控,H2O2合成抑制剂DPI和ABA合成抑制剂Na2WO4显著抑制300 mmol·L–1NaCl处理下CaCPK1、CaCPK2和CaCPK3的表达。研究结果为揭示藜在盐胁迫信号转导过程中CDPK基因家族的功能提供了理论依据。  

藜磷酸肌醇5-磷酸酶基因(CaP5P)的表达分析和胁迫响应检测

植物通过多种信号途径感知外界环境变化，从而引发一系列的信号级联反应，其中磷脂信号途径起着重要的作用。本研究从藜盐胁迫差减文库中获得了一个EST05序列，利用RT-PCR检测了其在非生物胁迫下表达趋势，显示EST05序列在非生物胁迫下的表达有升高。随后利用RACE技术获得其全长编码序列，测序结果显示其与蓖麻(Ricinus communis) 的磷酸肌醇5-磷酸酶基因(P5P)的同源性达56%，遂将其命名为CaP5P。最后过量表达CaP5P在拟南芥中初步验证了功能，转基因植株表现对盐胁迫耐受性降低的趋势，呈现负调控的特征。本研究对磷酸肌醇5-磷酸酶基因功能的初步研究为磷脂信号途径中负调控组分的分析提供了参考依据。  

新疆部分特色林果果壳的抗菌活性研究

目的：研究新疆特色林果核桃、巴达木果壳乙醇提取物的抑菌特性。方法：用滤纸片法检验果壳乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和变形杆菌的抑菌活性,通过液体培养基稀释法测定最低抑菌浓度。结果：巴达木乙醇提取物（25%乙醇提取10 h）对大肠杆菌有较好的抑菌效果,最低抑菌浓度（MIC）为25%;核桃乙醇提取物（25%乙醇提取24 h）对大肠杆菌有较好的抑菌效果,MIC为6.25%。结论：核桃、巴达木果壳乙醇提取物对受试菌具有较好的抑菌效果,为进行大规模开发利用提供了有效依据。  

大麦与油菜种皮特异启动子表达模式的比较

启动子位于转录起始位点上游并能特异性地结合RNA聚合酶,其作为调控序列驱动外源基因在异源植物中表达,从而实现转基因的高效性,具有时空表达特异性的启动子对获得有效转基因植物及产物具有重要意义。为了解种皮特异启动子的表达模式,该研究基于前期报道的序列,通过同源克隆的方法分别从大麦和油菜中克隆获得Gerb和Bntt两个种皮特异性启动子,并对其进行生物信息学分析,构建了Gerb::GUS和Bntt::GUS植物表达载体并转化拟南芥,通过组织化学染色观察了GUS的表达情况。结果表明:两种启动子序列中都含有多拷贝种皮特异表达启动子元件以及多种胁迫诱导响应元件; 转基因拟南芥幼苗期,大麦Gerb种皮特异启动子驱动GUS全株表达且子叶和下胚轴较真叶和根中表达量高; 油菜Bntt种皮特异启动子表达较弱; 成株期,Gerb在不同组织(叶片、茎、花序和角果)中均有表达,未显示组织特异性; Bntt仅在叶片及角果维管束中有微弱表达。在各种非生物胁迫下,Gerb表达模式未发生显著变化,而Bntt仅在盐胁迫下显示很强的角果和种子特异性表达,其他胁迫未见明显表达。以上结果显示,大麦种皮特异性启动子Gerb和油菜种皮特异性启动子Bntt在时间和空间表达模式上存在差异,这对今后选择种皮特异启动子具有参考作用,但其具体机制仍需进一步研究验证。